Name: リモート四肢虚血プレコンディショニング：げっ歯類における神経保護技術 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-02T10:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 52 s
Description: 学ぶリモート虚血プレコンディショニング法で、ラット後肢に短時間の虚血・再灌流を与え、網膜の光損傷から神経保護効果を検証する技術。内因性保護機構の研究に応用可能。

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著者は、げっ歯類の監視、取り扱い、実験におけるSharon Shana夫人(シドニー大学)の支援に感謝しています。著者は、この原稿の準備に協力してくれたJonathan Stone教授とDan Johnstone博士に感謝します。博士課程の資金援助は、シドニー大学とオーストラリア・センター・フォー・エクセレンス・イン・ビジョンによって提供されています。

倫理文は：プロトコルは、5657＃AECシドニー大学の動物ケアのガイドラインに従います。麻酔は、動物倫理委員会（シドニー大学、AEC＃5657）によって承認されました。 1.機器の準備<ol><li>リアルタイム皮膚温度トラッキングを使用してください。コンピュータ、およびデータ集録ハードウェアのスイッチをオンにします。 </li><li>オープン温度記録ソフトウェアと30〜35の間°Cと100ミリ秒毎にサンプリング周波数に温度設定を調整します。 </li><li>オプション：コア温度を確保するために挿入し、直腸温度計は37.5℃で安定しています。 </li></ol>手動血圧計の2キャリブレーション<ol><li> 250〜550グラムのラット用サイズ2カフをsphygmomanometer.Useする新生児腕カフを接続します。アダプタは、血圧計のカフチューブを接続する必要があるかもしれません。 </li><li>どちらかが大気開放弁を緩めるか、適応からカフチューブを切断することにより、カフを収縮または。は圧力いないことを確認し、チューブ内に残り、圧力計の針は楕円形/矩形の内側にゼロにかかっています。 </li><li>チューブ、圧力計とカフの間の圧力を確認してください。それは圧力計で100 mmHgのを読み取るまでインフレ電球の穏やかなポンプにカフを膨張させます。圧力が一定のままで確認してください。ゆっくりと空気放出値を開くことによって、カフを収縮させます。 </li></ol> 3.動物の準備注：光損傷を受けることがある動物は、リモート虚血前の晩暗い適応を必要とします。光損傷を受けた動物は、暗い飼育（：暗サイクル（5ルクス）12時間の明）が必要<ol><li>覚醒または麻酔げっ歯類のいずれかでリモート虚血を実行します。動物は健康な筋肉の緊張を持っていることを確認してください。十分な筋肉の存在があることを確認するために、上部の後肢をつまんで、これを確認してください。光損傷に対するRIPによって誘発される保護は、生後6ヶ月まで坐ったラットでテストされています。 </li><li> Rのための麻酔の準備IP <ol><li> 60ミリグラム/ kgのケタミンおよび5mg / kgのキシラジンの腹腔内注射でラットを注入します。足を拡張し、足の下の皮膚をつまんで麻酔の深さを確認してください。それが深く麻酔された場合、動物には反射を持っていません。麻酔下ながら角膜の乾燥を避けるために、人工涙液を適用します。 </li><li>熱パッドまたは37.5℃の一定の体温を維持するために、循環水加熱器チューブのいずれかに配置ラット。下肢「フットパッドを上に向けて腹臥位にラットを配置します。どちらの右または左肢は、リモート虚血を受け得ます。 </li></ol></li><li> RIPのための目を覚まし準備 注：動物実験AWAKE 2人が必要です。一人は動物を拘束し、二人目は、手動血圧計を運営しています。実験者は、拘束がハンドラの負傷のリスクを高めるような手順を実行するために自信を持っている必要があります。リモート虚血を受けたラットは、Tを調整されなければなりませんOマニュアル拘束。直感ガイドラインに応じて手動拘束は数週間にわたって5分の最大30秒から進行する必要があります。マニュアル拘束に順応しない臆病な動物が目を覚まし、実験から除外されるべきです。最後に、手動の拘束を正確にRIPの調査結果を解釈するために使用されなければならない動物へのストレス（および潜在的に研究に交絡を紹介）および偽コホート（炎症のないカフの配置）を引き起こす可能性があります。 <ol><li> 15cmのX 30〜50センチメートル片にタオルをカットし、後肢の上部に頭をカバーする、ラットの脊椎に垂直な短辺を配置します。 </li><li>ラットの胴体の下の短い辺をしっかりタックとタオルの残りの長辺でラットをラップし始めます。仰臥位で腕の下に包まれた動物を保護します。ラットを左腕の下に保持されている場合は、タオルから、ラットの右肢を解放します。 </li></ol></li></ol> 4.アプリケーションO皮膚温度プローブF <ol><li>虚血を受け、フットパッドの肌のプローブを配置することであるラットの足を拡張します。温度プローブと皮膚との接触を最大化するために、皮膚のプローブを配置します。しっかりとフットパッドにプローブを押して、紙テープでプローブを取り付けます。 </li><li>温度記録ソフトウェアで温度を追跡することによって、皮膚のプローブの配置を確認してください。皮膚温度は30-34℃の間であり、安定していることを確認してください。 1-2分間皮膚温度を追跡します。温度が不安定になったり、30℃以下であれば、皮膚のプローブを調整します。 </li></ol> 5.リモート虚血<ol><li>カフを収縮し、空気圧バルブが閉じていることを確認します。足を伸ばして、ゆるく上側後肢にカフを取り囲みます。位置に緩めたカフを維持するために、脚と下位桁を拡張するために人差し指と親指を使用してください。 </li><li> 160 mmHgのに麻酔動物のカフ圧を上げ、目を覚​​まし動物increで180 mmHgでのカフ圧ASE。 注：ラットの麻酔血圧が120〜140 mmHgでの範囲であり、ときに意識し160 mmHgのに上昇します。適切な圧力に達すると、タイマフット温度記録を開始します。 注：足の温度が一定の圧力の5分後に2°Cでドロップする必要があります。 </li><li>虚血を通して、動物の「ひざ」は、上記カフの位置を維持します。カフ圧は、数分後に落下し始める、またはラットの手足が動いている場合。 </li><li>繰り返しポンプの所望のカフ圧の繰り返しショートバーストを維持するために、短いバーストのインフレ電球ポンプ</li><li>リモート虚血は5分間と15のために連続的に送達することができます。虚血再灌流プロトコルが介在する5分間の再灌流との5分間の虚血の2期間を含みます。 </li><li>空気圧バルブを緩めて、カフ圧を収縮。虚血プロの過程で温度変化を確認してくださいトコール。カフをリリース。 </li><li>傷害実験を続行します。麻酔の影響下に動物を加熱パッド上に配置する必要があります。歩行まで、動物を監視し続けます。動物は歩行まで、筐体に戻すことはできません。 </li></ol> 6.ライト傷害 - 網膜変性モデル<ol><li>暗い一晩（12-15時間）、動物を適応させます。すぐにリモート虚血コンディショニングまたは偽リモート虚血（動物拘束）は、次の食料と水でパースペックスハウジングに動物を配置します。 </li><li> 24時間午前9時パースペックスハウジングの上方に位置する蛍光灯（千ルクス）のスイッチをオンにします。露光に続いて、7日間の環状照明を暗くするために動物を返します。 </li></ol> 7.ポストリモート虚血手順<ol><li>電図（ERG）とビジョンの評価： 注：ERGセットアップとフラッシュプロトコルはBrandliストーン26に従いました。 <ol><li>暗い一晩（12-15時間）、動物を適応させます。下（それぞれ、60ミリグラム/ kgおよび5mg / kg）ケタミンとキシラジンの腹腔内注射によって動物を麻酔赤色照明を暗く。散瞳（硫酸アトロピン1.0％）、角膜麻酔（proxymetacaine 0.5％）。 </li><li>眼は角膜にすぐに低下し、角膜の水和（カルボマーポリマー）を適用します。角膜の水和を維持するために20分間隔でアイゲルを適用します。 </li><li>安定したERG記録を支援するために、眼球の周りにゆるく結ぶ糸を描画します。直腸プローブを用いて温度を監視し、37から37.5℃の動物の体温を維持します。 </li><li>全体野積分球内部のヘッドの位置を調整します。 注：全体野は、LEDからの目に均一な聖霊降臨祭の点滅を提供し、完全にプログラム可能な光刺激です。 </li><li>軽く角膜や口に挿入された直径2mmの銀/塩化銀ペレット電極に触れるカスタムメイド4ミリメートルのプラチナの正極を用いて、網膜電位を記録します。ステンレス製針の両方の電極を参照臀部に皮下に挿入。 </li><li> 2 kHzの取得速度と0.3-1,000ヘルツ（-3 dB）とのバンドパス設定で記録信号、（ADインスツルメンツ）。安定したERG記録が録音を開始する前に、被験者に10分の暗順応に動物を確立した後。 </li><li>以前Brandliストーン26で説明したように、フラッシュのプロトコルに従ってください。 <ol><li>フラッシュの持続時間をプログラム（我々が点滅し、持続時間が1〜2ミリ秒を使用）、および-4.4ログスコットcd.sm -2〜2.0にその強度を設定します。網膜機能を測定するために明るいフラッシュ（2.0ログスコットcd.sm -2、1ミリ秒）を使用します。本研究では、制御、光傷害およびRIPの光損傷との比較です。 </li></ol></li></ol></li></ol> 8. TUNELアッセイ<ol><li>フェノバルビタールの過剰投与（100mg / kg）の腹腔内注射によって動物を安楽死させます。目を摘出し、4％パラホルムアルデヒド中で固定します。 </li><li> cyroprotecting前にPBS中で目を洗ってください一晩スクロース30％（w / v）の中で目。 OCT化合物に目を埋め込み、クリオスタットを用いて20μmの矢状切片に切断。 </li><li> Maslim らのプロトコルに従ってDAPI染色で網膜切片のTUNELアッセイを実行します。27 </li><li>網膜のTUNELのカウントのために蛍光顕微鏡を使用してください。 TUNEL細胞は、外顆粒層（ONL）から記録しました。光受容体核を含んで網膜の最外層。本研究では、TUNEL数は、各処置群について5目で、それぞれの目のために三連で行いました。 </li><li>制御、光損傷および光傷害+ RIPラット群の平均を比較統計に一方向ANOVAを使用してください。 </li></ol>

