Using Fluorescent Proteins to Monitor Glycosome Dynamics in the African Trypanosome

Sarah Bauer; Meghan Conlon; Meredith Morris

doi:10.3791/51647

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Using Fluorescent Proteins to Monitor Glycosome Dynamics in the African Trypanosome

アフリカトリパノソーマにグライコダイナミクスを監視する蛍光タンパク質を使用した

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10:04 min

August 19, 2014

DOI: 10.3791/51647-v

Sarah Bauer¹, Meghan Conlon¹, Meredith Morris¹

¹Department of Genetics and Biochemistry,Clemson University Eukaryotic Pathogens Innovation Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

>jove_content<アフリカのトリパノソーマにおけるグリコソームの動態は、電子顕微鏡や蛍光顕微鏡などの伝統的な細胞生物学技術では研究が困難です。オルガネラの動的な挙動を観察する手段として、蛍光オルガネラレポーターシステムをフローサイトメトリーと組み合わせて使用し、生きた寄生虫のグリコソームダイナミクスをリアルタイムでモニタリングしています。

次の実験の全体的な目標は、生細胞内の糖組成の変化をリアルタイムで観察することです。これは、Pero Somalターゲティング配列PTs 2に融合した蛍光タンパク質を発現させることによって達成されます。融合タンパク質は成熟した糖鎖ゾーンに輸入され、それが蛍光オルガネラになります。

分解とリサイクルは、フローサイトメトリー細胞を介して監視できる蛍光の損失につながります糖質リモデリングをトリガーする要因を特定するために、さまざまな環境条件にさらされます。その結果、栄養不良培地から栄養豊富培地への細胞の継代時の細胞蛍光の変化に基づいて、環境変化に応じて糖組成が変化することがわかりました。したがって、電子顕微鏡や蛍光顕微鏡などの既存の方法に対するこの手法の主な利点は、数千の細胞のリアルタイム分析を可能にすることです。

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