Name: 人間開発の3つのすべての学期の等価時にはアルコールにマウスを公開するために使用蒸気チェンバースの建設 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 27 s
Description: 学ぶアルコール蒸気チャンバーの構築方法と、マウスを用いた妊娠全3学期の胎児アルコール曝露モデル。このカスタマイズ可能な系統は、血中高アルコール濃度を維持し、発達生物学研究に有用です。

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国立衛生研究所によってサポートされているR01-AA015614、R01-AA014973、T32-AA014127およびK12-GM088021を付与します。著者は、技術支援とDRSのためにサマンサL. Blomquistに感謝します。批判的に原稿やビデオを評価するためのケビン·コールドウェル、ドナルドパートリッジ。

すべての動物の手続きは、ニューメキシコ州 - 健康科学大学センター施設内動物管理使用委員会によって承認された。 1。蒸気商工総会<ol><li>上、下、前、後、サイド、ドア（ 図1、表1）のためのビデオで提供さ寸法に丸鋸やジグソーで切断のポリカーボネートシート。 </li><li>丸鋸やジグソーで、フロントパネルの中央にある幅の広い16インチ×8インチの高さの開口部をカット。 </li><li>測定し、室のドアになります10インチのポリカーボネートシートで18インチの上にピアノのヒンジ用の穴をマーク。 </li><li>ドアに、5/16インチのドリルビットとカウンターシンク穴を開け、3/16インチのドリルビットとネジ用の穴を開けます。ネジの頭のためにドアの内側にカウンターシンク穴を開けていることを確認してください。 </li><li>溶接用ポリカーボネートシートを準備します。 </li><li>あちこちに組み立てるNT、＃16ウェルドオンを用いたボトムパネル上に戻し、サイドパネル。 </li><li> ＃16溶接式とパネル間のギャップをシール。 </li><li> ＃16溶接式で上部パネルを取り付けます。 </li><li>溶接部が硬化しながら、所定の位置にすべてのものを保持するためにバークランプまたは重い教科書を使用してください。 </li><li>ドアヒンジを取り付けるための開口部以下のフロントパネル1インチ上にポリカーボネートの12インチピースで1インチを取り付けます。 </li><li>治すために溶接式のために少なくとも24時間を許可します。 </li><li> 12インチ、長さ1インチの長さのPEX管の1枚PEX管の2枚をカット。 </li><li> 5月16日のドリルビットを使用すると、一方の端から12インチPEX管のそれぞれ約1〜2インチで穴を開けます。 </li><li>離れてコネクタからある穴に3/8インチのT型コネクタに2×12インチのPEXチューブを取り付けます。 </li><li> 3/8インチのプラグがPEX管の開放端にキャップ。 </li><li> 4-40小ねじとナットを使用してフロントパネルやドアにピアノヒンジを取り付けます。 </li><li>ガイドとしてドアを用いて、m個室内のフロントパネルに1インチのスペーサー上にピアノのヒンジのために必要な穴を箱舟。 </li><li> 3月16日インチのドリルビットを使用すると、ピアノのヒンジのフロントパネルに穴を開けます。 </li><li> 4-40小ねじとナットを使用してフロントパネルのドア、ピアノヒンジを取り付けます。 </li><li>サイドアームの両側にワッシャーとナットが付いているビデオのようにトグルクランプを組み立てる。 </li><li>フロントパネル上のトグルクランプ用のマークとドリル3/16インチの穴と4-40小ねじとナットでトグルクランプを取り付けます。 </li><li>ドアの内側に3/8インチのゴム球シールを追加します。 </li><li> （5/8インチ）退屈なドリルビットを使用すると、入口ポートのトップパネルの中央に穴を開けます。 </li><li>出口ポートは、背面パネルの下部/中心部の1/2インチの穴を開けます。 </li><li>出口ポート穴に蒸気室の奥壁を貫通した貫通壁のアダプター3/8インチのネジ部を押​​すことにより、出口ポートを組み立てます。からナットを取り付け所定の位置に保持するために、チャンバー内。 </li><li>ポリカーボネートシートから保護カバーを取り外します。 </li><li> T型コネクタにPEX管の1インチのピースを取り付け、内側からチャンバの上部の穴からPEXチューブを強制します。 </li><li>外部から1インチPEX管の上部に3/8インチ90肘を取り付けます。 注：ドアに1/2インチの穴を開け、穴に1/2インチのシールセプタムを挿入します。 </li><li>空気だけで室内を制御するために繰り返して1から22を繰り返します。 </li></ol> 2。ラックおよびエアー配達国会<ol><li>マテリアルリストに記載されているカート/ラックにチャンバーを配置する場合は、製造元の指示に従って、カートを組み立てる。 </li><li>予備のナットとボルトで、気流制御因子を保持するために、ラックにポリカーボネートのスクラップピースを取り付けます。 </li><li>どこでもポリカーボネート、マークとドリル気流レギュレータの3/4インチの穴のスクラップピースオンとナットでレギュレータを添付提供しました。 </li><li>空気流量調節器の入口と出口のポートに3/8インチのスルーACアダプタを接続します。 </li><li>エアレーション石、＃8栓とクイックリリースのインラインコネクタをエタノールフラスコを組み立てます。 </li><li> 図1に示すように、3/8インチTYGONチューブを用いて、空気ポンプおよびエタノールフラスコに流量レギュレータを接続する。 </li><li> 図1に示すように、空気のみ室は、入口3/8インチ、3/8インチのタイゴンチューブ90肘に気流調整器の出口ポートを接続します。 </li></ol><img alt="図1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51839/51839fig1highres.jpg" width="500"> 図1は、蒸気室の構成の概略図。T-コネクタは、低雑音エアポンプに取り付けられている。 T-コネクタの一方の側にのみ空気が直接蒸気チャンバのための空気流調節器に接続されている。他のSIDEを再度分割し、2つの異なる気流調整器、空気用とエタノール1に取り付けられている。示すように、空気室に直接レギュレータに接続されている。エタノール蒸気室、一つの空気流調整器は、フィルターフラスコ内の液をエタノールに浸漬エアレータ石に接続されている。示されるように、フィルターフラスコのサイドアームポートは、エアレギュレータの出力に接続されている。マージされたエタノール蒸気及び空気は、エタノール蒸気室の入口に接続されている。出口管（図示せず）は、室内の換気口に接続されている。 3。テスト蒸気チェンバースとエタノールレベルを調整<ol><li> 、フィルターフラスコに190プルーフエタノール600ミリリットルを追加エアレーション石を挿入し、フラスコのサイドアームにチューブ入口にフック。 </li><li>閉鎖室のドアとエアーポンプをオンにします。 </li><li>約半分の空気がそれと混合されている空気のような液体アルコール流れるように気流制御因子を調整します。 Adjusエタノール室のアルコールと空気の混合流への空気だけエアフロートン。 </li><li>チャンバは空気エタノール濃度を測定する前に少なくとも30分間平衡化することができます。 </li><li>隔壁を介して18G針及び60mlのシリンジで空気を5mlを抽出することにより、空気エタノール濃度を測定する。バック60ミリリットル（1：12希釈）にプランジャーを描くことで室内空気と、そのサンプルを希釈する。製造業者の指示に従って、飲酒を用いて空気エタノールレベルを測定する。室内空気の希釈は、飲酒の検出範囲内のアルコール蒸気のレベルを達成するために必要とされる。 NOTE：アルコール暴露の異なるレベルを使用する場合、希釈を調整する必要があり得る。 </li><li>約4.5〜5グラム/デシリットル（空気のデシリットル当たりの気化アルコールのグラム）の風アルコール濃度を達成するの​​に必要な出発点として、空気流調整器を調整する。 </li></ol> 4。動物の繁殖<ol><li>グループの家の女性は、卵巣のサイクルを同期させるために、少なくとも1週間/ 6マウス（2〜3ヶ月）をC578BL。 </li><li>個別に少なくとも2週間のオスのC57BL / 6マウス（2-5ヶ月）を収容する。 </li><li>同期した後に、交配を可能にするために5日間、独身男性と独身女性の中に入れた。 </li><li>交尾の後、男性を削除し、個別に、女性を収容し、室内に配置します。 </li></ol> 5。前産後エタノール蒸気暴露<ol><li>子犬の死を防ぐために、出生日を除いて（午前6時 - 午後6時から点灯）ライトサイクル中の午前10時から始まる1日4時間、エタノール蒸気に妊娠中のダムを公開します。 </li><li> （G）5、G13-G14、およびG18-G20は妊娠を監視するために妊娠の日にダムを量る;寝具は、女性が取り扱いを最小限にするために体重を測定したことを日に変更されました。 </li><li>毎日それらに吸収され、任意のエタノールを用いてペレットの消費を避けるために、エタノール暴露群のための食糧を交換してください。 </li><li>当日の誕生は、動物にさらさないでください。出産後、P1〜P12から午前10時から始まる1日4時間にわたってダムや子犬を公開します。 </li><li> P2、P8、P12、およびP25に子犬を比較検討する。と追加の取り扱いを最小限に抑えるためにP8とP12にベッドを変更してください。 </li><li>すぐに最後の暴露（P12）の後に、標準的な動物飼育室にケージを移す。 </li></ol>

