Name: マウス脂肪デポのローカライズ、識別、および切除 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: 学ぶマウス脂肪デポの識別と切除法。内臓を露出させ、組織を除去してデポを特定し、汚染を避けて脂肪組織を摘出します。組織学的分析や遺伝子発現研究に利用でき、最小限の解剖で複数のデポを分離できます。

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注：すべての動物の手順はシンシナティ大学の施設内動物管理使用委員会（IACUC）の承認を得て、および国立衛生研究所から実験動物の管理と使用に関する指針に従って行った（NIH公開番号。85から23、）1996年改訂。 1.マウスを安楽死させると滅菌<ol><li>イソフルランのsupratheraputic投与量を含むドロップボックスにマウスを置き、効果に吸い込むことができます。マウスを安楽死された後、箱から取り出します。 </li><li> Cervically安楽死の第二の手段として脱臼。 </li><li> 70％エタノールで動物を洗浄することにより、マウスの外面を滅菌する。 </li></ol> 2.識別3つの異なる脂肪デポの単離<ol><li>褐色脂肪組織（BAT）単離： <ol><li>表皮と真皮のレーを切断を支援するために、アルコールクレンジングから毛皮が濡れていることを確認してくださいRS。 </li><li>テーブルに対するその背中に仰臥位でマウスを置きます。 </li><li>ちょうど鉗子、リフト付きダイアフラム下の皮膚をつかみ、ハサミで切開。 </li><li>腹膜を露出させ、マウスの周囲に横方向に切断。 </li><li>マウスの上半分をdeglovingことで蝶形のBATデポを明らかにする。片手で下の付属と腹部を押さえ、頭の方に肌を引き上げる。 </li><li>それはテーブルの上に発生しやすい位置するように、マウスの向き。髪で露光デポを汚染しないように注意してください。 </li><li>手術器具を清掃し、手袋の新鮮なペアに変更します。 </li><li>肩甲骨とそれに対応するデポの位置を確認します。慎重に蝶の上の任意の表面的な白色脂肪を削除してから間褐色脂肪の蝶を解剖。密接に褐色脂肪に関連した筋肉を避けるように注意してください。 注：解剖顕微鏡の使用は、Wの除去のために推奨されますハイト脂肪、ならびに肩甲骨から褐色脂肪の分離。 </li><li>脂肪デポを削除し、2ミリリットルのマイクロ遠心チューブに移す。 </li><li> RNA又はタンパク質が抽出される場合、-80℃の液体窒素とストアに浸漬することにより、組織を凍結する。劣化を防ぐために、一度にサンプルをフリーズします。培養の場合は、DMEF-12で組織をカバーし、すべてのサンプルが培養（補足情報）のために収集されてまで、氷上に設定してください。 </li></ol></li><li>皮下脂肪組織（SQ）の単離、白色脂肪組織デポ（WAT）： <ol><li>脂肪デポ間のクロス汚染しないよう手袋の新鮮なペアに置く。 </li><li>マウスの下半分をデglovingにより鼠径部、三角SQデポを明らかにした。片手で上部の付属と胸部を持ち、もう一方の手で足の方に肌をプルダウンする。 </li><li>髪で露光デポを汚染しないように注意しながら仰臥位でマウスを向けます。 </li><li>クリーンsurgicaLの楽器や手袋のフレッシュに変更します。 </li><li>慎重にSQ脂肪の三角形を解剖。すべての血管を切断することによって、脂肪、乳腺や隣国、筋肉試料を汚染し、血液試料を汚染しないように注意してください。 注：境界線が明確に定義されていない場合は、解剖顕微鏡の使用が推奨されます。 </li><li>脂肪デポを削除し、2ミリリットルのマイクロチューブに移す。 </li><li> RNA又はタンパク質が抽出される場合、-80℃の液体窒素とストアに浸漬することにより、組織を凍結する。劣化を防ぐために、一度にサンプルをフリーズします。 </li><li>染色のために、修正するか、OCTに埋め込む。培養の場合は、DMEF-12で組織をカバーし、すべてのサンプルが培養（補足情報）のために収集されてまで、氷上に設定してください。 </li></ol></li><li>生殖腺脂肪内臓脂肪組織（VAT）と白色脂肪組織（WAT）デポの単離： <ol><li>脂肪デポ間のクロス汚染しないよう手袋の新鮮なペアに置く。 </li><li>脊損ssors、直接横隔膜の下に、横方向に腹膜をカット。腹部の臓器を露出させるために直腸半ば冠状にダイアフラムから腹膜をカット。 </li><li>精巣や卵巣の位置を確認し、精巣上体、男性における脂肪または雌の生殖腺脂肪として知られている添付の白色脂肪組織を、特定する。 </li><li>手術器具を清掃し、手袋の新鮮なペアに変更する</li><li>慎重に精巣、精巣上体、およびヴァーサ輸精管から精巣上体の脂肪デポの両方を分析。