Name: 齧歯類網膜とリモート四肢虚血プレコンディショニングの保護効果に機能を評価するために電図を用いて、 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 34 s
Description: 学ぶ電図を用いた齧歯類網膜機能評価法。暗順応後のLED光刺激でベースラインを記録し、光ストレス下でのA波とB波を測定することで、リモート四肢虚血プレコンディショニングの神経保護効果を定量的に検証する手法です。

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著者らは、げっ歯類の監視、取り扱いや実験で夫人シャロンSpanaの支援を感謝しています。博士課程の資金援助は、ビジョンに優秀シドニー大学とオーストラリア研究センターにより提供されています。

このプロトコルは、シドニー大学の動物ケアのガイドラインに従っています。 1.メイキング電極<ol><li>正極白金線直径1〜2ミリの短い（5 cm）の長さから（角膜に接触することになる1）を構築します。ループ直径が数mmにファッションを。あなたのアンプの入力段に到達するために十分な長さ、従来の鉛にこのループを接続します（ 図4を参照）。 </li><li>銀/塩化銀はまた、大会リードに接続直径1〜2ミリ、ペレット使用して（動物の口の中に移動します）負極を構成する（ 図4参照）。 </li><li> （動物の臀部になります）を参照電極として、清潔な注射針（23 G）を使用し、また、適切な長さのリードに接続された（ 図4参照）。 </li><li>理想的には、（正のU 3つの電極を接続し、機器の製造業者によって提供される3つのリードケーブルを使用94;角膜、負→口、アンプへの臀部→参照）。 </li></ol>光刺激とERGセットアップの2の接続とキャリブレーション<ol><li>ダークにすることができる小型の記録実験室、作成（または見つけ）。赤製オーバーベンチ光または赤ヘッドランプのいずれかまたは両方を装備。 </li><li>セットアップ時に、ラットの目に到達する赤色光照度が1ルクスを超えていないことを確認するルクスメーターを使用してください。 注：中性濃度フィルタは、ランプの明るさを減少させるために使用することができ、ランプ光源は、具体的に、赤色光を放出しなければなりません。光源は低い（可視）波長を放射する場合ダーク適応性が損なわれます。 </li><li>あなたが持っているであろう記録研究室に入るすべての迷光を封鎖（これは多くの場合、不透明なテープで永続性を必要とする）と、オーバーフィットするのに十分な大きさ、など薄暗い減光フィルタ（これはシートに購入することができます）、任意のコンピュータの画面を準備ラボ。 注：迷光と画面の光がラットの眼の暗順応を害するのに十分です。 </li><li>データ集録ハードウェアにアンプを接続します。アンプに正、負の基準リード線を接続します。コンピュータとLED全体野電源ユニットは確実に接地源に接続されていることを確認してください。 注：一部のラボでは、建物のグランドに接続され、接地点を専門にしています。水道管は、効果的な代替手段です。 </li><li>研究品質の放射計とLED光源を調整します。動物の眼は実験中に配置される位置にあるメーターのセンサーを修正しました。 </li><li>フラッシュエネルギー、フラッシュ期間、フラッシュ間のフラッシュの繰り返しや時間の段階的な増加にフルフィールドERGプロトコルを実行するプログラム全体野のLEDは、設定をinterstimuls間隔（ISI）と呼ばれます。例えば、フルフィールドプロトコルについては、表1を参照してください。 注：フルフィールドERGは、Bに繰り返し薄暗いが点滅から増加を点滅段階的な様式で右が点滅します。ツインフラッシュプログラムは、フルフィールドのプロトコルからの続き、ロッドとコーンの応答の分離を可能にします。 </li></ol> ERGの実験に3日前<ol><li>ダーク記録する前に12時間のSDラットを適応させます。