2014年11月16日
私たちは、無傷のツリーの師部を保存し、それを観察するための準備をする技術を提供します。 師部組織に生息する節足動物や微生物などの生物を導入・観察するための師部サンドイッチという装置を創製しています。
この手順の全体的な目標は、節足動物、微生物、および落下組織に生息する他の生物の導入と観察を可能にするAOLサンドイッチと呼ばれる装置を作成することです。提供されるプロトコルは、時にはわずかなバリエーションがありますが、研究者や教育者がキクイムシ、ダニ、線虫、および菌類を研究するための効果的なツールとなっています。まず、適切な木が配置されます。
次に、樹皮を取り除き、Fフロム層を明らかにします。フロムが取り除かれたら、ラボに戻すか、2枚のプレキシガラスの間に置きます。密封してしっかりと固定したら、生物を導入する準備が整います。
研究中の松の木には、数ミリメートルの厚さの独特の流動層があります。研究中の生物は、どの種のFフローが必要かを決定します。ここはアリゾナ州北部のポンデローサ松林です。
私たちは、適度なサイズで、大きな冠といくつかの下の枝を持つ理想的な木を探しています。ここでは、適切な木を見つけました。これらの特性により、流れを取り除くときにすべての枝を切断する必要があるため、厚く、簡単に削除できる流れが提供される可能性があります。
以下は、木を伐採するために使用する装備の例です。木を埋めることは危険であり、適切な安全装備を持った経験豊富な個人のみが行うべきであることを忘れないでください。木が安全に地面に着いたら、枝を取り除き始めます。
次に、ボールを扱いやすい部分に切ります(通常は、木の直径にもよりますが、約6〜8フィート)。さて、いよいよ樹皮を取り除きます。これを実現するために使用するツールの例を次に示します。
ジョンアイスはこのプロセスに不可欠であり、白または淡い黄褐色のヒントが得られるまで樹皮を慎重にこすり落とします。このレイヤーは、後でその有用性を大幅に低下させるため、ガウジングしないことが重要です。木の一部が適切に樹皮を剥がされたら、ナイフを使ってフラムピースを切り取ります。
必要に応じて下側をカットしながら、このレイヤーを慎重に引き上げます。一部の木は、他の木よりも倒れたものを取り除くのが簡単であることに注意してください。忍耐力が鍵です。
難しい木を扱う場合、夏は一般的に落ちたものを取り除くのが簡単な時期です。ビニール袋に5〜7個集めたら、これを真空シーラーバッグに移して現場に持ち込みます。これらのバッグは氷点下より少し上に保管するのが最善です。
これで、このプロトコルのフィールドコンポーネントが完成し、サンドイッチを構築するためにラボに戻ります。サンドイッチを作るために使うものは以下の通りです。底に沿って、さまざまなプレキシガラスプレートとペアがあります。
パラフォームはエッジをシールするために使用され、クランプはプレキシガラスと流れの間にスペースがないことを確認するために使用されます。プレキシガラス片を切断して穴を開けると、90%以上で滅菌されます。エタノールは、流れとサイズの新しい部分を取り除くことによってサンドイッチの構築を開始します。
プレキシガラスの作品にふさわしいです。ガラスはプレキシガラスの代わりにすることもできます。さまざまなサイズのサンドイッチも、さまざまな生物や試験の長さに合わせて作ることができます。
たとえば、キクイムシのペアは、1か月にわたって4デメートル二乗の落下ピースを使用するかもしれませんが、研究が数日以内に行われる場合は、1デメートル二乗のピースのみが必要になります。プレキシガラスの入口の数を変更して、一度に複数の生物を導入することもできます。これは、異なる種による競争や捕食を観察するのに役立ちます。
現在、2インチのパラフォームを使用してエッジをシールしています。他の材料は、非G接着エポキシやワセリンなどの他の材料を使用してシールすることができます。次に、プレキシガラスをフロー層にしっかりと保持するために、エッジの周りに十分な数のクランプを配置します。
これで、研究生物を紹介する準備が整いました。私たちの研究室では、キクイムシや関連する生物を観察するために、しばしばProvidedプロトコルを使用します。毎日のトンネル掘削の長さや産卵など、さまざまなことを観察する絶好の機会を提供します。
また、化学物質の排出物を抽出し、カブトムシを発生させ、生産し、後で分析したり、処理を開始して反応を観察したりすることもできます。ここでは、キクイムシが音響処理から離れようとしています。また、このプロトコルを使用して、ダニ、線虫、昆虫の捕食者も観察しています。
このビデオを見た後、フライングサンドイッチを作成し、特定の学習ニーズに合わせて変更できるはずです。この手順は、効果的な研究ツールであることに加えて、小学校から大学レベルまでの学生の教育および発見目的に最適です。
本記事では、樹木の師管を保存し、観察に向けて準備する方法を紹介します。この手法では「師管サンドイッチ」を作成することで、師管組織に生息するさまざまな生物の研究を容易にします。
樹木組織内の節足動物および微生物コミュニティを研究することは、生物農薬の開発や森林健康管理に寄与する生態学的相互作用への知見を提供します。フロエム・サンドイッチ法(phloem sandwich technique)を用いることで、生物の行動を制御された条件下で観察することが可能となり、害虫駆除研究における標的の妥当性確認を支援します。このアプローチは、翻訳バイオマーカーの特定に関連する宿主-病原体および宿主-昆虫のダイナミクスを明らかにすることで、初期段階の探索におけるリスク低減に役立ちます。
本手法は、仮説検証からリード化合物同定に至る創薬の連続的なプロセスの中に位置づけられ、初期段階の生物学的リスク低減およびアッセイ開発ワークフローを支援します。