著者らは、開示することは何もありません。

ここでは、詳細に蒸気吸入室の構築のための方法を記載する。チャンバーを構築するために必要な材料とツールは、商業的供給者の数から容易に入手可能であり、チャンバーの建設のための手順は比較的簡単です。我々はここで説明するシステムは、逆流や混合を防止するために、任意のインラインチェックバルブが含まれていません。私たちは、空気中に私たちはどんな混合または空気中へのエタノールの逆流のみの室を持っていないことを示唆しているだけのチャンバーを任意の検出可能なエタノールを測定することができませんでした。空気は、チャンバは、（それが空気室は、常に飲酒および/またはシリンジ中に存在する残留エタノール蒸気の検出を避けるために、従来のエタノールチャンバにテストされるべきであることに留意されたい）を定期的にエタノール蒸気をチェックすべきである。理想的には、チャンバーは、マウスのケージは、連続してEの期間中に収納することができる動物飼育施設で、専用の部屋に配置する必要がありますマウスを輸送する必要性を排除xposureパラダイムは、それによって応力を低減する。換気口スタンダードルームは、このパラダイムのために必要とされることだけです。部屋は他の研究者と共有されている場...

妊娠中に飲むと有意な影響を受けた個人とその家族の生活の質を低下させる多くの臓器やシステムに永続的な変化を引き起こし、胎児に害を与えることができます。それは、女性の約百分の10から30までは、どんちゃん騒ぎパターン1,2 1-8％の飲用で、米国では妊娠中に飲んでいると推定されている。胎児の発育中にエタノール曝露によって生じる効果の範囲は、集合的に胎児性アルコールスペクトラム障害（FASDs）として知られている。最近の推定値はFASDs米国3 2-5％と高い有病率との公衆衛生上の大きな問題であることを示している。 FASDsのより深刻な症状は発育遅延、頭蓋顔面異常、および学習障害などの神経行動障害、ことを特徴としている胎児性アルコール症候群（FAS）、である。 FASの有病率は、米国で3 0.2から0.7パーセントであると推定されている。 FASDsに現在利用可能な治療は部分的にのみ有効であるより効果的な治療法の開発は、障害のこの複雑なスペクトルの細胞および分子基盤の理解不足によって制限されます。 妊娠は妊娠2の後の段階の間に、検出された禁欲続いてきた前に、国民の先天異常の予防研究（NBDPS）からのデータは、妊娠中の女性は、最も一般的に1 番目の学期中に飲むことを示している。 NBDPSも妊娠中のエタノール消費の第二の最も一般的なパターンは、妊娠2のすべての学期全体の飲酒を伴うことがわかった。この理由は、胎児のエタノール曝露（たとえ低線量で）、妊婦管理へのアクセスが制限され、精神神経疾患のための肯定的な歴史、および虐待またはエタノール4への依存の潜在的に有害な影響についての意識の欠如が含まれています。興味深いことに、NBDPSは、消費の3番目の最も一般的なパターンは1時に禁欲を関与することが報告<supそれは多くの場合、器官形成はほとんど完了しているため飲用が安全であることを想定している&gt;セントと3 番目の学期中に消費に続く2 番目の学期。これは神経回路が深い洗練2を受ける期間であるので、 第3学期は、エタノール誘発神経系の損傷に対する高い感受性の周期である。 NBDPSも1 番目と3 番目の学期中に2禁欲続く2 回目の学期を通して消費を含め、妊娠中に発生するアルコール消費量の他、それほど頻繁なパターンを同定した。 妊娠中の女性で観察されたエタノール消費の異なるパターンをモデル化する試みにおいて、発達エタノール曝露パラダイムの数が最も一般的であり、5,6、ラットおよびマウスで、多様な動物種を使用して確立されている。これらの動物における妊娠期間、通常、ラス人間の妊娠の1 番目と2 番目の学期に相当し、約3週間と、TS。多くのげっ歯類の研究では、この期間中の様々な用量およびエタノール曝露のパターンの影響を評価している。頻繁に妊娠したマウスやラットにエタノールを投与するために使用される方法の例としては、流動食7,8を経由して投与を含む、飲料水9,10、サッカリン甘くソリューション11の自発的な飲酒、胃強制経口投与12、蒸気の吸入13にエタノールを加えて、および皮下または腹腔内注射14。これらの研究の結果は、妊娠の初期段階での暴露は（6,15に概説されている）、脳全体に神経回路を損傷するのに十分であることを実証し、FASDsとヒトで観察赤字のいくつかをで要約している。 げっ歯類を用いた実験も証明されていることを第 3と同等の間の暴露</sup&gt;約ラットとマウスでは出生後の最初の1〜2週間に相当し、人間の妊娠の学期は、かなり脳の発達を損なう可能性があります。この期間中の曝露は、新生児ラットやマウスにエタノールを投与することによってモデル化されています。エタノールは、人工飼育動物16-18、胃内挿管19、皮下注射瘻孔20内を介して供給することを含む様々な方法、および蒸気吸入21,22を使用して、これらの動物に投与されている。これらの研究は、説得力のある脳の成長のスパートがエタノール6の発達への影響に対する高い脆弱性の周期であることを実証した。 上述したように、妊娠のすべての学期中に飲酒は、女性2におけるエタノール消費の一般的なパターンです。