豊かな環境の住宅マウス用のプロトコル

この手順の目標は、マウスで強力な代謝効果と抗癌効果を生み出す環境エンリッチメントで動物を飼育および維持するために必要な詳細を提供することです。これは、まず、車輪、ランニングソース、ハッチ、チューブ、丸太、ケージなどのオブジェクトを備えた大きなビンに豊かな住宅環境を設定することによって達成されます。第2のステップは、動物たちに新しい環境を紹介することです。

次に、ビン内のオブジェクトの位置と種類を変更し、定期的に新鮮な食品と水を提供することで、豊かな環境が維持されます。最後のステップは、環境内で交換されたオブジェクトをクリーニングして、将来交換する準備を整えることです。最終的には、安楽死と動物組織の分析に。

この環境エンリッチメントの技術は、肥満の減少、食事誘発性肥満に対するエネルギー消費抵抗の増加、および視床下部対称神経脂肪細胞軸を活性化することによる白から褐色への脂肪表現型スイッチを示しています。この方法では、がんや代謝性疾患に対する抵抗力を高める実験室のげっ歯類のための充実した環境の設定に関する詳細を説明しています。まず、大きな濃縮ビンの内側にスポリシジン消毒剤をスプレーして拭きます。

メーカーの指示に従って、30%エタノールまたは水道水に浸した紙、タオル、ペーパータオルでドライヤーでビンを拭き取り、前の消毒剤の臭いを取り除きます。SORタイプのホイールを備えたプラスチックチューブイグルーや、豊かな環境でおもちゃのような他のさまざまなプラスチックハッチャーを使用してください。これらのおもちゃは以前と同じように洗濯し、以前と同じように洗った金属製のランニングホイールを使用してください。

車についた塗料が色あせ始め、動物が走るときに車がうるさくなる場合は、車と車軸がつながる部分に少量のワセリンを塗ってください。豊かな環境で木の丸太を使用してください。寝具やその他の破片を手で取り除いて、丸太を清掃します。

次に、丸太をドライサイクルまたはテキスタイルサイクルでオートクレーブし、摂氏121度の温度に15分間到達して滅菌します。29センチ×18センチ×12.5センチメートルと30.5センチ×19センチ×14センチメートルの寸法の間の清潔な給餌ケージを使用して保持します。給餌および飲用ワイヤーラックは、マウスが出入りできるように、ケージの前面底から直径5センチメートル以上の穴を開けます。

はじめましょう。2から2.5センチメートルの深さに大きい濃縮のビンにきれいなに1/4インチのトウモロコシの穂軸の実験室の動物の寝具のため。次に、前の大動脈クレーベの丸太を2つまたは3つビンの片隅に配置して、約1, 225センチメートル四方の領域を隔離します。

次に、丸太に隔離された領域に、SORホイールを上にした3つの接着剤を置きます。ホイールが自由に回転するスペースがあることを確認してください。次に、プラスチックチューブをつなぎ合わせて、中央の接続ピースから複数のアームが分岐するようにします。

このチューブをビンの中央、ビンの2つの角に置きます。ビンと同じ寝具で満たされた給餌ケージを置きます。各給餌ケージの前面にある穴は、ビンの中央を向いている必要があります。

各給餌ケージの上に、マウスの餌が入った餌と水のワイヤーを置きます。ウォーターボトルを追加します。11.5センチメートルホイール、20.5センチメートルホイール、および28センチホイールをビンに入れます。

次に、エンリッチメントビン全体におもちゃやトンネルのようなプラスチック製の小屋をさらに4〜5個配置します。ビンをマイクロアイソレーターフィルターペーパーで覆い、バインダークリップを使用してフィルターペーパーをビンにクリップします。標準ケージから濃縮ビンに動物を入れるときは、動物が標準ケージから濃縮ビンまで自由に移動できるように、ケージを横向きのビンに置きます。

ネスティングマテリアルを濃縮ビンに移さないでください.同じ年齢、性別、遺伝的系統の10〜20匹の動物を一度に濃縮環境に収容できます。動物が病気や苦痛の兆候がないか毎日観察されていることを確認してください。

必要に応じて、動物を優しく扱い、週に2回、動物の状態をさらに検査します。食べ物と水のレベルをチェックし、食べ物と水が次の2日間持続することを確認します。また、ランニングホイールやエンリッチメントトイは、広げて使い勝手の良いようにまっすぐにしましょう。

汚れた濃縮アイテムは、週に一度、理想的にはマウスが環境から取り除かれたときに交換してください。実験目的で、給餌ケージとワイヤーラックを取り外し、清潔なケージと生鮮食品で満たされたラックと交換します。ウォーターボトルをきれいなウォーターボトルと交換してください。

エンリッチメントアイテムを再配置して、セットアップの主要な側面は保持されますが、エンリッチメントアイテムの配置は異なります。点。大きな濃縮ビンの残りの部分を確認し、必要に応じて清掃します。汚れたゴミをすくい取り、2週間に一度、新しい清潔な寝具を敷き詰めます。

毎週の飼育を行うときは、おもちゃを手で洗うか、ケージウォッシュに通して洗ってください。毎月、エンリッチメントトイを取り外し、ケージに餌を与え、ゴミをすくい取って、ゴミの大部分を掃除します。ケージのすべての領域に2センチの寝具があることを確認し、新鮮なゴミと交換します 3か月に一度、または動物のプロトコルで要求されているように、すべての寝具とおもちゃを取り外し、家屋コントロールグループ動物と同じ12時間の明るい暗いサイクルで洗うことで濃縮ビンを消毒します。

マイクロアイソレートケージの濃縮環境のマウスとして、濃縮環境と同じトウモロコシの穂軸の寝床をコントロールケージに提供し、通常のマウスケージに同性の3〜5匹のマウスを収容したマイスターメーカーの巣で照らされた4センチメートル×4センチメートルの巣を追加します。ケージにおもちゃのチューブやハッチを設けないでください。ケージに餌を入れるためのワイヤーラックと、ケージが自動散水システムに接続されていない場合はウォーターボトルを含めます。

動物の健康状態を毎日監視し、動物が十分な食料と水を持っていることを確認します。ケージ、給電ワイヤー、食品、水を交換または清掃します。週に一度、以前と同様にケージとワイヤーラックを清掃します。

3週齢の雄マウスは、腫瘍皮下接種前の5週間、1動物あたり10〜5個の細胞を濃縮された環境または対照ケージに収容されました。結果は、接種後17日としてB 16黒色腫腫瘍の重みを示しています。各グループは10匹の動物で構成されていました。

アスタリスクは、ここで学生のTテストによって計算された0.05未満のP値を表します。生後3週間のマウスを6日間環境強化に供しました。充実した環境での6日間、後腹膜、白い脂肪組織、脂肪パッドの重量が減少しました。

このグラフは、濃縮された環境で6日間、褐色脂肪組織、表皮白色脂肪組織、および後腹膜白色脂肪組織、脂肪パッドの重量が体重に対して減少したことを示しています。次の2つのグラフは、ここで見られるように、4週間の環境強化、褐色脂肪組織を除くすべての脂肪タイプで脂肪パッド重量の減少、濃縮された環境に収容されたマウスの結果を共有しています。環境強化の4週間、褐色脂肪組織を除くすべての脂肪タイプの体重に対して脂肪パッドの重量が減少しました。

このビデオを見た後、抗がん剤や抗肥満剤の効果、マウスを誘発する豊かな環境をどのように設定し、維持するかをよく理解しているはずです。