Name: 動機付け行動の分子基質を研究するために齧歯類の脳マイクロインジェクション (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-16T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 5 s
Description: 学ぼう、齧歯類の脳マイクロインジェクション技術を用いて行動の分子基質と精神疾患を研究する方法。カニューレ製作から正確な試薬投与までのプロトコルを習得し、行動神経科学の研究を前進させる実践的フレームワークを提供します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

MSBは、アルコール飲料医学研究財団、トランスレーショナルリサーチセンター賞(UL1 TR000058)、国立アルコール乱用・アルコール依存症研究所(P50 AA022537)、およびバージニア高等教育機器信託基金とVCU医学部が提供するスタートアップ資金によってサポートされています。

<ol><li>Koob, G. F., Volkow, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurocircuitry+of+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Neurocircuitry of addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 35 (1), 217-238 (2010).</li>
<li>Kalivas, P. W., Peters, J., Knackstedt, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+and+brain+circuits+in+drug+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Interv%22%5BJournal%5D)">Animal models and brain circuits in drug addiction.</a> Mol Interv. 6 (6), 339-344 (2006).</li>
<li>Bossert, J. M., Marchant, N. J., Calu, D. J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reinstatement+model+of+drug+relapse%3A+recent+neurobiological+findings%2C+emerging+research+topics%2C+and+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">The reinstatement model of drug relapse: recent neurobiological findings, emerging research topics, and translational research.</a> Psychopharmacology (Berl). 229 (3), 453-476 (2013).</li>
<li>Connor, E. C., Chapman, K., Butler, P., Mead, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+predictive+validity+of+the+rat+self-administration+model+for+abuse+liability%29%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The predictive validity of the rat self-administration model for abuse liability).</a> Neurosci Biobehav Rev. 35 (3), 912-938 (2011).</li>
<li>Watson, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+blockade+of+dopamine+D3+receptors+enhances+while+D2+receptor+antagonism+impairs+social+novelty+discrimination+and+novel+object+recognition+in+rats%3A+a+key+role+for+the+prefrontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Selective blockade of dopamine D3 receptors enhances while D2 receptor antagonism impairs social novelty discrimination and novel object recognition in rats: a key role for the prefrontal cortex.</a> Neuropsychopharmacology. 37 (3), 770-786 (2012).</li>
<li>Takahashi, A., Shimamoto, A., Boyson, C. O., DeBold, J. F., Miczek, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GABA%28B%29+receptor+modulation+of+serotonin+neurons+in+the+dorsal+raphe+nucleus+and+escalation+of+aggression+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">GABA(B) receptor modulation of serotonin neurons in the dorsal raphe nucleus and escalation of aggression in mice.</a> J Neurosci. 30 (35), 11771-11780 (2010).</li>
<li>Spencer, R. C., Klein, R. M., Berridge, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychostimulants+act+within+the+prefrontal+cortex+to+improve+cognitive+function%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Psychostimulants act within the prefrontal cortex to improve cognitive function.</a> Biol Psychiatry. 72 (3), 221-227 (2012).</li>
<li>Bowers, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activator+of+G+protein+signaling+3%3A+a+gatekeeper+of+cocaine+sensitization+and+drug+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Activator of G protein signaling 3: a gatekeeper of cocaine sensitization and drug seeking.</a> Neuron. 42 (2), 269-281 (2004).</li>
<li>Abudara, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+connexin43+mimetic+peptide+Gap19+inhibits+hemichannels+without+altering+gap+junctional+communication+in+astrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The connexin43 mimetic peptide Gap19 inhibits hemichannels without altering gap junctional communication in astrocytes.</a> Front Cell Neurosci. 8, 306(2014).</li>
<li>Cahill, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((D1R%2FGluN1+complexes+in+the+striatum+integrate+dopamine+and+glutamate+signalling+to+control+synaptic+plasticity+and+cocaine-induced+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">D1R/GluN1 complexes in the striatum integrate dopamine and glutamate signalling to control synaptic plasticity and cocaine-induced responses.</a> Mol Psychiatry. 19 (12), 1295-1304 (2014).</li>