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著者は開示するものは何もありません。

げっ歯類の後肢虚血が正常網膜の光受容体に神経保護を提供する手動血圧計カフで誘導しました。光損傷9,28からの光受容体の虚血性コンディショニング誘導される保護と一致して発見。 基本的に、リモート虚血は、組織への簡単な酸素欠乏を引き起こします。したがって、遠隔虚血プレコンディショニングは、虚血コンディショニングまたは代わりと呼ばれる虚血耐性、低酸素プレコンディショニング、そしてある程度、嫌気性運動と多くの類似点があります。細胞は、どちらかが直接神経保護を提供するか、またはその後の代謝ストレス13の寛容になるために細胞に作用するタンパク質、ヌクレオシドおよび転写因子の多種多様を放出することによって虚血性チャレンジに応答します。 文献では、リモート虚血プロトコルは、持続時間と周波数の範囲が含まれています。 私たちの研究室では、5、10のテストを行いました、と正常な網膜機能26で2×5分間の虚血プロトコル。これらのプロトコルの2×5分間...

ほとんどの生存率は、おそらくすべて、代謝ストレスに直面した組織は、亜致死虚血1,2の周期で前コンディショニングによって改善することができます。実用的な面で虚血プレコンディショニング（IP）は、その後の虚血性発作のような組織の経験より深刻なストレッサー、前に、亜致死虚血に対する組織の暴露です。動物モデルでは、IPは、脳、網膜、心臓や肺3-6に印象的な保護を提供します。それに対応して、脳卒中患者における観察は、以前の一過性脳虚血発作、より良い臨床転帰7,8との間のリンクを示しました。 IPは、非虚血性傷害9から網膜の光受容体を保護します。 多様な組織および傷害におけるIPの有効性は、それが全ての組織に存在する細胞生存の生来の機構を活性化していることを示唆しています。心筋の虚血プレコンディショニングはアップレギュレーションを介して保護効果を有することが示唆されていますアデノシンの放出を介して、またはミトコンドリアATPカリウムチャネル10,11の開口部を介して多くの代謝経路を調節することが知られている低酸素誘導因子（HIF）、の。アデノシン放出およびATPカリウムチャネルは、脳虚血に関与しているですが、これまでの虚血性コンディショニングの神経保護機構の調査は、抗興奮毒性への変更、抗アポトーシスおよび抗炎症経路12,13に焦点が当てられてきました。全体的に、神経細胞を保護するための虚血性コンディショニングの分子過程の理解は限られています。 リモート虚血プレコンディショニングの試みは、重要度の低い組織における虚血を生成することにより、離れた非常に重要な器官（心臓、脳、肺）を調整します。後肢を用いて遠隔虚血プレコンディショニング（RIP）は、脳卒中14-17のげっ歯類モデルにおいて神経保護的であることが実証されています。我々が記載された方法は、簡単かつ信頼性のある非侵襲PROTを提供しますRIPを誘導するためのocol。 RIPプロトコルの大部分は、上部の後肢に位置大腿動脈の識別を容易にし、手術用クランプや止血帯のアプリケーションのためにアクセスすることができたためと思われる、後肢を伴います。脳と皮膚保護の研究のための侵襲性四肢虚血性の研究では、虚血は鼠径靭帯から大腿動脈を分離し、大腿動脈2,15,18をクランプすることにより誘導されます。 四肢cuffingまたは大腿動脈クランプのいずれかに起因する虚血は、パルスの損失、酸素の減少と皮膚温度の低下などの四肢での変化により確認されています。リモート虚血は、レーザードップラーまたは超音波ドップラー17-19を用いて、パルスの消失によって確認することができます。皮膚温度は関係が20,21非線形であるが、ドップラーの代替として使用することができます。正確な温度記録は、研究所や缶では一般的です簡単にリモート虚血性の研究に組み込むこと。 手術をクランプ大腿する代わりに、止血帯を使用して、虚血の誘導です。