しかしながら、比較的少数の研究は、動物モデルを用いて露光のこのパターンの影響を評価している。これらの研究のいくつかはadvantagをとっている第3学期と同等のラットおよびマウスの場合と同様に、 子宮内ではなく、新生児期に発生した大規模な動物のE。これらの動物モデルは、ヒト以外の霊長類23,24と羊25〜27が含まれています。しかしながら、これらの動物モデルが広くコスト高と専門医療施設の必要性、部分的には、FASDs研究に使用されていない。げっ歯類は、より一般的に胎児の発育5に全三半期のエタノール曝露の効果を特徴付けるために使用されてきた。モルモットは、人間28,29のそれに脳の成熟に彼らの大規模な出生前の開発との類似点が与えられ、この点で特に有利で ​​あった。モルモットでは、ヒト第3三半期の等価開発期間を含む子宮内エタノール曝露の効果を特徴付けることが可能であった。これらの動物の比較的高いコスト、ならびにそれらの妊娠の比較的長い持続時間（〜67日）、FASDs研究に取り組んでいくつかの研究室にその使用を制限している。 そのため、生物医学研究での費用対効果と幅広い用途のため、研究者らは、妊娠のすべての妊娠期にエタノールへの暴露をモデル化するために、ラットを用いてきた。初期の研究では、ラットを0.08グラム/デシリットルのダムのピーク血中エタノール濃度（BEC）、その結果胃人工的に飼育する新生児（出生後日数（P）1月10日）を経てエタノールを投与し、続いて流動食を経由して、妊娠中に暴露したそして子犬0.16グラム/デシリットル中。このパラダイムは視神経髄鞘に長期的な変化を引き起こし、小脳30〜32におけるバーグマングリア繊維の数を減少させた。 第3トリメスター相当（P4-9）33,34の一部の間新生児政権が続く胃内挿管を経由してどんちゃん騒ぎ状に妊娠したラットのダムにエタノールを投与した人工的な飼育条件を使用して同様に、マイヤーとの共同研究。 PEAK母体およびPUP BECはは妊娠20日目及びP6の両方で0.3グラム/デシリットルた。この全学期の露出パラダイムは、妊娠33の選択された期間中に公開されるの仔で観察されるものよりも有意に大きかった成長遅延をもたらした。さらに、すべての三半期の間に相当のエタノールに暴露したラットは、小脳プルキンエそれ以外の期間34中に暴露した動物で観察されたものより大きかった顆粒細胞の数の減少を示した。海馬細胞数の減少もこのパラダイムで報告したが、これらの効果は35学期相当の3 回目の間に、主に暴露の結果であると思われた。妊娠ラットおよび新生児マウスの両方に胃内胃管栄養法を介して、エタノール投与することを含む方法は、すべての妊娠初期露光36をモデル化するために使用されている。ダムでの0.13グラム/デシリットル（妊娠17日目）およびP6の仔での0.24グラム/ DLの前記下部電極が得られ、この方法は、誘発されLON海馬と視床下部におけるモノアミン神経伝達物質レベルのG-持続的変化、および海馬37,38で結合タンパク質2 DNAメチルトランスフェラーゼとメチル化CpGの発現を増加させた。同じような露出パラダイム（ダムや子犬での0.2グラム/デシリットル中のBEC = 0.14〜0.2グラム/デシリットル）を使用して、ギル·Mohapel ら 39は、成体ラットの歯状回における新しい未熟な神経細胞の数の増加を検出したことをエタノール誘発神経損傷または成人生まれのニューロンの成熟の変化に代償機構を表すことができる。捜査官はまた、流動食を経由してダムを公開するか、妊娠中や授乳9,40の両方の間に水を飲むことによって、すべての学期エタノール曝露をモデル化しようとしました。それは、典型的には、低子犬BECは（; 41,42 例えば 、0.002〜0.05グラム/デシリットル）になるので、自分の母乳を経由して子犬を暴露の有用性は限られている。 マウスもextensを使用されている発達エタノール曝露の影響を特徴づけるためにively。この動物モデルの多くの遺伝子改変されたマウス系統が5利用可能な付加的な利点を、ラット動物モデルのため、上記の強みの多くの株式。マウスは正常に1 番目 、2 番目または妊娠43,44の第3三半期中にエタノールの効果を特徴付けるために使用されてきた。それはヒトの妊娠三半期のすべてに相当する時にマウスを露出させるために技術的に困難であるので、これらの動物のすべての妊娠初期暴露の影響は、十分に特徴付けられていない。例えば、ラットで成功裡に使用されている人工飼育し、胃の強制経口投与では、マウス45でのより専門的な手順が必要です。我々の知る限り、これまでの唯一の研究では、マウスを使用して、すべての学期エタノール曝露の効果を研究しようとしました。これらの動物を、飲料水デュリエタノール溶液に曝露した妊娠·授乳46 ng の 。母親のBECはは0.07グラム/デシリットルと子犬前記下部電極が決まったが、ダムのものの割合であることが期待されていないでした。 ここでは、アルコールは蒸気吸入室を経由して、妊娠中のダムや新生児の両方に投与されたマウスの全ての三半期のエタノール曝露のための新しいモデルを説明します。蒸気室は従来の設計47に基づいて建設された。私たちは、吸入室を構築し、露出手続きを行う方法についての詳細な手順を提供する。また、達成することができBECはと仔の生存と成長に暴露の影響に関する情報を提供します。

