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2015年5月28日
2015年5月28日
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CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas(CRISPR関連)システムなどのゲノム編集ツールは、ヒト人工多能性幹細胞(hiPSC)の遺伝子ターゲティング効率を大幅に向上させました。この原稿では、CRISPR/Casシステム支援相同組換えを使用して系統特異的なhiPSCレポーターを生成するためのプロトコルについて説明します。
Chapters in this video
0:05
Title
1:54
Design of Targeting Vectors
2:41
Design and Vector Construction of sgRNAs for CRISPR/Cas9 System
5:20
Design and Construction of Cas9n Double Nickase sgRNA
8:06
Evaluation of sgRNAs by T7 Endonuclease1
11:03
In Silico Prediction of Potential Off Target Sites
12:32
Results: The T7E1 Assay is Used to Evaluate sgRNAs Prior to Transfecting hiPSCs
13:56
Conclusion
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