A Method of Permeabilization of <em>Drosophila</em> Embryos for Assays of Small Molecule Activity

Matthew D. Rand

doi:10.3791/51634

JoVE Journal
Biology

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JoVE Journal Biology

A Method of Permeabilization of Drosophila Embryos for Assays of Small Molecule Activity

の透過方法ショウジョウバエ胚

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10:04 min

July 13, 2014

DOI: 10.3791/51634-v

Matthew D. Rand¹

¹Department of Environmental Medicine,University of Rochester School of Dentistry and Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ショウジョウバエ胚への小分子の導入は、新規化合物、薬物、および毒素の生物学的活性を特徴づけるだけでなく、根本的な発生経路を探査するための大きな可能性を提供しています。本明細書に記載される方法は、 ショウジョウバエ胚モデルの有用性を拡大し、このアプローチには自然な障壁を克服する手順の概要を説明します。

次の実験の全体的な目標は、導入された低分子薬物または毒素の生理活性をテストするために、透過性の卵殻を備えた生存可能なショウジョウバエの胚を準備することです。これは、最初に発生段階の胚を希薄な漂白剤で処理して、外側の絨毛性卵殻層を除去することによって達成されます。2番目のステップは、低分子溶質をブロックする薄いワックス状の卵殻層を枯渇させる溶媒を胚に浸透させることです。

3番目のステップは、胚を薬物または毒素と染料で処理して、卵殻の透過性を測定し、関心のある化合物を導入することです。さらなる開発後、胚を直接画像化するか、免疫組織化学のために処理することができます。最終的に、結果は、免疫試薬またはバイタルタイを使用した蛍光顕微鏡法によって決定される、組織の発達に対する薬物または毒素の活性を示すことができます。

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