Polyacrylamide Gels for Invadopodia and Traction Force Assays on Cancer Cells

Rachel J. Jerrell; Aron Parekh

doi:10.3791/52343

JoVE Journal
Medicine

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Polyacrylamide Gels for Invadopodia and Traction Force Assays on Cancer Cells

癌細胞に対する浸潤突起と牽引力のアッセイのために、ポリアクリルアミドゲル

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08:48 min

January 4, 2015

DOI: 10.3791/52343-v

Rachel J. Jerrell¹, Aron Parekh¹

¹Department of Otolaryngology,Vanderbilt University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

腫瘍微小環境中の機械的剛性が浸潤突起の活性を増加し、収縮性アクトミオシンによって悪性の挙動を駆動する重要な役割を果たしている。アクリルアミドゲル（PAAS）を使用して、浸潤突起と牽引力アッセイは、マトリックスの剛性に応じて、癌細胞の浸潤性および収縮特性を研究するために利用することができる。

この手順の全体的な目標は、がん細胞の侵襲性および収縮性の特性を研究するために、インベーダー、ポディア、および牽引力アッセイの両方で使用できるポリアクリルアミドゲルを作成することです。これは、まずガラスの花皿の世界で14ミリメートルのカバースリップを作動させ、ポリアクリルアミドゲルがガラスに結合していることを確認することによって達成されます。次に、両方のアッセイ用のポリアクリルアミド溶液を調製して、異なる剛性または機械的特性を持つゲルを生成します。

次に、浸潤した足病アッセイを、蛍光標識された細胞外マトリックスの薄層で調製し、分解を検出します。最後に、アッセイにがん細胞を播種して一晩インキュベーションした後、インベーダー、足板の固定と染色、牽引力プレートの生細胞イメージングを行います。最終的に、蛍光顕微鏡は、侵入者、足病、および細胞外マトリックスの劣化を画像化するために使用されます。

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