<table><tbody><tr><td>ポリカーボネート 1/4" クリア 48" x 24"</td> <td>McMaster-Carr</td><td>8574K23</td><td>10</td></tr><tr><td>発泡ゴム球シール 3/8" w x 7/32"</td><td>h McMaster-Carr</td><td>93085K67</td><td>10 ft</td></tr><tr><td>溶接 #16</td><td>McMaster-Carr</td><td>7515A11</td><td>3</td></tr><tr><td>ピアノヒンジ 12" 長い</td><td>McMaster-Carr</td><td>1658A11</td><td>2 x 1 フィート</td></tr><tr><td>ホールドダウン トグル クランプ標準</td><td>McMaster-Carr</td><td>5126A26</td><td>8</td></tr><tr><td>PEXチューブ1/2 "</td><td>McMaster-Carr</td><td>51275K88</td><td>10フィート</td></tr><tr><td>有刺鉄線ティーチューブ継手(黒)Pkg 10</td><td>McMaster-Carr</td><td>5463K608</td><td>1</td></tr><tr><td>有刺鉄線プラグ継手(黒)Pkg 10</td><td>McMaster-Carr</td><td>5462K79</td><td>1</td></tr><tr><td>有刺鉄線エルボーチューブ継手(黒)Pkg 10</td><td>McMaster-Carr</td><td>5463K596</td><td>1</td></tr><tr><td>3/8 "スルーウォールアダプター、チューブとネジ付きパイプ</td><td>McMaster-Carr</td><td>5463K851</td><td>1</td></tr><tr><td>プラス小ネジ 4-40</td><td>McMaster-Carr</td><td>91772A112</td><td>1</td></tr><tr><td>小ネジ六角ナット 4-40</td><td>McMaster-Carr</td><td>90480A005</td><td>1</td></tr><tr><td>パネルマウント流量計 2-20</td><td>McMaster-Carr</td><td>41945K76</td><td>3</td></tr><tr><td>フラスコ、フィルター 1,000 ml 6/パック</td><td>VWR</td><td>89001-800</td><td>2</td></tr><tr><td>精密シールセプタム</td><td>VWR</td><td>89084-490</td><td>1</td></tr><tr><td>VWRの黒いゴム製 ストッパー#8 1穴</td><td>VWR</td><td>59581-367</td><td>1</td></tr>つの<tr><td>管のタイゴンR3603 3/8X9/16 50'VWR</td><td></td> <td>89068-556</td><td>1</td></tr>つの<tr><td>管のタイゴンR3603 1/4X11/16 50'VWR</td><td></td> <td>89068-502</td><td>1</td></tr><tr><td>通風器の石P2120</td><td>VWR</td><td>32573-007</td><td>1</td></tr><tr><td>3/8 "20のTコネクターPk</td><td>VWR</td><td>46600-060</td><td>1</td></tr><tr><td>VWR Disconnectors 10</td><td>VWR</td><td>46600-110</td><td>1</td></tr><tr><td>3/8 ホース バーブ バルブ付きインライン カップリング</td><td>コールド プロダクツ 会社</td><td>HFCD17612</td><td>1</td></tr><tr><td>エア ポンプ 中容量</td><td>LMI メーカー</td><td>DB60L</td><td>1</td></tr><tr><td>Nexelate ワイヤー シェルフ 36"W X 24" D X 63" H</td><td>グローバル インダストリアル</td><td>T9A990135</td><td>1</td></tr><tr><td>ステムキャスター (4) 5インチ ポリウレタン ホイール</td><td>グローバル インダストリアル</td><td>T9A500591</td><td>1</td></tr></tbody></table> のセット

