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DOI: 10.3791/52047-v
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このプロトコルでは、マウスとヒトの胚性幹細胞の両方からの心前駆細胞の誘導が説明されます。このプロトコールの主な戦略は、胚性幹細胞株に改変された蛍光レポーターを使用して、フローサイトメトリーで心前駆細胞を濃縮することです。
この手順の全体的な目標は、胚性幹細胞からヒトまたはマウスの心臓前駆細胞を生成することです。これは、高品質の胚性幹細胞、またはESCまたはマウス胚フィーダー細胞または神話で最初に培養することによって達成されます。第2のステップでは、細胞をゼラチンでコーティングしたペトリ皿に移して、最初の胚体の形成を促進します。
次に、細胞を結合させ、成長因子を培養物に添加して、第2の形態の胚体を誘導します。最終ステップでは、胚体を再び解離させ、得られた細胞を追加の成長因子で処理します。最終的には、心筋細胞と平滑筋細胞の分化のために、心筋細胞をさらに培養することができます。
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