High Resolution Whole Mount <em>In Situ</em> Hybridization within Zebrafish Embryos to Study Gene Expression and Function

Babykumari P. Chitramuthu; Hugh P. J. Bennett

doi:10.3791/50644

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Biology

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JoVE Journal Biology

High Resolution Whole Mount In Situ Hybridization within Zebrafish Embryos to Study Gene Expression and Function

高解像度全マウントその場でハイブリダイゼーション

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10:06 min

October 19, 2013

DOI: 10.3791/50644-v

Babykumari P. Chitramuthu^1,2, Hugh P. J. Bennett^1,2

¹Endocrine Research Laboratory and Department of Medicine,Royal Victoria Hospital, ²McGill University Health Centre Research Institute

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ゼブラフィッシュは、小さな熱帯魚は、脊椎動物の発生と疾患の間に遺伝子機能を研究するための人気のあるモデルとなっている。標的遺伝子の時間的および空間的な表現は次式で求めることができる

この手順の全体的な目標は、ステージ化されたゼブラフィッシュの胚内の特定の対象遺伝子の空間的時間的発現を評価することです。これは、まずin vitro転写を用いて結合ヌクレオチドにジゴ酸素を組み込んでCD NAプローブを作製することで達成されます。次に、胚は定義された発生段階で収穫されます。

真皮を取り出し、胚をマイナス20°Cのメタノールに保存します。次に、消化および固定後、胚を適切なプローブとハイブリダイズします。最後に、胚を抗化合物遺伝子と抗体で染色し、アルカリホスファターゼの基質でシグナルを発達させます。

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