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DOI: 10.3791/52722-v
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このプロトコルは、わずか10μlの血清サンプルから、細胞外ベシクル(電気自動車)、細胞から放出された小さな膜状粒子を単離する方法を詳しく説明します。このアプローチは、超遠心分離の必要性を回避するアッセイ時間の数分しか必要とし、限られた容積のサンプルからのEVの単離を可能にする。
この手順の全体的な目標は、紙ベースのプラットフォームを使用して細胞外小胞を分離することです。これは、最初に円形のセルロースを備えた2枚のポリスチレンシートでラミネートすることによって達成され、紙の切り欠きは登録されたスルーホールの配列に整列されます。2番目のステップは、細胞外小胞を紙のテストゾーンに結合する分子を化学的に結合することです。
次に、生体サンプルを紙製テストゾーンに直接ピペットで移動し、すすぎステップ後に細胞外小胞を分離します。最後のステップは、電子顕微鏡、Eliza、またはトランスクリプトーム分析を使用して、捕捉された細胞外小胞を特徴付けることです。最終的には、わずか10マイクロリットルの血清サンプルから得られる細胞外小胞のサブセットを精製し、濃縮することができます。
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