<li>McFarland, K., Kalivas, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+circuitry+mediating+cocaine-induced+reinstatement+of+drug-seeking+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The circuitry mediating cocaine-induced reinstatement of drug-seeking behavior.</a> J Neurosci. 21 (21), 8655-8663 (2001).</li>
<li>Fuchs, R. A., Branham, R. K., See, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+neural+substrates+mediate+cocaine+seeking+after+abstinence+versus+extinction+training%3A+a+critical+role+for+the+dorsolateral+caudate-putamen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Different neural substrates mediate cocaine seeking after abstinence versus extinction training: a critical role for the dorsolateral caudate-putamen.</a> J Neurosci. 26 (13), 3584-3588 (2006).</li>
<li>Ebersberger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+meningeal+innervation%3A+aspects+and+consequences+of+chemosensitivity+of+meningeal+nociceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Res+Tech%22%5BJournal%5D)">Physiology of meningeal innervation: aspects and consequences of chemosensitivity of meningeal nociceptors.</a> Microsc Res Tech. 53 (2), 138-146 (2001).</li>
<li>Netter, F. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNetter%2C+FH+%22Musculoskeletal+System+Part+I%3A+Anatomy%3B+Physiology%2C+and+Metabolic+Disorders%22">Musculoskeletal System Part I: Anatomy; Physiology, and Metabolic Disorders</a>. 8, 1st ed, CIBA-Geigy. Summit, New Jersey. (1987).</li>
<li>Ferguson, S. M., Eskenazi, D., Ishikawa, M., Wanat, M. J., Phillips, P. E., Dong, Y., Roth, B. L., Neumaier, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+neuronal+inhibition+reveals+opposing+roles+of+indirect+and+direct+pathways+in+sensitization%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Transient neuronal inhibition reveals opposing roles of indirect and direct pathways in sensitization.</a> Nat Neurosci. 14 (1), 22-24 (2011).</li>
<li>Gonzalez-Perez, O., Guerrero-Cazares, H., Quinones-Hinojosa, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+of+deep+brain+structures+with+microinjections+for+delivery+of+drugs%2C+viral+vectors%2C+or+cell+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Targeting of deep brain structures with microinjections for delivery of drugs, viral vectors, or cell transplants.</a> J Vis Exp. (46), (2010).</li>
<li>Inquimbert, P., Moll, M., Kohno, T., Scholz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+injection+of+a+viral+vector+for+conditional+gene+manipulation+in+the+mouse+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic injection of a viral vector for conditional gene manipulation in the mouse spinal cord.</a> J Vis Exp. (73), (2013).</li>
<li>Schier, C. J., Mangieri, R. A., Dilly, G. A., Gonzales, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+of+ethanol+during+operant+ethanol+self-administration+and+ethanol+determination+by+gas+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Microdialysis of ethanol during operant ethanol self-administration and ethanol determination by gas chromatography.</a> J Vis Exp. (67), (2012).</li>
<li>Fornari, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+stereotaxic+surgery+and+animal+welfare+outcome+improvements+for+behavioral+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rodent stereotaxic surgery and animal welfare outcome improvements for behavioral neuroscience.</a> J Vis Exp. (59), e3528(2012).</li>
<li>Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survivable+stereotaxic+surgery+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Survivable stereotaxic surgery in rodents.</a> J Vis Exp. (20), e880(2008).</li>
<li>Richardson, N. R., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+schedules+in+drug+self-administration+studies+in+rats%3A+a+method+to+evaluate+reinforcing+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio schedules in drug self-administration studies in rats: a method to evaluate reinforcing efficacy.</a> J Neurosci Methods. 66 (1), 1-11 (1996).</li>
