Direct Induction of Hemogenic Endothelium and Blood by Overexpression of Transcription Factors in Human Pluripotent Stem Cells

Irina Elcheva; Vera Brok-Volchanskaya; Igor Slukvin

doi:10.3791/52910

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Direct Induction of Hemogenic Endothelium and Blood by Overexpression of Transcription Factors in Human Pluripotent Stem Cells

ヒト多能性幹細胞における転写因子の過剰発現によって、造血内皮と血液の直接誘導

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08:14 min

December 3, 2015

DOI: 10.3791/52910-v

Irina Elcheva¹, Vera Brok-Volchanskaya¹, Igor Slukvin²

¹Primate Research Center,University of Wisconsin-Madison, ²Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Wisconsin School of Medicine and Public Health

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

このプロトコルは、転写因子の強制発現を通じて、ヒト多能性幹細胞からの血行性内皮および多能性造血前駆細胞の効率的な誘導について説明しています。

この手順の全体的な目標は、転写因子の強制発現により、ヒト多能性幹細胞から赤血球および骨髄性血液細胞を生成することです。この方法は、内皮からHEPOへの移行、およびHEPOの発現と仕様の転写調節の研究のための血液細胞における均質性内皮の生成に適用できます。この技術の主な利点は、この方法がヒトpreport幹細胞からの均質性内皮誘導の非効率的かつ迅速な手段を提供し、細胞培養皿内の内皮ヘミー転移の観察を可能にすることです。

Dr.Linの研究室の研究助手であるDr.Bruskeは、プレコを開始する前に、マットゲルなどの細胞外マトリックスを含む6枚のウォールプレートをメーカーの指示に従って希釈し、ウェルに注ぐ手順を実演します。プレートを摂氏37度で30〜60分間インキュベートし、形質導入培地にします。まず、各形質導入セットに対してレンチウイルスアリコートを調製し、ウイルスの細胞への感染の推定多重度またはMOIが1細胞あたり1つのウイルスになるようにし、それらを摂氏4度に保ちます。

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