これは、迷光が除去された後、記録研究室でこれを行うことが便利です。 </li></ol> ERG実験の4日目<ol><li>録音中、穏やかに加熱される動物のためにアレンジ。私たちは、動物の頭部が全体野へのエントリで正しいポイントで休むことができるように構築された軽金属プラットフォームを使用しています。プラットフォームは、我々は水浴中で40℃に予熱した水をポンプこれを通してチューブを内蔵しています。 注：経験は、これは37℃での動物のコア温度を維持することを示しています。 </li><li>暗条件下でラットを計量。レコードの重みと正しいケタミン（60 mgの/ kg）およびキシラジンを構成する（5ミリグラム/ kg）の用量。ラットGENを抑えますTLYと腹腔内に麻酔薬を注入します。 </li><li>注入時に注意してください。動物が無意識になると（通常は5分以内）軽く反射応答が存在するかどうかを確認するために、片足パッドをつまんで麻酔の深さを確認してください。なお、この反射は先に進む前に、存在しないか、または弱いまで待つのがベストです。 </li><li>角膜へのアトロピンとproxmethacaineの別の一滴を適用します。 </li><li>黒糸の10cmの長さをカットします。簡単な結び目でループ状にして、目の赤道上にループを滑ります。少し締め。影響は最小限の圧力で、やや前方眼球を描画することです。これは、まぶたから透明な角膜を保持します。 </li><li>カルボマー眼は角膜の表面に低下適用されます。カルボマーは、角膜表面上に残り、まぶたや顔の上にこぼれないようにします。 </li><li>加熱されたプラットフォーム上に吸収性寝具を置きます。 </li><li>全体野の開口部に推奨代わりに頭をベッド上の位置ラット、。 </li><li>挿入int型直腸にernal温度プローブ。尾へのプローブコードをテーピングにより所定の位置に温度プローブを固定します。 </li><li>皮下後脚に参照電極（23 G針）を挿入し、アンプに接続します。 </li><li>口の中でしっかりと負極（銀/塩化銀ペレット）を配置します。これは口を滑らないようにするには、安定した面に接続するリード線を取り付けます。 </li><li>角膜の中心の上に正極を配置します。マイクロマニピュレーターを用いて、電極を静かに角膜に触れることを確認してください。 </li><li> 37.5°C - チェック体温は37.0です。 </li><li>動物が適切に配置され、電極が所定の位置にあるされたら、（暗順応を維持するために）、不透明な材料で、全体のセットアップ（全体野および動物）を羽織ります。我々は、柔らかい黒い布を使用しています。 </li><li>取得ソフトウェアで事前収集サンプリングの5ミリ秒で100〜1000ミリ秒の収集時間で2 kHzのサンプリング·レートで設定します。 1〜1000のバンドパスフィルタを設定しますヘルツとそのサンプリングがフラッシュ以下〜250ミリ秒の期間をサンプリングするようにトリガされていることを確認します。 </li><li>記録ベースラインを確認してください。これは、外来ノイズを含まないことが、いくつかのアンプのノイズや呼吸振動を表示する必要があります。 </li><li>ベースラインは外来ノイズを示している場合は、トラブルシューティングを開始します。ほとんどの問題は、電極の位置、またはアースに滑りに関連しています。録音は外来ノイズの自由であることを確認するためにファラデーケージを使用します。 </li><li>テストフラッシュ、0.4ログスコットcd.sm -2を実行します。 図2Aと同様のERG波形が表示されます。 （：-474±39μVとb波：1,512±160μV、N = 11波）当研究室では0.4ログスコットcd.sm -2フラッシュのための典型的な応答があります。 </li><li>ダーク10分間の再適応に動物を可能にします。