<li>Cheeta, S., Brooks, S., Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+reinforcer+sweetness+and+the+D2%2FD3+antagonist+raclopride+on+progressive+ratio+operant+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of reinforcer sweetness and the D2/D3 antagonist raclopride on progressive ratio operant performance.</a> Behav Pharmacol. 6 (2), 127-132 (1995).</li>
<li>Roberts, D. C., Morgan, D., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+make+a+rat+addicted+to+cocaine%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neuropsychopharmacol+Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">How to make a rat addicted to cocaine.</a> Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 31 (8), 1614-1624 (2007).</li>
<li>Arnold, J. M., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critique+of+fixed+and+progressive+ratio+schedules+used+to+examine+the+neural+substrates+of+drug+reinforcement%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">A critique of fixed and progressive ratio schedules used to examine the neural substrates of drug reinforcement.</a> Pharmacol Biochem Behav. 57, 441-447 (1997).</li>
<li>Hodos, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+as+a+measure+of+reward+strength%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio as a measure of reward strength.</a> Science. 134 (3483), 943-944 (1961).</li>
<li>Depoortere, R. Y., Li, D. H., Lane, J. D., Emmett-Oglesby, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parameters+of+self-administration+of+cocaine+in+rats+under+a+progressive-ratio+schedule%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Parameters of self-administration of cocaine in rats under a progressive-ratio schedule.</a> Pharmacol Biochem Behav. 45 (3), 539-548 (1993).</li>
<li>Bowers, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleus+accumbens+AGS3+expression+drives+ethanol+seeking+through+G+betagamma%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Nucleus accumbens AGS3 expression drives ethanol seeking through G betagamma.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (34), 12533-12538 (2008).</li>
<li>Bull, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+Nucleus+Accumbens+Core+Astrocytes+Modulate+Reward+and+the+Motivation+to+Self-Administer+Ethanol+after+Abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Rat Nucleus Accumbens Core Astrocytes Modulate Reward and the Motivation to Self-Administer Ethanol after Abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 39 (12), 2835-2845 (2014).</li>
<li>Hopf, F. W., Chang, S. J., Sparta, D. R., Bowers, M. S., Bonci, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motivation+for+alcohol+becomes+resistant+to+quinine+adulteration+after+3+to+4+months+of+intermittent+alcohol+self-administration%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Motivation for alcohol becomes resistant to quinine adulteration after 3 to 4 months of intermittent alcohol self-administration.</a> Alcohol Clin Exp Res. 34 (9), 1565-1573 (2010).</li>
<li>Hopf, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+nucleus+accumbens+SK+channel+activity+enhances+alcohol+seeking+during+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Reduced nucleus accumbens SK channel activity enhances alcohol seeking during abstinence.</a> Neuron. 65 (5), 682-694 (2010).</li>
<li>Salerni, C. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSalerni%2C+CM+%22Engineering+Adhesives+for+Repeated+Sterilization%22">Engineering Adhesives for Repeated Sterilization</a>. , Henkel. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.henkelna.com/us/content_data/99736_Engineering_Adhesives_for_Repeated_Sterilization.pdf">http://www.henkelna.com/us/content_data/99736_Engineering_Adhesives_for_Repeated_Sterilization.pdf</a> (2015).</li>
<li>Gundersen, H. J., Jensen, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+efficiency+of+systematic+sampling+in+stereology+and+its+prediction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">The efficiency of systematic sampling in stereology and its prediction.</a> J Microsc. 147 (Pt 3), 229-263 (1987).</li>