止血帯アプリケーションは、血管クランプを用いて達成されるものに匹敵する虚血を作り出します。 Kutchner ら 。非侵襲的な止血にクランプ侵襲大腿動脈を比較し、両方の方法が四肢への血流を停止し、皮膚フラップ虚血18の形成外科モデルにおける皮膚損傷を減少が見出さ。脚または腕のいずれかをCuffingと収縮期血圧上にカフ圧を上昇させることは、ブタおよびヒト17,19,22における虚血性損傷に対する保護であることが見出されています。 別の止血帯は、虚血性血圧カフ又は弾性バンド17,22,23の使用を含む、リモート誘導に近づきます。しかし、虚血を誘導する弾性バンドを使用することは、潜在的に圧力の無秩序な量を生じさせる、危険な方法であります500 mmHgの上の圧力上昇と手足は、ヒト24に記録されています。また、ゴムバンドを使用して、四肢虚血は、エバンスブルー色素、筋線維の透過性25 の in vivoマーカーによって評価されるように、バンド23の除去後のラットの筋肉の損傷につながります。対照的に、止血帯に制御された圧力の送達は、血圧計17,19,22,26に接続された血圧カフを用いて達成することができます。 本研究では、光受容体変性の光損傷モデルは、リモート虚血プレコンディショニングの神経保護効果を実証しました。リモート虚血は、光損傷の直前に誘導し、網膜の機能試験によって確認されるように、その後の光受容体の変性を防止することができました。付属のビデオでは、非侵襲的なリモート虚血のアプリケーションのデモンストレーションを行います。

<table><tbody><tr><td>ゴールドシリーズ DuraShockハンドアネロイド血圧計</td><td>ウェルチ・アリン</td><td>DS56</td><td>手動血圧計</td></tr><tr><td>新生児 [サイズ2] チューブ1本、10パック</td><td>ウェルチ・アリン</td><td>5082-102-1</td><td>四肢血圧カフ</td></tr><tr><td>ルアーロックアダプター</td><td>ウェルチ・アリン</td><td>5082-178</td><td>新生児カフ用アダプター</td></tr><tr><td>サーミスタポッド</td><td>ADインスツルメンツ</td><td>ML 309</td><td>皮膚温帯ユニット</td></tr><tr><td>皮膚温帯プローブ</td><td>ADインスツルメンツ</td><td>MLT 422/A</td><td></td></tr><tr><td>パワーラボ、4チャンネル取得ハードウェア</td><td>ADインスツルメンツ</td><td>PL 35044</td><td></td></tr><tr><td>フレキシブルプローブ付きホメオサーミックブランケットシステム</td><td>ハーバードアパルタス</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>タオル</td><td></td><td></td><td>オプション 覚醒遠隔虚血</td></tr><tr><td>イソフロ - 100% イソフルラン (250ml)</td><td>アボットアニマルヘルス</td><td>05260-05</td><td>オプション:吸入麻酔リモート虚血</td></tr>ケ<tr><td>タミル-ケタミン100 mg / ml(50 ml)</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td>オプション<td>:注射可能な麻酔リモート虚血</td></tr><tr><td>キシリウム-キシラジン100 mg / ml(50 ml)</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td>オプション<td>:注射可能な麻酔リモート虚血</td></tr></tbody></table>