これは、ベースラインを再確認するために、これらの10分を使用すると便利です。 </li><li>安定した信号の次の確認は、録音を開始します。 </li><li>記録セッションの終了時に、そのボディtemperatをチェックUREを維持しました。電極を取り外します。角膜へのカルボマーポリマーを再適用します。それは、動物のハウジングに戻る前に、完全なモバイルとアクティブになるまで動物が熱パッド上に回復することができます。 </li></ol> 5.リモート虚血<ol><li>覚醒または麻酔げっ歯類のいずれかでリモート虚血を実行します。 </li><li>動物が麻酔されている場合は、膝の明確な、加熱されたプラットフォーム上に置く（上）と後肢の上部にわたって血圧計用カフをスリップ。 </li><li>動物は処理さに慣れている場合には、麻酔なしでこの手順を実行することが可能です。これは、2人が必要です。一人は静かに動物を拘束し、第二は、血圧計用カフを適用し、血圧計を運営しています。 </li><li>覚醒動物の場合、1後肢無料で、静かに動物をラップするために~15センチ×30〜50センチメートルタオルの一部を使用しています。その頭をホルダの腕や胴体、および場所の間に隠れてと、左前腕（例えば）に背に動物を置きますカフは、今説明しました。 </li><li>カフを収縮し、空気圧バルブが閉じていることを確認します。麻酔動物で160 mmHgのにカフをポンプと、覚醒動物における180 mmHgです。これは、収縮期血圧（通常は140 mmHgで160 mmHgのそれぞれ）を超えています。 </li><li>必要に応じて手持ちのポンプを使用して、これらの圧力を維持します。 </li><li>虚血のために計画された時間（私たちは、5分間の再灌流によって分離された5分の2ピリオドを使用）した後、空気圧バルブを緩めてカフ圧を収縮させます。 </li><li>フットパッドに接続されている皮膚の温度プローブを使用して、リモート虚血の効果を確認してください。皮膚温度は、典型的には、5分間かけて、32-30°Cから落下し、再灌流に回復します。 </li></ol> 6.光損傷<ol><li>光損傷の手順の前に、ラットが暗順応一晩であることを確認してください。 </li><li> （遅滞なく我々の実験で）肢虚血以下の適切な時間に、各動物をプレキシガラス箱の中に単独で配置され、WI床式の容器に目の水と食料。 注：光誘起損傷は、アルビノ動物において行うことができます。 </li><li>標準時間（通常は午前9時）に予め較正千ルクスの白色光に切り替え、24時間この状態を維持します。 </li></ol> 7. ERGデータ抽出と分析<ol><li> ERGの平均波形を取得します。減算によって、非ゼロのベースラインの、正しい必要であれば。 </li><li>ベースラインと第一の電圧差として、（高刺激強度半ばで発表）は、A波の振幅を測定（&lt;30ミリ秒の待ち時間）トラフ（ 図1）。 </li><li>典型的には80〜100ミリ秒（ 図1）の待ち時間で発生する、次の波のa波と正のピークとの間の電圧差としてb波の振幅を測定します。 </li><li> 90 Hzの遷移帯域で、60-235ヘルツからデータをフィルタリングするために、フーリエ変換を用いて、振動電位を分離します<sup&gt; 7。必要に応じて、単離された振動電位信号は、A波の谷の身元を確認するためにフィルタリングされていない波形から減算することができます。 </li><li> A及びB波のピークの暗黙の時間（待ち時間）は、有用な測定（ 図1）であることができます。ロッド応答を分離するために双子の点滅を使用します。混合応答（フラッシュ1）ロッド応答を分離する（ 図2）からの錐体応答（フラッシュ2）を減算します。 </li><li>個々の光強度を波およびb波の振幅を正規化（後処理/後処理ベースライン）、または治療群について平均。強度応答曲線は、フラッシュエネルギーに対してグループ振幅と誤差をプロットします。 </li></ol>

