に十字架を実行するためのメソッドエノコログサ、新モデルシステム

この手順の全体的な目標は、草の新しいモデルシステムであるcter verusのクロスを実行する方法を示すことです。これは、最初にピナクルを選択、トリミング、およびラベル付けすることによって達成されます。2番目のステップは、トリミングされた穂を摂氏48度の水浴に浸して去勢することです。

次に、トリミングされたピナクルは、花粉を落とすピナクルによって受粉のためのメスとして使用されます。最後のステップは、他家受粉の2週間後に種子を収穫することです。最終的に、推定ハイブリッド種子のガス染色は、技術の有効性を示すために使用されます。

この手法の主な利点は、物理的な去勢などの既存の方法よりも侵襲性が低く、実験室で確立するのが比較的容易であることです。この手法は、交配を行うことを容易にすることで、cter verusの遺伝子モデルとしての採用を加速させるのに役立ちます。まず、散水用のセルを1つ取り出してから、トレイに4×9のセルを入れます Metro Mix 360で。

次に、細胞を軽く霧吹きし、土壌の表面に種子を1個ずつ播種します。次に、種子を土の層で覆い、厚さ0.5センチメートルの土の表面にミストをかけて湿らせてから、底から水を溜めます。種まき後、1日1〜2回、水やりをしすぎないように注意しながら、細胞に底から水をやり続けます。

成長チャンバーの条件を日中は摂氏31度、夜は摂氏22度に設定し、午前8時30分から午前9時00分まで摂氏15度のプレダ処理を行います。また、12時間の明るい暗いスケジュールを維持し、これらの条件下で相対湿度を50%に設定します。Satter verus a 10.1は、種まきから21〜22日で開花します。理想的には、去勢は午後または夕方に行われます。

1〜5個の花が咲いている各植物の一次五芒星を選択します。次に、五芒星の先端を切り取り、細い鉗子を使用して近位の中央部と基部の下部にあるすべての花を取り除きます。花の10分の1から5分の1しか咲いていない場合。

遠位部の下部、中央部、および近位中央部の上部をさらにトリミングするために、先端を切り取り、穂の基部から花を切り取ります。穂に花の4分の1から半分が咲いている場合は、近位の中央部分をさらにトリミングするために保持し、遠位の中央部分を切り取ります。五芒星を切ったら、手術用ハサミを使って毛を軽く切り取ります。

小花を熱による損傷から保護するために、受粉する領域に剛毛を保持するように注意してください。各小穂について、一番上の成熟した小花を保持します。一番上の小花は、受粉時にアンテシスの可能性が高くなります。

次に、咲いたすべての花とすべての未熟な花を取り除き、尖塔ごとに約20〜30個の花が均等に分布します。次に、各花の片側に赤い油性マーカーで印を付けます。そして、ピナクルフラッグの小花の数を次の情報、去勢の日付、期間、および去勢が行われる温度とともに

穂がトリミングされたら、各プラントのすべての耕うん機を取り外して、メインピナクルの開発により多くのリソースを再割り当てします。去勢の1時間前に、熱処理のためにウォーターバスを摂氏48度に設定します。予熱したら、トリミングしたペンタクルをそっと曲げ、一度に3〜4個を温水に3〜6分間浸します。

五芒星の茎を壊さないように注意してください。五芒星を10以下にする旗の葉は、温水と接触してはいけません。これは、葉組織への熱損傷を防ぐためです。

必要な期間去勢が行われたら、水浴から穂を取り除き、穂から水をそっと振り落とします。次に、去勢された穂をカスタマイズされたマイクロ穴あきパンバッグで完全に覆い、ツイストタイで固定します。マイクロ穴あきパンバッグは、穂のサイズに応じてカスタマイズできます。

最後に、植物を翌日まで成長チャンバーに戻します。2日目と3日目の午前9:00に、去勢された女性と去勢されていない男性の親を成長室から研究室に移動して、十字架を行い、観察し、別の赤を追加します。咲いた、または咲いている花に。

赤い油性マーカーを使用して、穂ごとに咲いた花の総数を記録します。次に、受粉の日付とオスの親の名前をタグに記録して、どのような交配が行われたかを追跡します。私たちの研究室の条件下で男性の親のアンチテーゼのピーク時間を観察すると、男性の親の五芒星の花は午前10時10分頃に同期開いて始まります開くと、葯の完全な運動と花粉の放出が20分後に発生します。

黄色がかったらすぐに受粉を始めましょう。白い葯は男性の親の花に見えます。受粉は、2日目と3日目に、穂から穂への受粉、または葯から柱頭への受粉によって行われます。

オスが去勢された穂と一緒に穂を優しくこすり、受粉を促進し、汚染を避けるために雄の穂を捨てるように、1つの切り離された穂を使用して、各去勢された尖塔が2〜3本の五芒星によって受粉されるまで受粉プロセスを繰り返します。最も効果的な方法は、鉗子を使用した柱頭受粉の葯です。黄白色の葯が咲いている花を選ぶか、葯を選んで、女性の親に花の柱頭を物理的に触れます。

雄の親からの1つの花を使用して、異なる雄の親の受粉の間の去勢された穂に1つの花を受粉させます。鉗子を95%エタノールに浸し、続いてキムワイプで拭いて、異なる交配間での花粉の持ち越しによる汚染を防ぎます。受粉が行われたら、雌の親の穂をカスタマイズされたマイクロ穴あきパンバッグで覆い、ツイストタイを使用して基部に固定します。

受粉後、種子の収穫まで、受粉日の14〜16日後に種子を収穫し、タグを種子と同じ封筒に入れます。両側に赤いマーキングが付いた種子は、制御された遺伝的交配から生じた種子を表しています。赤い印のない種子は、新しく開発された花から生じる種子を表しているため、廃棄してください。

赤いマーキングのある種子を去勢した後、片側だけが自家受粉から生じる種子を表す可能性があります。最後に、種子を摂氏30度で2日間乾燥させます。乾燥した種子は実験室で、理想的には種子室で保管してください。

さらに分析する準備ができたら、必要に応じて物理オブジェクトを削除します。このビデオで説明されている方法は、去勢プロセスを最適化するために、さまざまな温度と治療時間を使用した多数の試験の結果です。このプロセスの成功は、得られたハイブリッド種子の数によって測定されました。

雄の親が記者を運んだテスト交差点の1つからの6つの種子。βグルクロニダーゼの遺伝子コードを示します。レポーター遺伝子により、染色すると種子が青色に変わるため、ハイブリッド種子の数を簡単に数えることができます 一度習得すると、手順を適切に実行すれば、1日に最大15個のペンタクルを交配できます。

このビデオを見れば、Aria verusでクロスを実行する方法についてよく理解できるはずです。