女性の場合は、慎重に卵巣から両方の生殖腺脂肪パッドを解剖。 </li><li>脂肪デポを削除し、2ミリリットルマイクロチューブに転送。 </li><li> RNA又はタンパク質が抽出される場合、-80℃の液体窒素とストアに浸漬することにより、組織を凍結する。劣化を防ぐために、一度にサンプルをフリーズします。 </li><li>染色のために、修正するか、OCTに埋め込む。培養の場合は、DMEF-12で組織をカバーし、すべてのサンプルが培養（補足情報）のために収集されてまで、氷上に設定してください。 </LI&gt; </ol></li></ol>血管周囲脂肪組織の3分離（PVAt系） <ol><li>ハートの単離： <ol><li>外側へ延長上下の付属と仰臥位でマウスをレイアウト。 </li><li>サージカルテープを使用してセキュアな付属。 </li><li>上記のようにマウスを配置した後、ピンセットで剣状突起上に持ち上げて緊張を作成します。胸腔の下部を露出させ、振動板を水平に切断した。 </li><li>剣状突起上に持ち上げて、テンションを維持しながら、ちょうど胸骨の側に、頭に向かって上方に胸郭を切断。 </li><li>鎖骨のすぐ下胸郭をピックアップし、両方向に腋窩に向かって鎖骨の劣る長さに沿って切り出した。胸腔とその内容（心臓、肺、 など ） が 、今はっきりと見えるはずです。 </li><li>無菌GAを使用して余分な血液や体液の胸腔を清掃してください流体を吸収するuze。収集臓器や血管が（補足情報）おびただしいしてください場合。 </li><li>領域は、流体のクリアされると、心のよりよい露出を可能にし、肺を除去して気管支および添付血管をカット。 </li></ol></li><li>ローカライズと切除大動脈の血管周囲脂肪組織（PVAt系）： <ol><li>肝臓、胃、脾臓、膵臓、腸、およびコロン：より良い大動脈の劣る部分を識別するように、以下の臓器を削除します。 </li><li>まず胃と食道の同定で始まる。身体から胃を解放するために胃食道接合部で食道をカット。 </li><li>次に、腸と周囲の腸間膜を識別します。それは大動脈の腎部分に非常に密接に位置するように腸間膜を通じて表面的にカットし、その後「腸を実行します。」 </li><li>できるだけ直腸の近くに無料のコロンをカット。このように、マウスから胃、小腸および結腸を解放。 </li><li>リ取付腸間膜と血管を切断することにより胃、小腸、大腸、膵臓、脾臓を移動します。膵臓、脾臓、胃、小腸および結腸に無料で来る必要があります。 </li><li>肝静脈を切断し、腸間膜を取り付けることによって、肝臓を削除し、すべてのローブを削除します。 </li><li>内臓層と脂肪サラウンド腎臓を切り取る。大動脈の異なるセグメントのための地理的なマーカーとして機能するように、in vivoで大動脈に添付腎臓のままにしておきます。 </li><li>無菌1X PBSでエリアをすすぎ、滅菌ガーゼで吸収して、すべての流体を除去。 </li><li>マイクロはさみとマイクロ鉗子を使用して、背骨にその背側アタッチメントと食道への腹側添付ファイルから大動脈を分離する。 </li><li>腸骨領域での分岐に心臓内の原点から下行大動脈の長さを以下の大動脈を取り外して大動脈を分離します。 </li><li>鎖骨下血管を同定し、単離。これらの血管を分離大動脈基部に首からより良い心臓大動脈ジャンクショ​​ンと根を露出させる。 </li><li>心臓の動きを可能にする、腕頭動脈、左総頚動脈、および左鎖骨下動脈を切断し、胸腺を除去する。 </li><li>解剖顕微鏡の助けを借りて、大動脈の周囲の血管周囲脂肪組織（PVAt系）層を表示します。 </li><li>マイクロピンセットで大動脈からPVAt系の道を引っ張る優しく、PVAt系を挟んだり、圧迫しないように細心の注意を取る。静かにダイアフラムが置かれている場所だけに優れた胸部から始まるマイクロハサミで大動脈にPVAt系の添付ファイルをカット。 注：解剖顕微鏡をお勧めします。 </li><li>大動脈血管の腸骨分岐の直前に優れ位置して大動脈大動脈地域、で仕上げ、このプロセスを大動脈の全長を繰り返します。 </li><li>大動脈弓PVAt系が望まれる場合、より低いCからのPVAt系を除去するために、同じ方法を使用アーチのurvature。 </li><li> 2ミリリットルのマイクロ遠心チューブ（S）にPVAt系サンプルを置きます。 </li><li> RNA又はタンパク質が抽出される場合、-80℃の液体窒素とストアに浸漬することにより、組織を凍結する。劣化を防ぐために、一度にサンプルをフリーズします。培養の場合は、DMEF-12で組織をカバーし、すべてのサンプルが培養（補足情報）のために収集されてまで、氷上に設定してください。 注：追加の脂肪デポ興味を持っている場合包括的な脂肪デポ分析する際に考慮すべきは、次のとおりです。後腹膜、腸間膜、大網、心膜と膝窩動脈を。 </li></ol></li></ol>