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ジョナサン·ストーンは、CSCM Pty Ltdのディレクターであります

上記の暗順応フラッシュERG方法は、ラットの網膜機能を評価するための信頼できる方法です。 A波とB波の両方は、光損傷によ​​って減少しました。リモート虚血プレコンディショニングは、A波とB波の光損傷誘導減少を軽減します。網膜機能のこの保存は遠隔虚血プレコンディショニングは、低酸素症、虚血および運動8-10などの保護事前調整の他の形態に似ている、神経保護を誘導していることを示唆しています。記録設定、光刺激のパラメータ、および動物の状態 - 記録されたERG信号は因子3組によって決定されます。 録音セットアップ電極が誤って配置された場合ERGは振幅が低減されるか、準備が不完全11を接地されています。近くの電気機器の正しい接地記録のノイズを低減するために、重要です。大きなノイズはファラッドを解決しない場合は、AYケージを使用する必要があります。正極はしっかりERGフルフィールドプロトコルを開始する前に、完了時にチェックの付いている位置の確認と、角膜の中心に位置する必要があります。なお、この電極接...

ERGは、光に応答して、網膜によって生成され、眼の角膜表面から記録された電位です。記録条件は、慎重に管理されている場合、ERGは、網膜機能を評価するための種々の方法で使用することができます。ここでは、「フラッシュERG」、網膜が全体野の背景に提示簡単な、明るいフラッシュにさらされたときに発生する電位を記録する方法を説明しました。全体野が均一に光を分散し、光のフラッシュがほぼ均一に全体の網膜に到達します。網膜は、暗い記録前適応、及び動物の記録のために準備されるように暗順応を維持し、ERGが得られた場合、ロッドと錐体光受容体の両方によって生成されます。 暗順応フラッシュERGは、次の2つの方法で分析された特徴的な波形を有しています。まず、ERG波形の初期および後期成分を区別し、神経細胞の配列に関連しています網膜中のAlの活性化。最古のコンポーネントは、短い待ち時間負に向かう可能性のある、A波（ 図1）です。これは、b波と呼ばれ、正方向電位が続きます。 b波の立ち上がり位相が別の構成要素（振動電位またはOPS）と考えられている振動を示しています。 A波は、内顆粒層の細胞、およびアマクリン細胞による1のOPによってb波、光受容体によって発生すると考えられます。 刺激強度に基づいて、非常に薄暗いフラッシュへの対応は、暗順応閾値応答が可能であると呼ばれます。暗順応の閾値応答は、網膜神経節細胞2-4から生成されていると理解されます。第二に、フラッシュERGは明順応により分離することができる、または2つのフラッシュプロトコルによって棒状と円錐駆動コンポーネントに、以下に説明します。明所視条件下では、円錐集団が低いため、A波は、ラットでは検出可能ではなく、のOP及びb波であります5明確。その網膜高いコーン集団を持つ霊長類では、ロッド状と円錐経路の両方は、検出波6を発生させます。 多くの場合、フラッシュERGから抽出された2つの有用な尺度は、図2に示される典型的なフラッシュの応答と、 図1のように測定し、A-の振幅とb波である。感光体集団はdamagingly明るいへの曝露によって、例えば、低減された場合光、ERGのすべてのコンポーネントが低減されます。このような遠隔虚血プレコンディショニング（RIP）などの神経保護の介入は、A及びB波（ 図3）の振幅を維持することによって検証することができます。要約すると、ERGの分析は、健康、光損傷を受けたとneuroprotected網膜の間の比較を可能にします。

<table><tbody><tr><td>PCコンピュータ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Powerlab, 4チャンネル取得ハードウェア</td><td>ADインスツルメンツ</td><td>PL 35044</td><td>ERG</td></tr><tr><td>アニマルバイオアンプ</td>のアクイジション <td>ADインスツルメンツ</td><td>FE 136</td><td>ERG</td></tr><tr><td>ラボチャート</td>用アンプ <td>ADインスツルメン</td><td></td>ツ <td>信号収集ソフトウェア</td></tr><tr><td>ガンツフィールド</td><td>測光ソリューション</td><td>FS-250A</td><td>光刺激</td></tr><tr><td>Ganzfieldのオペレーティングシステム</td><td>測光ソリューション</td><td></td><td></td></tr><tr><td>研究ラジオメーター</td><td>国際光技術</td><td>ILT-1700</td><td>光シリーズを校正する</td></tr><tr><td>ルクス</td><td>メーターLX-1010B</td><td></td><td>赤色光のillumanation</td></tr><tr><td>を確認する Excel</td><td>マイクロソフト</td><td></td><td></td></tr><tr><td>リード線</td><td>AD機器</td><td></td><td>接続 ポジティブ、ネガティブ接地電極からアンプ</td></tr><tr><td>へのリード線 - アリゲーター</td><td>、ADインスツルメンツ、</td><td></td><td>グランド、ガンツフィールド、およびコンピュータへの買収ハードウェア</td></tr><tr><td>プラチナ線95%</td><td>A&E金属</td><td></td><td>、正極</td></tr><tr><td>、口電極、Ag/AgCl、ペレット</td>、<td>SDR</td><td>、E205</td><td>、ネガティブエレクト、</td></tr><tr><td>26Gニードル</td><td>、BD</td><td></td>、<td>グランドエレクトード</td></tr>、<tr><td>ウォーターポンプ</td>、ウォーターバス<td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>チューブ、</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>フレキシブルプローブ付きホメオサームブランケットシステム</td>、<td>ハーバード・アパルタス</td><td>507222F</td><td></td></tr><tr><td>アトロピン1%W / v</td><td>ボシュ&下垂</td>局所<td>散瞳</td>プロクスメチカイン0.5%w / v Bausch&<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td>腰部<td>局所麻酔薬</td></tr><tr><td>ビスコ涙点眼薬</td><td>ノバルティス</td><td></td><td>カルボマーポリマー</td></tr><tr><td>糸</td><td></td><td></td><td>引き込みまぶた</td></tr>ピン<tr><td>セット</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>再利用可能な接着剤</td><td>ブルータック</td><td></td><td>薄暗い赤いヘッドランプ。電極を固定</td></tr>する <tr><td>吸収性寝具</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ケタミル - ケタミン 100 mg/ml - 50 ml</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>解離性</td></tr><tr><td>キシリウム - キシラジン 100 mg/ml - 50 ml</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd</td><td></td><td>筋弛緩剤</td></tr><tr><td>スケール</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

