Question 1

実験室でC. elegansを育てるのに最適な温度条件は何ですか？

Accepted Answer

C. elegansは実験の要件に応じて16、20、または25°Cで育てることができます。温度は寿命の速度に直接影響します：25°Cでは、ワームは16°Cよりも2.1倍速く寿命を完了します。より速い成長はワームがより早く成熟し、より多くの卵を産み、より多くの食べ物を消費することを意味し、温度選択が実験設計にとって重要になります。

Question 2

C. elegansはどのようなものを食べ、実験室ではどのように飼育されていますか？

Accepted Answer

C. elegansは、世界中のワーム研究所で使用されているE. coliの標準化された株であるOP50を与えられます。野生では、ワームは分解中の植物物質を食べますが、研究室では線虫成長培地（NGM）プレートまたは液体培地で培養されたOP50を食べます。この標準化された食事は、研究施設間で一貫した実験条件を確保します。

Question 3

C. elegansの培養用NGMプレートはどのように作って準備しますか？

Accepted Answer

線虫培養培地の成分を脱イオン水と組み合わせ、少なくとも15分間オートクレーブし、その後55°Cまで冷却します。必要に応じて無菌添加物を加え、ピペットでペトリ皿に2/3まで注ぎ、一晩乾燥させます。10倍濃度に再懸濁したOP50 E. coliで接種し、一晩乾燥させた後、使用前にUV光にさらす。

Question 4

ワームピックとは何であり、どのように構築されていますか？

Accepted Answer

ワームピックは、パスツールピペットチップに密封された30ゲージのプラチナイリジウム線で作られた道具です。線の端は平らにされ、上に曲げられて杓子の形にされ、そして滑らかに研磨されます。このピックを使用すると、研究者は解剖用顕微鏡の下でワームを個別に操作し、アガー表面を傷つけることなく転送することができます。

Question 5

C. elegans はどのようにして長期保存のために凍結され、回復されるのでしょうか？

Accepted Answer

新しく餓死した幼虫をM9バッファーで洗浄し、クライオチューブに移し、M9バッファー中の30%グリセロールを等量加えて、-80°Cで保存します。回復させるには、室温で解凍し、OP50のある新鮮なNGMプレートにピペットで移し、20°Cでインキュベートします。2-3日後、動物を新しいプレートに移し、表現型を評価する前に1世代分の繁殖を許可します。

Question 6

C. elegansがストレスや過密状態を経験したときに何が起こるのか？

Accepted Answer

飢餓や過密状態になると、C. elegansはdauerステージに入り、ワームが老化しないストレス耐性のある幼虫段階に入ります。この生存メカニズムにより、資源が再び利用可能になるまで、個体群が不利な条件下で持続することが可能となり、dauer幼虫は長期保存や実験操作に有用となります。

Question 7

RNA干渉はC. elegansの遺伝子機能の研究にどのように使用されていますか？

Accepted Answer

研究者は、対象遺伝子dsRNAを発現する大腸菌を含むプレートを準備し、それをワームに与えます。4齢幼虫のワームをRNAiプレートに移して産卵させ、その後、望ましい発達段階で子孫を集め、表現型を評価します。このアプローチは、特定の遺伝子をサイレンシングしてその機能を決定し、病気研究のための開発と再現の線虫の洞察を活用します。

C. elegansの基礎研究のためのメンテナンスについて - 評価クイズ