<ol><li>Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+obesity+in+the+United+States%2C+2009-2010%5BTitle%5D)+AND+%22NCHS+Data+Brief%22%5BJournal%5D)">Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010.</a> NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).</li>
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</ol>

著者らは、競合する金銭的利益やその他の利益相反がないことを宣言します。

肥満は罹患率の大ホストと脂肪が完全に理解されていないが果たす役割の完全な理解につながることができます。脂肪の分野において、したがって継続的な研究が必要である。動物モデルは、特にマウスモデルは、病気や潜在的な製薬治療のテストの進行に初期の研究に最適です。これらのモデルを使用して、脂肪デポの正確な分離および切除は、脂肪の影響を受ける疾患の病理の研究において非常に重要かつ必要なツールです。 脂肪デポに関する現在の文献では、脂肪貯蔵物、ならびにそれらの解剖学的位置の間の代謝挙動および変化に関する文献のかなりの量が存在する。しかし、具体的には、ローカライズ特定し、これらのデポを単離する方法についての詳細な方法を提供するいくつか存在する。脂肪の現在の単離方法の見直しに基づき、プロトコルtの小さなサブセットがあります帽子は、一度に1つまたは2つのデポを単離する方法の方法論を提供する。しかし、正確な解剖、汚染の最小量の複数のデポの単離を可能にする技術と同様に、アドレスが収集されたサンプルを研究する様々な方法がこのプロトコル13-14に特徴的である。 <p class=...