齧歯類網膜とリモート四肢虚血プレコンディショニングの保護効果に機能を評価するために電図を用いて、

Using the Electroretinogram to Assess Function in the Rodent Retina and the Protective Effects of Remote Limb Ischemic Preconditioning

ERGは、すべての網膜活動の合計です。ERGは通常、網膜からの信号を収集して合計するアンテナとして機能する角膜から記録されます。ERGは、汎網膜である網膜機能の変化の感度の高い尺度ですが、網膜の小さな領域に限定された損傷を検出するにはあまり効果的ではありません。本研究では、網膜が短時間の光閃光にさらされたときに生成される電位である「フラッシュ」ERGを記録する方法について説明します。録音中の麻酔、散瞳、角膜管理の方法について説明します。網膜を暗く適応させる方法。電極の材料と配置。刺激エネルギーの範囲とキャリブレーション。パラメータの記録とデータの抽出。また、片方の手足に虚血を誘発する方法と、ERGを使用して、この網膜から離れた虚血が光損傷後の網膜機能に及ぼす影響を評価する方法についても説明します。暗順応ERGのコーン駆動成分の分離、およびそれによってロッドとコーン成分の分離を可能にする2フラッシュプロトコルについて説明します。ERGは低侵襲の技術で記録できるため、網膜の生理学、薬理学、毒物学の研究に広く使用されています。この有用性の一例として、光で損傷を受けた網膜の機能を評価するためにERGが使用されるが、神経保護的介入の有無にかかわらず説明する。遠隔虚血によるプレコンディショニング。

プロトコルは、 インビボでげっ歯類の網膜の視覚機能を測定することができます。 A波、光受容体の機能の測定値、及びb波、内網膜の機能の測定値は、 図1に注釈されています。 増加した光刺激を有するロッド支配ERG信号が増加すると、 図2（a）に示すように。 A波は〜0.4ログスコットのcd.sm -2および2.5ログスコットcd.sm -2（図示せず）での飽和までのA波の振幅が増加する時に明らかになります。ツインフラッシュパラダイムは、 図2Bに示すように、円錐ロッド単離反応に混入ERG信号を分離するために使用されてきました。 このERG記録技術は、神経保護の介入を確認するために使用することができます。ベースラインの記録は、光損傷の前には、 図3Aに見られる一週間を完了しました。 図において実証波および...

網膜電図(ERG)は、光に反応して網膜によって生成される電位です。この論文では、暗順応ラットでERGを使用して網膜機能を評価する方法と、神経保護的介入(この場合は遠隔虚血性プレコンディショニング)を評価するためにERGをどのように使用できるかについて説明します。

The ERG is the sum of all retinal activity. The ERG is usually recorded from the cornea, which acts as an antenna that collects and sums signals from the ...

