High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

Mazen Amatoury; Vera Merheb; Jessica Langer; Xin Maggie Wang; Russell Clive Dale; Fabienne Brilot

doi:10.3791/50935

ハイスループットフローサイトメトリー細胞ベースのアッセイN-メチル-D-アスパラギン酸受容体またはヒト...

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High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

ハイスループットフローサイトメトリー細胞ベースのアッセイN-メチル-D-アスパラギン酸受容体またはヒト血清中のドーパミン-2受容体に対する抗体を検出する

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10:19 min

November 23, 2013

DOI: 10.3791/50935-v

Mazen Amatoury¹, Vera Merheb¹, Jessica Langer¹, Xin Maggie Wang², Russell Clive Dale¹, Fabienne Brilot¹

¹Institute for Neuroscience and Muscle Research, The Kids Research Institute at the Children's Hospital at Westmead,The University of Sydney, ²Flow Cytometry Centre,Westmead Millennium Institute for Medical Research

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

近年、生細胞ベースのアッセイは、表面とコンフォメーション抗原に対する抗体を検出するために首尾よく使用されている。ここでは、患者の大規模コホートの分析を可能にするフローサイトメトリーのハイスループット流を用いた方法を記載している。新規な抗体の検出は、免疫媒介性障害の診断および治療を改善する。

次の実験の全体的な目標は、ハイスループットフローサイトメトリー細胞ベースのアッセイを使用して、患者サンプル中のニューロン抗D two RまたはN-M-D-A-R抗体を検出することです。これは、プラスミド内のヒトD two RまたはN-M-D-A-Rの完全なCDNA配列であるサブクリングによって達成されます。第2のステップとして、ヒト細胞株をトランスフェクションし、ニューロン抗原の細胞表面発現につながります。

次に、トランスフェクションした細胞を、フローサイトメトリーを取得する前に、患者の血清および適切な二次抗体とインキュベートします。細胞表面抗原への抗体結合を検出するために、フローサイトメトリー解析に基づいて結果が得られます。この当社の高3ポートフローサイトメトリー細胞ベースのアッセイは、患者サンプルの大規模なコホートに対して高速、定量的、効率的です。

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