脂肪は、20世紀の最後の数十年の間、肥満の劇的な増加に起因するメディアのスポットライトで注目すべきな外観を作った。肥満は現在、成人の三分の一以上と米国の小児および青年の17％（米国）1に影響を与えます。すべての民族グループにまたがる、肥満のまん延を取り巻く統計調査は、メキシコ系アメリカ人（40.4％）、すべてのヒスパニック（39.1％）、及び非と比較して非ヒスパニック系黒人は肥満（49.5％）の最高年齢調整率を持っていることが示されているヒスパニック系白人（34.3％）2。肥満の経済効果も医療制度への高まる懸念である。 2012年では、2005年の米国における肥満のためのケアの年間医療費は1902億ドル、全体の医療費の予算の約21％と推定された。悲しいことに、小児肥満は単独で、直接医療費140億ドルの原因であると推定された。統計的に、それは、平均医療費が決定された肥満を持つ個人は、この罹患率3-5ないものより年間2741ドル高かった。 2型糖尿病、脂質異常症、心血管疾患、癌、筋骨格障害および慢性炎症：肥満のような、様々な条件のための主要な危険因子である。肥満は深くメタボリックシンドロームと他の慢性疾患6-8の病因に関連付けられています。肥満や他の併存疾患との間のこのような抜本的なと負の接続では、科学的研究は、より良い現在の流行と脂肪で演奏多様で重要な役割を理解するために注意を集中している。 歴史的に、脂肪組織は取るに足らないと考えられていたとシンプルな充填組織としてのみ観察した。代謝、ホルモン調節、炎症、保護絶縁9：現在、脂肪は、身体の機能の多くの重要な役割を果たしていることが示されている。脂肪組織は、主に構成されている脂肪細胞だけでなく、周皮細胞、内皮細胞、単球、マクロファージおよび多能性幹細胞8が含まれています。脂肪組織は、個別のデポで体全体に分布している。主なデポは皮下、筋肉内、皮下発見し、直感的に10することができます。脂肪デポは、肥満症および関連障害8にデポ特定の感受性を示したデポ特定の代謝プロファイルを有することが示されている。 伝統的に、脂肪組織は、2つの主要なタイプに分類された：白色脂肪組織（WAT）および褐色脂肪組織（BAT）。最近の文献が示すものの、第3グループのプレゼンスは、ブライトまたはベージュ脂肪11洗礼 。脂肪組織は、異なる色、形態、代謝機能、生化学的特徴および表現10の遺伝的パターンを有することが示されている。 WATでの脂肪細胞は、単一の大きな脂肪滴とミトコンドリアの可変量を持っている。 WAT支配的身体の皮下および内臓の地域に含まれています。主に、エネルギー貯蔵および器官保護の部位としてWAT機能する。 BATでの脂肪細胞は多房形態と豊富なミトコンドリアを持っている。 BATは、胸部の首および大血管、ならびに肩甲骨12に主に位置している。熱発生7を制御するエネルギー消費する行動のBATは主に機能している。ブライトまたはベージュ脂肪は、BATと類似の形態および表現を共有することが示されているが、白色脂肪細胞11から発信されることが見出されている。 この原稿で説明した外科的方法は、以下のような要因に、異なる効果を分析する能力と研究者を提供します。環境、医薬品、遺伝学は、脂肪に持っている。だけでなく、有益なまたは有害な役割の脂肪は、病気と全体的な健康状態で再生されます。また、への脂肪組織の異なる種類を同定および単離するための方法を提供より良いデポ間の生化学的関係との違いの理解を可能にします。これは、場所、機能、および身体内の脂肪のタイプ間の関係を決定するのを助けることができる。この記載の方法は、総視覚化、遺伝子発現解析、タンパク質発現解析、組織学的検査、およびin vitro試験のための主要な細胞株を単離するための手段を提供することによって、これを達成する。現在、別の脂肪デポ、並びにそれらの解剖学的位置の代謝挙動への洞察を提供する多くの記事があります。しかし具体的には、ローカライズ特定し、これらのデポを分離する方法についての詳細な方法を提供しない。この外科的方法は、1つまたは2つのデポ13~14の単離物のために設計され、他の方法と比較して切開および汚染の最小量を有する複数のデポの単離を可能にする正確な技術を提供する。 このプロトコルの目的は、提供することである複数の解剖学的位置から貯蔵脂肪の異なるタイプの同定および単離のための正確な方法。

<table><tbody><tr><td>イソフルラン</td><td>Med-Vet International</td> <td>#RXISO-250</td><td></td></tr><tr><td>70%エタノール</td><td>フィッシャー</td><td>07-678-001</td><td></td></tr><tr><td>DMEF-12</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>D-6421</td><td>ティッシュを装着する前に水浴で温めます。</td></tr><tr><td>2 mlマイクロ遠心チューブMidsci</td><td></td><td>MCT-200-C-S</td><td></td></tr><tr><td>リン酸緩衝生理食塩水</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td></td></tr></tbody></table>

マウス脂肪デポのローカライズ、識別、および切除

Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

肥満は過去数十年で劇的に増加し、米国の成人人口の3分の1以上が罹患しています。2005年の肥満の経済効果は、直接的な医療費だけで1,902億ドルという驚異的な額に達しました。肥満は、さまざまな病気の主要な危険因子です。歴史的に、脂肪とその体内での主要かつ本質的な機能についてはほとんど知られていませんでした。茶色と白の脂肪は脂肪の2つの主要なタイプですが、現在の文献では、ブライトまたはベージュの脂肪と呼ばれる新しいタイプの脂肪が特定されています。研究によると、脂肪貯蔵庫には特定の代謝プロファイルがあり、特定の貯蔵庫は肥満やその他の関連疾患の傾向を許容しています。このプロトコルの目標は、研究者に脂肪デポを特定して切除する能力を提供することです 脂肪に対するさまざまな要因の影響の分析を可能にします。また、脂肪が病気や全体的な健康に果たす有益な役割または有害な役割も含みます。脂肪デポーの分離と切除により、研究者は肉眼的な形態学的変化と組織学的変化を調べることができます。単離された脂肪は、転写および翻訳変化を評価するための分子研究や、関心のある標的および作用機序を発見するためのin vitro実験にも使用できます。この技術は、複数のデポをシンプルかつ最小限の汚染で分離できる設計により、他の公開された技術よりも優れています。