この手順の全体的な目的は、正常なラット、光損傷を受けたラット、および遠隔虚血プレコンディショニング後に光損傷を受けたラットの視覚機能をERGを用いて評価し、それによって網膜に対する遠隔肢虚血の保護効果を実証することです。これはまず、ラットを12時間暗順応させることで達成されます。次のステップでは、LED光刺激とデジタルアンプを用いて、ベースラインの暗順応ERGを記録します。次に、ラットに強い連続光を照射し、網膜ストレスを与えます。最終ステップとして、光損傷を与えたラットと遠隔肢虚血によるプレコンディショニングを施したラットのERG記録を比較し、A波に現れる視細胞応答およびB波に現れる内網膜応答を測定します。最終的に、暗適応ERGを用いて暗所視機能を評価します。したがって、本手法は遠隔虚血に基づく神経保護に関する知見を提供することができます。また、他の形態の網膜損傷や疾患の薬理学的試験、および視覚欠損を持つ動物のスクリーニングにも適用可能です。本手順を開始するために、ラットを12時間暗順応させ、その後、ケタミン・キシラジンカクテルを注射して麻酔をかけます。動物が意識を失ったら、足を軽くつまんで反射反応がないことを確認し、麻酔深度をチェックします。次に、角膜にアトロピン1滴とプロキシメタカイン1滴を点眼します。10 cmの黒い縫合糸を2本切ります。次に、糸でループを作り、それを眼球の赤道部に滑り込ませます。眼球をわずかに前方に引き出し、角膜がまぶたに触れないように、少しきつく結びます。続いて、角膜にカルマー点眼液を投与します。ラットを加熱プラットフォーム上の吸収性ベッドの上に置き、頭部をガンツフェルトの開口部に配置します。次に、体温が37 °Cに維持されていることを確認するため、内部温度プローブを直腸に挿入し、コードをラットの尾にテープで固定してプローブの位置を安定させます。続いて、参照電極を後肢の皮下に挿入します。電極が口から脱落するのを防ぐため、陰極を口の中にしっかりと配置します。接続リードを安定した表面に固定します。次に、正極を角膜の中心に配置し、マイクロマニピュレーターを用いて電極が角膜に軽く接触するように調整します。電極の配置が完了したら、暗順応を維持するため、ガンツフェルト（ganzfeld）および動物を含む装置全体を不透明な素材で覆います。データ収集ソフトウェアにおいて、サンプリングレートを2 kHzに設定し、プリコレクションサンプリングを5 ms、収集時間を100〜1000 msに設定します。次に、バンドパスフィルタを1〜1000 Hzに設定し、フラッシュ後の100 msの間サンプリングがトリガーされるように設定してください。次に、記録のベースラインを確認します。外来ノイズはなく、アンプノイズと呼吸による変動が認められるはずです。その後、テストフラッシュを行います。これはテストフラッシュに対する典型的なERG波形です。完了後、動物を10分間暗順応させてください。その後、信号が安定しているかベースラインを再確認します。続いて、記録を開始します。記録セッションの終了時に、動物の体温が安定しているかを確認してください。電極を取り外し、角膜に再びカーマーポリマーを塗布します。その後、動物が完全に動き、活動的になるまでヒートパッドの上で回復させ、それから飼育ケージに戻します。この図は、暗適応後のERGにおけるa波およびb波の測定を示しています。ここに示されている波形は、暗適応させた眼の角膜から、T zeroとして示されるタイミングで照射された強光フラッシュに反応して記録されたものです。a波の振幅は、基線から最初の谷までで測定されます。B波の振幅は、A波の谷からそれに続く正のピークまでを測定します。潜時は、刺激アーチファクトから、A波の谷などのトレース上の関心点までを測定します。未加工のERG信号は、光刺激の強度が増すにつれて増大します。約0.4 logs scotopic candela seconds per meter squaredで波形が顕著になり、混合ERG信号を錐体反応と桿体反応に分離するためにツインフラッシュ法が用いられてきました。習熟すれば、この手法は30分以内に完了させることができます。

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

このビデオは、網膜の健康と視覚経路の完全性を研究するためのラットモデルの準備を示しています。視覚誘発電位と網膜電図の参照および能動電極をラットに接続し、続いてプラットフォームをガンツフェルドボウルの前でラットに位置合わせして網膜照明を均一にし、ファラデーケージを閉じて外部干渉を回避します。...