リモート四肢虚血プレコンディショニング：げっ歯類における神経保護技術

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

致死量以下の虚血は、患部組織における内因性のメカニズムのアップレギュレーションを介して以降の、より重度の虚血に対して組織を保護します。亜致死虚血は、遠隔組織における防御機構をアップレギュレートすることが示されています。哺乳動物の後肢虚血の短い期間（5〜10分間）は、脳、肺、心臓および網膜の自己防御応答を誘導します。効果は、リモート虚血プレコンディショニング（RIP）として知られています。それは重要な臓器を保護するための治療に有望な方法であり、心臓や脳の損傷のための臨床試験の下に既にあります。ラットの特に後肢 - - 虚血性このマニュアルでは、手足を作るの制御された、低侵襲性の方法を示しています。ヒト新生児に使用するために開発された血圧カフは、手動血圧計に接続され、後肢の上部の周りに160 mmHgの圧力を適用するために使用されます。皮膚温度を検出するように設計されたプローブはischemiを確認するために使用され皮膚脚動脈の圧力誘起閉塞によって引き起こされる温度、及びカフの解除後の温度上昇の低下を記録することによって、。 RIPのこの方法は、明るい光誘起損傷および変性に対するラットの網膜に保護を与えます。

160 mmHgの上方に上昇した血圧カフは、 図1Bに明らかに見られるように、後肢への血流を停止します。組織酸素化の欠如は、虚血-再灌流プロトコル（ 図2）のために、動物の足の温度を低下させるが得られました。足の温度（33℃）は、コア温度よりも低くかつ確実にカフ圧の上昇（31°C）、カフが収縮したときに上昇（32℃）の間に減少しました。単一千ルクスの光損傷は遠隔虚血プレコンディショニングの有無にかかわらず上昇アルビノラットを暗くするために送達されました。網膜機能を記録し、電（ERG）を用いて評価しました。 ERGは、 図3に示すように、光刺激に網膜の内側及び外側の神経細胞に由来する電気的応答の合計である。ERG波形が光伝達（最小ガーゼ後の約10ミリ秒から生じる初期の負のピークを有していますTフラッシュ）内網膜（光フラッシュ後の最大約80ミリ秒）からA波と大きな正のピークと呼ばb波と呼ばれます。通常の薄暗いから暗順応ERGは、ラットは明るい2.0ログcd.sm -2</...

リモート虚血プレコンディショニング（RIP）が損傷ストレスに対するコンディショニング組織の方法です。我々は、5〜10分間血圧計用カフを膨張させることによって、下肢のリモート虚血の方法を確立しました。 RIPの神経保護機能は、げっ歯類における網膜変性のモデルで実証されています。