識別、および鼠径部皮下脂肪、肩甲骨間褐色脂肪、内臓副睾丸脂肪（ 図1）と同様に、大動脈弓の血管周囲脂肪、胸部大動脈脂肪、副腎大動脈脂肪と大動脈大動脈脂肪のローカライズ（ 図2）を使用して成功裏に達成された記載され手術方法。 BAT及びWAT試料間の組織学的検査および分化を陽性に染色（ 図3）をヘマトキシリンおよびエオシン（H＆E）を用いて評価した。細胞死誘導DFFA様エフェクター（CIDEA）、および他の脂肪特異的マーカーは、上記のすべての単離および切除さデポを測定したアディポネクチン（ADIPOQ）、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（PPAR-γ）のRNAレベルの分析（データ示さず）。 皮下脂肪細胞および血管周囲脂肪細胞の初代細胞株を培養し、前脂肪細胞から分化したマイクロアレイ分析のために正常脂肪細胞への。脂肪細胞に転換培養前脂肪細胞をオイルレッドO染色（ 図4）で確認した。成功した単離、培養および脂肪細胞の分化をin vitro<...

原因肥満や他の併存疾患の間で抜本的なと負の接続に、ロールの脂肪の研究は、病気で再生し、全体的な健康が保証されています。私たちは、 その場で、そしてインビトロ方法で使用して脂肪の研究を可能に脂肪デポの単離および切除するためのプロトコルを提示する。

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 ...

この手順の全体的な目標は、脂肪に対する、および脂肪によるさまざまな因子効果の分析のための脂肪沈着の同定と切除を実証することです。これは、最初に成体マウスの内臓と脂肪貯蔵庫を露出させることによって達成されます。2番目のステップでは、臓器と余分な組織を取り除き、デポをより露出させ、対応する場所にあるデポを特定できるようにします。最後のステップでは、汚染を避けるために特別な注意を払って脂肪組織を抽出します。最終的に、これらの沈着物の単離と切除は、組織学的分析、タンパク質発現、酵素活性、遺伝子発現分析、およびin vitro研究のための組織を提供します。この特定のプロトコルが既存の方法論と比較した場合の主な利点は、最小限の解剖と最小限の汚染で複数のデポ分離を可能にすることです。したがって、この手順は、肥満の分野に関する質問に答えるのに役立ちます。たとえば、脂肪組織の人間の病気に対する有害な影響や有益な影響です。褐色脂肪組織を単離するには、まず、エタノールを洗浄し、安楽死させた成体マウスを仰臥位に置き、背をテーブルに背負わせます。次に、鉗子を使用して横隔膜のすぐ下の皮膚を持ち上げ、はさみで皮膚を切開します。マウスの周囲を横方向に切り取り、腹膜を露出させます。次に、片手で下部の付属肢と腹部を持ち、もう一方の手で皮膚を頭に向かって引き上げてマウスの上半分を手袋をはめ、蝶の形をした茶色の脂肪貯蔵庫またはコウモリを明らかにします。次に、スケープと対応するコウモリの貯蔵庫を見つけます。次に、解剖顕微鏡を使用して、蝶の上にある表面の白い脂肪を慎重に取り除き、関連する筋肉を避けながら肩甲骨間の褐色脂肪を解剖します。皮下脂肪組織または皮下脂肪組織を分離するには、片手で上肢と胸部を持ち、もう一方の手で皮膚を足に向かって引き下げてマウスの下半分を手袋をはめ、三角形の鼠径部サブク沈着物を明らかにします。次に、マウスを仰臥位に戻し、サブq脂肪の三角形を慎重に解剖して、腹腔から性腺脂肪を分離します。はさみを使用して、横隔膜の真下に腹膜を横に切ります。次に、横隔膜から直腸まで腹膜を冠状に切断して腹部の臓器を露出させ、精巣epiとvasa deiaの両方の表皮脂肪貯蔵庫を慎重に解剖します。血管周囲脂肪組織を分離するには、動物を仰臥位に維持し、上部と下部の付属肢を外側に伸ばします。.次に、鉗子で剣状突起を持ち上げて、体の上部全体に張力をかけ、横隔膜を水平に切り込み、胸腔の下部を露出させます。胸骨のすぐ横にある頭に向かって胸郭を上方に切り込み、鎖骨のすぐ下にある胸郭を拾います。鎖骨の下方の長さに沿って腋窩に向かって両方向に切断します。胸腔とその内容物がはっきりと見えるようになりました。その領域から液体が取り除かれたら、気管支と付着血管を切断して肺を切除し、心臓を露出させます。胃と食道を特定した後、胃食