電気生理学セットアップを使用して視覚経路の完全性を評価するためのラットモデルの準備

出典: Brandli, A. 遠隔肢虚血性プレコンディショニング: げっ歯類における神経保護技術。J. Vis.

神経保護のためのラットモデルにおける非侵襲的四肢虚血プレコンディショニング

げっ歯類の網膜は、長い脳へのアクセス可能なウィンドウとして認識されている。この技術的な論文では、虚血性損傷後の中枢神経系内の血管再生の故障につながるメカニズムを研究するために、酸素誘発性網膜症のマウスモデルを採用しているプロトコルを提供する。説明したシステムはまた、網膜およびCNS内の機能の血管の成長を促進するための戦略を探求するために利用することができる。...

マウス網膜を使用してCNSにおける血管再生の評価

リモート虚血プレコンディショニング（RIP）が損傷ストレスに対するコンディショニング組織の方法です。我々は、5〜10分間血圧計用カフを膨張させることによって、下肢のリモート虚血の方法を確立しました。 RIPの神経保護機能は、げっ歯類における網膜変性のモデルで実証されています。...

リモート四肢虚血プレコンディショニング：げっ歯類における神経保護技術

生体内ERGは、動物や人間の孤立した無傷の網膜から直接、網膜細胞の電気的活動を記録するために使用することができます。ここでは、網膜細胞の電気的活動を解剖するために、一般的なin vivo ERGシステムをex vivo...

同時<em&gt; ex vivoで</emによる二つの網膜の&gt;機能テスト<em&gt; in vivoで</em&gt;電図システム

このプロトコルは、麻酔をかけたラットにおける網膜電図と視覚誘発電位の同時測定を説明しています。...

麻酔ラットにおける電図および視覚誘発電位の同時記録

私たちは、記録が麻酔の交絡せずに行われている人間の状態により類似している眼（網膜電位）と覚醒ラットにおける脳（視覚誘発電位）、からの視覚的な電気生理学的信号を測定するための外科的移植や録音手順を示しています。...

覚醒ラットに移植し、無線電図の記録と視覚誘発電位

ここでは、2000年代初頭にマルモラシュタイン、ピーチー、および同僚が最初に記述したDC-ERGとして知られている技術を用いて、マウスにおける網膜色素上皮(RPE)の光誘発電気応答を記録する方法を提示する。...

マウス網膜色素上皮の光誘発電気応答を記録するための直接結合電解電解(DC-ERG)

ここでは、単純な縫合糸とクランプを用いた一過性両側共通頸動脈閉塞によるレチナル虚血のマウスモデルについて述べている。このモデルは、心血管異常によって引き起こされる虚血の病的メカニズムを理解するのに有用である。...

一過性両側性頸動脈閉塞による虚血性筋炎損傷のマウスモデル

既存の多電極アレイまたはパッチクランプ装置の改造により、 ex vivo 網膜電図がより広く利用できるようになります。 生体外...

大小眼の網膜機能を研究するための Ex Vivo 網膜電図のセットアップと条件の最適化

このプロトコルは、前房カニューレ挿入と眼圧上昇を介して網膜虚血を誘発することにより、マウスの眼の網膜虚血再灌流損傷をモデル化し、続いて眼圧の正常化により再灌流を開始します。...

マウス眼モデルにおける網膜虚血-再灌流障害の誘導

学ぶ電図を用いた齧歯類網膜機能評価法。暗順応後のLED光刺激でベースラインを記録し、光ストレス下でのA波とB波を測定することで、リモート四肢虚血プレコンディショニングの神経保護効果を定量的に検証する手法です。

齧歯類網膜とリモート四肢虚血プレコンディショニングの保護効果に機能を評価するために電図を用いて、

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