人間開発の3つのすべての学期の等価時にはアルコールにマウスを公開するために使用蒸気チェンバースの建設

Construction of Vapor Chambers Used to Expose Mice to Alcohol During the Equivalent of all Three Trimesters of Human Development

開発中のアルコールへの暴露をまとめて胎児性アルコールスペクトラム障害（FASDs）として知られており、形態学的および行動異常の星座になることがあります。スペクトラムの最も深刻な終わりに発育遅延、頭蓋顔面異形学、および神経行動赤字が特徴胎児性アルコール症候群（FAS）が、ある。げっ歯類を含む動物モデルを用いた研究は、FASDsの病態に関与する多くの分子·細胞メカニズムを解明した。妊娠中のげっ歯類のエタノール投与は、妊娠の第一および第二の妊娠期にヒトへの暴露をモデル化するために使用されている。ヒトでの妊娠後期のエタノール消費は、新生児げっ歯類を用いてモデル化されています。しかし、いくつかの齧歯類の研究は、ヒトの妊娠、妊娠中の女性に共通しているエクスポージャーのパターンの全3学期に相当時のエタノール曝露の効果を特徴としている。ここでは、O容易からの蒸気室を構築する方法を示してそれぞれが6つの標準のマウスのケージに収容することができbtainable材料。我々は、すべての3つの学期中に、最小の取り扱いで、エタノールへの曝​​露をモデル化するために使用することができる蒸気室パラダイムを記載している。我々の研究は、妊娠中のダムがエタノールに重要な代謝の耐性を開発したことを示している。しかし、新生仔マウスは、代謝寛容と胎児の数、胎児体重、胎盤重量、子犬/リットルの数、死者の子犬/リットルの数を開発していない、と子犬重量が大幅にエタノール曝露による影響を受けなかった。このパラダイムの重要な利点は、遺伝子組み換えマウスを用いた研究への適用である。さらに、このパラダイムは、動物の取り扱い、胎児性アルコール研究の主要な交絡を最小限に抑えます。