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

この手順の全体的な目標は、後肢に虚血を送り込み、その後のストレスに対して遠隔組織を調整することです。たとえば、光損傷に対する網膜。これは、最初に手動のIngleマママメーターを校正することによって達成されます。次に、動物に麻酔をかけ、加熱パッドの上に置きます。次に、動物の後ろ足を伸ばし、カフを所定の位置に置きます。最後に、遠隔虚血は、ポンプでカフを膨らませ、カフを収縮させ、このプロセスを2回目に繰り返すことによって行われます。最終的に、光害の前に適用した場合、遠隔虚血は網膜機能とアポトーシスを受ける光受容体の数の改善を示すために使用されます。この方法は、神経科学分野の重要な質問に答えることができます。例えば、遠隔虚血性プレコンディショニングによる自己防衛の誘導方法によるリアルタイムの皮膚温度追跡を実施するためのものです。温度記録ソフトウェアを開き、温度設定を摂氏30〜35度に調整し、サンプリングの頻度を100ミリ秒ごとに調整します 250〜550グラムのラット用のサイズ2の新生児用アームカフを使用して、必要に応じてアダプターを使用してカフをフォムマノメーターに接続します。次に、エアリリースバルブを緩めるか、アダプターからカフチューブを外して、カフを収縮させます。チューブに圧力が残っていないこと、および圧力計の針が楕円形の長方形の内側でゼロになっていることを確認します。次に、チューブ、圧力計、咳の間の圧力を確認します。膨張電球の穏やかなポンプを使用して、圧力計が100ミリグラムの水銀を読み取るまでカフを膨らませます。圧力が一定のままであることを確認した後、暗くなってからエアリリースバルブをゆっくりと開いてカフを収縮させ、テキストプロトコルに従って動物を適応させます。後肢の上部をつまんで、十分な筋肉が存在することを確認し、筋肉の緊張が良好であることを確認します。テキストプロトコルに従って動物を鎮静した後、脚を伸ばし、足の下側の皮膚をつまんで麻酔の深さを確認します。次に、人工涙液を塗布します。ラットを下肢のフットパッドを上に向けて、加熱パッドまたは循環式給湯器チューブのいずれかに腹臥位に置きます。皮膚温度プローブを適用するには、虚血を起こすラットの脚を伸ばし、皮膚プローブをフットパッドにしっかりと置き、温度プローブと皮膚との接触を最大化するように配置します。次に、紙テープを使用してプローブを貼り付けます。温度記録ソフトウェアで温度を1〜2分間追跡することにより、スキンプローブの配置を確認します。皮膚の温度が摂氏30〜34度で、安定していることを確認してください。それ以外の場合は、プローブを調整して遠隔虚血を発症します。カフを収縮させて、空気圧バルブが閉じていることを確認します。脚を伸ばし、後肢上部の袖口をゆるく包み込みます。人差し指と親指を使って脚を伸ばし、下指を使って緩めた袖口を所定の位置に保ちます。次に、カフの圧力を160ミリメートル水銀柱に上げます。正しい圧力に達したら、タイマーと足の温度の記録を開始します。足の温度は、5分間の一定の圧力の後、摂氏2度低下し、膨張球根を短時間で繰り返しポンプして、目的のカフ圧力を維持し、虚血全体を通じて動物の膝より上のカフの位置を維持する必要があります。遠隔虚血を5分間連続して送達します。次に、遠隔虚血を繰り返す前に、空気圧バルブを5分間再灌流します。手順が完了したら、空気圧バルブを緩めてカフ圧力を収縮させます。虚血プロトコルの過程で温度変化を確認します。次に、カフを外します。動物を加熱パッドに置き、歩行可能になるまで監視を続けます。動物が歩いているときは、飼い物に戻します。最後に軽傷を負い、トンネルアッセイを行います。ここではっきりと見られるように、テキストプロトコルによると、膝の上に配置された血圧カフを水銀160ミリメートル以上に上げると、後肢への血流が停止します。血流の欠如により、足の温度は動物の深部体温よりも低く低下し、カフが収縮した後に上昇し、RIPに必要な条件と一致しました。この図では、正常な薄暗い飼育ラットの暗順適応網膜電図またはERGは、光損傷の1週間後に明るい閃光に対して大きな光受容体と内側の網膜応答を示しました。ERG記録は、光受容体の喪失を反映して、対照と比較して振幅の大幅な減少を示しましたが、虚血の直前に2分×5分の再灌流プロトコルを使用して後肢を虚血で前処理すると、光受容体が光損傷から保護されました。このパネルは、R-I-P-E-R-Gの振幅が軽傷のみよりも大きく、A波がわずかに減少したことを示しています。最後に、膝の下に配置されたカフは、ここで見られるERG振幅の減少に反映されているように、光受容体を光損傷から保護するものではありません。遠隔虚血プレコンディショニングのような方法は、内因性神経保護のメカニズムは何か、遠隔虚血をどのように適用して中枢神経系の損傷や変性から機能を改善することができるかなどの追加の質問に答えるために実行できます。

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JoVE Journal

Medicine

医学

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リモート四肢虚血プレコンディショニング：げっ歯類における神経保護技術

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