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このビデオでは、新生マウスから皮下白色脂肪組織と肩甲間褐色脂肪組織を分離する外科的処置を実演します。...

マウスの子犬からの白と茶色の脂肪デポコレクション:マウスの子犬から白い脂肪組織と茶色の脂肪組織を収穫するための外科的処置

脂肪組織(AT)は全身の恒常性に影響を与える可能性があるため、脂肪細胞の分化と機能の分子メカニズムを理解することは重要です。私たちは、誘導された脂肪細胞のアポトーシスのモデルとして、脂肪細胞の恒常性、分化、および低酸素曝露を分析することにより、これらのプロセスに関する新しい洞察を得るためのプロトコルを提供します。...

分化およびアポトーシス恒常性を通じアダルト生物における脂肪細胞の数の調節のメカニズム

脂肪細胞は離散的な拠点に存在し、独自のマイクロ環境の中で多様な役割を果たしています。脂肪細胞の性格と機能の地域的な違いが明らかになるにつれて、デポの標準化された識別と隔離は、フィールドの進歩のために重要です。本明細書では、様々なマウス脂肪デポの切除に関する詳細なプロトコルを提示する。...

多様なマウス脂肪デポの同定と解剖

このプロトコルの目的は、蛍光標識されたリポソームを合成し、フローサイトメトリーを使用して細胞レベルでリポソームのin...

蛍光色素標識リポソームのin vivo組織特異的細胞取り込みの調製、投与、および評価

このプロトコルは、蛍光活性化細胞選別または免疫磁気ビーズ分離により、マウス腹腔内白色脂肪組織(WAT)デポから脂肪形成および線維炎症性間質細胞亜集団を単離するための技術的アプローチを説明しています。...

マウス腹腔内脂肪貯蔵所からの脂肪形成性および線維炎症性間質細胞亜集団の単離

この研究では、遺伝子およびタンパク質発現解析のためにマウス褐色脂肪細胞を単離する新しい方法について説明します。...

遺伝子およびタンパク質発現解析のためのマウス肩甲間褐色脂肪組織からの褐色脂肪細胞の単離(英語)

このプロトコルは、マウス脂肪デポーの解剖および内皮細胞集団を遊離させてから同定するためのそれぞれの動脈の単離および消化のための方法を詳述する。ダウンストリームアプリケーションで使用される新たに単離された細胞は、血管細胞生物学と血管機能障害のメカニズムの理解を促進します。...

下流アプリケーションのための異なる脂肪デポからの血管内皮細胞の分離と同定(英語)

このプロトコルは、マウス脂肪組織から間質血管画分(SVF)を半自動分離して、脂肪前駆細胞を取得し、 in...

組織解離剤を用いたマウス白色脂肪組織からの間質血管画分の半自動単離(英語)

ここでは、マウスの鎖骨上褐色脂肪組織の組織学的および遺伝子発現解析を解剖および実行するための実用的な手順を提供します。...

マウス鎖骨上褐色脂肪組織の解剖、組織学的処理、遺伝子発現解析

成熟した脂肪細胞のサイズと脆弱性は、その研究と分離に利用できる技術とツールを制限しています。ここでは、成熟したマウス脂肪細胞の単離のためのプロトコルが記載されており、これは異なる脂肪貯蔵庫およびマウスの食事療法に容易に適応することができる。...

赤身および肥満マウスからの初代マウス脂肪細胞の単離と培養

学ぶマウス脂肪デポの識別と切除法。内臓を露出させ、組織を除去してデポを特定し、汚染を避けて脂肪組織を摘出します。組織学的分析や遺伝子発現研究に利用でき、最小限の解剖で複数のデポを分離できます。

マウス脂肪デポのローカライズ、識別、および切除

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