図2Aは、妊娠マウスおよび新生児の子孫の両方が室内の比較的安定したエタノール蒸気の濃度に暴露されたことを示している。これらの4-6グラム/デシリットルの範囲であった。 図2Bは、前記下部電極は、時間の関数として妊娠マウスで達成を示しています。前記下部電極は、標準的なアルコール脱水素酵素ベースのアッセイ48を使用して測定した。 G5で、​​BECははすぐに暴露開始後〜60 mMの2時間に上昇し、4時間曝露期間の終了時にピークとなった。 BECは、徐々に暴露終了後さらに4時間後〜12 mMまで低下した。 G13-14により、G5で検出されたレベルの約60％に前記下部電極の劇的な減少がありました。また、BECはレベルはよりゆっくりと上昇し、妊娠したマウスの血液中のエタノールの短い存在で、その結果、より急速に減少した。近い将来（G18-20）で、前記下部電極は、さらに、G5で検出されたレベルの約30％まで減少した。これらの知見は、developmですと一致している妊娠マウスにおけるエタノールへの迅速な代謝寛容のENT。 図2Cは、</st...

我々は、同時に6マウスのケージを収容し、容易に入手可能な材料を用いてアルコール蒸気室の構成を示す。我々はさらに、人間の妊娠のすべての3学期に相当胎児性アルコール暴露のマウスモデルでの使用を記載している。このパラダイムは、妊娠や出産後の日1月12日の間、動物を公開します。

Exposure to alcohol during development can result in a constellation of morphological and behavioral abnormalities that are collectively known as Fetal ...

このビデオでは、アルコール蒸気チャンバーの構築と組み立ての方法を示します。また、人間の発達の3つの学期すべてに相当する時期にmaasを露出させるアルコール吸入パラダイムについても説明します。チャンバーは、希望の血中アルコール濃度や曝露パラダイムに合わせて高度にカスタマイズできます。当社のチャンバー設計は、マウスが食物と水に脂質を摂取できる標準サイズのマウスケージを最大6つ収容できます。このパラダイムは、ロゾールを使用せずに妊娠中のマウスと子犬の両方で比較的高い血中アルコール濃度を生成します。ニューメキシコ大学のフェルナンド・バレンズエラの研究室から話を聞きます。このビデオでは、ポリカーボネートエタノール蒸気チャンバーの組み立てを実演し、胎児のアルコール曝露の3学期すべてのマウスモデルでそれらを使用する方法について説明します。基本的な大工仕事のスキルを持つ人なら誰でもチャンバーを建設でき、個々のニーズに合わせて寸法を変更することができます。チャンバーは、曝露中ずっと動物施設に収容でき、動物の輸送と取り扱いに関連するストレスを最小限に抑えます。発生段階の違いにより、妊娠中のげっ歯類へのエタノール投与は、妊娠初期および第2学期のヒト曝露をモデル化するために使用されてきましたが、新生児へのエタノール投与は、妊娠後期の曝露をモデル化するために使用されています。これらのチャンバーは、複数のマウスケージを同時に収容し、妊娠中の母親や母親と一緒に飼育されている新生児を露出させるように設計されています。このアルコール曝露パラダイムを使用する利点のいくつかには、発達の3つの学期すべてを模倣する能力、妊娠中の母犬や子犬へのストレスの軽減、エタノール曝露のレベルに対する制御の柔軟性が含まれます。厚さ1/4インチの24×48インチの5枚の透明なポリカーボネートシートに、上部、下部、前面、背面、側面、およびドアの所定の寸法を測定し、マークします。これらの寸法は、幅32インチ、深さ22インチ、高さ14インチの1つのチャンバーを構築します。このサイズのチャンバーは、高さ11.5インチ×7インチ半×5インチ半の6つの標準マウスケージに適切に適合します。これは単一のチャンバーしか提供せず、このプロセスを繰り返すと、アルコール曝露用のチャンバーと空気のみの制御曝露用のチャンバーの2つの同一のチャンバーが生成される必要があることを覚えておくことが重要です。ポリカーボネートシートは、80歯の刃を備えた丸鋸、またはプラスチックまたはプレキシガラス固有の刃を備えたジグソーで切断できます。ポリカーボネートシートを測定寸法にカットし、できるだけ注意してまっすぐにカットします。これにより、すべてのピースが切断された後の組み立てプロセス中のギャップが減少します。フロントパネルの中央にある8インチ×16インチの長

