Question 1

不死化細胞株と幹細胞株の違いは何ですか？

Accepted Answer

不死化細胞株は、細胞周期調節に影響を与える変異を持つ多細胞生物から派生し、無期限の増殖を可能にします。幹細胞株は、成体または胚組織から自己更新能力を持つ多能性細胞を分離して生成されます。両者は適切な条件下で培養において無期限に維持できますが、幹細胞は多能性を保持する一方で、不死化細胞は保持しません。

Question 2

セル培養培地を定期的に変更することが重要なのはなぜですか？

Accepted Answer

細胞培養培地では時間とともに有毒な代謝物が蓄積し、pHを下げ、栄養素の利用可能性を低下させます。新鮮な培地は細胞の健康を維持し、継続的な増殖をサポートします。フェノールレッドのような培地色指標は変更が必要な時にシグナルを発します—オレンジは新鮮な培地を、黄色は直ちに培地を変更する必要がある酸性条件を、ピンクはpHが基本すぎることを示します。

Question 3

90%のコンフルエンシーとはどういう意味で、細胞のパスネージにどうして重要ですか？

Accepted Answer

コンフルエンシーとは、培養容器の表面が細胞で覆われている割合のことです。90%のコンフルエンシーでは、接着細胞が容器底のほとんどを覆い、過剰な増殖を防ぎ、細胞の健康を維持するために、移植する必要があります。コンフルエンシーをモニターすることで、細胞は拡大に最適なタイミングで分裂させることができ、毒性代謝物が蓄積するのを防ぎます。

Question 4

完全な細胞培養培地の必須成分は何ですか？

Accepted Answer

完全培地には、成長因子として熱処理された胎児ウシ血清などの血清が必要であり、汚染を防ぐためにペニシリンやストレプトマイシンなどの抗生物質、そして増殖を延長するために線維芽細胞成長因子などの追加の成長因子が必要です。各細胞株には、その必要性に合わせた特定の成長補助コックテールが必要です。使用していない場合は、完全培地を4°Cで保管してください。

Question 5

トリプシンはどのようにして培養プレートから付着細胞を除去するのに使用されますか？

Accepted Answer

トリプシンはタンパク質を切断する消化酵素で、細胞をプラスチック表面に結合させます。細胞はまずカルシウムとマグネシウムを含まないリン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、次にトリプシンを加え、37°Cで約5分間インキュベートします。細胞表面のタンパク質を傷つけないように、タイミングに注意が必要です。タンパク質分解を止めるために新鮮な培地を加え、細胞を円錐管に移して数える前に using ヘマサイトメータの方法と応用 を転送します。

Question 6

標準的なトリプシン処理では除去が難しい細胞を除去する代替方法は何ですか？

Accepted Answer

酵素消化に敏感な細胞やプレートに非常に付着している細胞の場合、セルスクレーパーを使用して培養容器の底から優しく細胞を除去できます。あるいは、生理学的ピペットを使用して媒体で洗浄しながら、しっかりとスクレーピングする動きをすることができます。機械的解離には注意が必要です。これらの方法では繊細な細胞が損傷する可能性があるからです。

Question 7

単層フラスコよりも速く細胞培養を拡大するにはどうすればいいですか？

Accepted Answer

多層フラスコは、単層フラスコと比較して3〜5倍の細胞培養を拡大し、細胞増殖のより速く、より再現可能なスケールアップを可能にします。これらの特殊な培養容器は、細胞増殖のための表面積を増加させ、適切な培養条件を維持しながら効率的に多数の細胞を生成するのに理想的です。

細胞の継代 - 評価クイズ