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医学

実験デザインは、ここでアポトーシスと胎児の脳内妊娠中神経ペプチドのアプリケーションでのアルコール曝露の影響を勉強に集中を提案した。育種から胎児の脳のコレクションへの詳細な説明が記載されている。アポトーシスを測定するための技術も詳細に説明する。...

C57BL / 6マウスにおける妊娠中のアルコール誘発性アポトーシスに対する神経栄養ペプチドの効果をテストするための実験方法、ADNF-9、

ここで提示されたプロトコルの目標は、出生前の脳の発達中にラットを中程度のレベルのアルコールにさらす手順を説明し、成人期の社会的行動の結果として生じる変化を定量化することです。...

適度な出生前アルコール暴露と成体ラットにおける社会行動の定量化

トレース瞬目反射条件づけ (ECC) を用いて評価したラット海馬依存学習投与早期新生児の脳の発達の中にアルコールの高濃度 (11.9 %v/v)。一般的には、ECC...

胎児アルコール スペクトルの無秩序のモデルラットにおける海馬機能障害を評価するためにトレース瞬目反射条件づけの使用

アルコール使用障害 (AUD) は主要な国民の健康上の問題、この患者集団のニーズを相殺するためにより効果的な治療法の開発が必要です。この目的のためには、次のプロトコルは、鉛抗アルコール化合物の臨床効果を評価するために 2...

アルコール中毒のための Pharmacotherapies の開発のモデルを飲むマウス: 暗く、2 ボトルの選択で飲む

ここに提示されているのは、アルコール使用障害を研究するためのマウスのアルコール依存症の2BC/CIEモデルのプロトコルです。...

アルコール使用障害をモデル化するための 2 本ボトルの選択と組み合わせた慢性間欠性エタノール蒸気曝露

この記事では、わさびによって引き起こされる刺痛感に対するアルコール飲料の嗅ぎ分けの抑制能力を測定するための一連の方法について説明します。...

わさび-アルコール味-匂い相互作用を研究するための動物行動評価と畳み込みニューラルネットワークの統合

このプロトコルは、ラットのアルコール消費をモデル化するための標準的な断続的なアクセスの2ボトル選択家庭用ケージ飲用パラダイムを説明しています。さらに、飲酒行動の微細構造分析を可能にするDIYリック検出システムで標準プロトコルを補強するためのステップバイステップの指示を提供します。...

2本ボトル選択、ホームケージ飲酒、および微細構造解析を使用したげっ歯類のアルコール消費量のモデリング

大麻蒸留物ベイプカートリッジは、高濃度のカンナビノイドを含む抽出物をエアロゾル化するバッテリー駆動のデバイスです。これらの製品には確立された前臨床モデルがないため、その生理学的効果の研究に課題が生じています。このギャップに対処するために、気化した大麻留出物の標準化された前臨床吸入マウスモデルが開発されました。...

気化した大麻留出物を試験するための前臨床吸入モデルの開発

このビデオでは、免疫不全ラットモデルにおいてヒト血管（IMA）を使用して、ステント展開後に内膜肥厚の開発を研究するためのモデルを示しています。...

人間の内胸動脈（IMA）移植およびステント留置術：ステント内再狭窄の開発を研究するための人体モデル

弱視は、しばしば片目の強い抑制を伴って視覚野の発達障害です。我々は、仮想現実ゴーグルやポータブルiPod...

弱視における抑制の測定と治療

学ぶアルコール蒸気チャンバーの構築方法と、マウスを用いた妊娠全3学期の胎児アルコール曝露モデル。このカスタマイズ可能な系統は、血中高アルコール濃度を維持し、発達生物学研究に有用です。

人間開発の3つのすべての学期の等価時にはアルコールにマウスを公開するために使用蒸気チェンバースの建設

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