<li>Mastakov, M. Y., Baer, K., Xu, R., Fitzsimons, H., During, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+injection+of+rAAV+with+mannitol+enhances+gene+expression+in+the+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Combined injection of rAAV with mannitol enhances gene expression in the rat brain.</a> Mol Ther. 3 (2), 225-232 (2001).</li>
<li>Burger, C., Nguyen, F. N., Deng, J., Mandel, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+mannitol-induced+hyperosmolality+amplifies+rAAV2-mediated+striatal+transduction+to+a+greater+extent+than+local+co-infusion%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Systemic mannitol-induced hyperosmolality amplifies rAAV2-mediated striatal transduction to a greater extent than local co-infusion.</a> Mol Ther. 11 (2), 327-331 (2005).</li>
<li>Agulhon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+the+autonomic+nervous+system+by+acute+glial+cell+Gq-GPCR+activation+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Modulation of the autonomic nervous system by acute glial cell Gq-GPCR activation in vivo.</a> J Physiol. 591 (22), 5599-5609 (2013).</li>
<li>Armbruster, B. N., Li, X., Pausch, M. H., Herlitze, S., Roth, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolving+the+lock+to+fit+the+key+to+create+a+family+of+G+protein-coupled+receptors+potently+activated+by+an+inert+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">Evolving the lock to fit the key to create a family of G protein-coupled receptors potently activated by an inert ligand.</a> PNAS. 104 (12), 5163-5168 (2007).</li>
<li>Cruikshank, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potent+block+of+Cx36+and+Cx50+gap+junction+channels+by+mefloquine%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">Potent block of Cx36 and Cx50 gap junction channels by mefloquine.</a> PNAS. 101 (33), 12364-12369 (2004).</li>
<li>Miguel-Hidalgo, J., Shoyama, Y., Wanzo, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infusion+of+gliotoxins+or+a+gap+junction+blocker+in+the+prelimbic+cortex+increases+alcohol+preference+in+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Infusion of gliotoxins or a gap junction blocker in the prelimbic cortex increases alcohol preference in Wistar rats.</a> J Psychopharmacol. 23 (5), 550-557 (2008).</li>
<li>Bowers, M. S., Lake, R. W., Rubinchik, S., Dong, J. Y., Kalivas, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elucidation+of+Homer+1a+function+in+the+nucleus+accumbens+using+adenovirus+gene+transfer+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Elucidation of Homer 1a function in the nucleus accumbens using adenovirus gene transfer technology.</a> Ann N Y Acad Sci. 1003, 419-421 (2003).</li>
<li>Mackler, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NAC-1+is+a+brain+POZ%2FBTB+protein+that+can+prevent+cocaine-induced+sensitization+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">NAC-1 is a brain POZ/BTB protein that can prevent cocaine-induced sensitization in the rat.</a> J Neurosci. 20 (16), 6210-6217 (2000).</li>
<li>Geyer, M. A., Swerdlow, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+startle+response%2C+prepulse+inhibition%2C+and+habituation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Measurement of startle response, prepulse inhibition, and habituation.</a> Curr Protoc Neurosci. 8, Unit 8.7(2001).</li>
<li>Bedford, J. A., Bailey, L. P., Wilson, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cocaine+reinforced+progressive+ratio+performance+in+the+rhesus+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Cocaine reinforced progressive ratio performance in the rhesus monkey.</a> Pharmacol Biochem Behav. 9 (5), 631-638 (1978).</li>
</ol>

どの著者も、競合する利益や相反する利益を持っていません。

ここで紹介する手順は、マイクロインジェクションカニューレと動機付け行動の分子基質の解明に役立ちますmicroinjectorsを製造するための効率的な手段です。この方法は、いくつかの利点を提供しています。まず、自分のインプラントおよびmicroinjectorsを製造することにより、新たな実験パラメータは、急速に最適化することができ、 すなわち、1つは、コンポーネントが到着するカスタムメイドのを待つ必要はありません。第二に、カニューレの小径のため、多くのカニューレを同時に注入することができます。これは、生存率を向上させることができ、必要な外科手術時間が、短縮し、また、動物ごとに複数のインプラントを可能にします。固定比パラダイムを迅速に簡単に所望の強化スケジュールを含むイベント遷移パラメータリストを適用することにより、プログレッシブ比パラダイムに変換することができるので、第三に、オペラントチャンバーを制御するために使用されるソフトウェアは、容易に、プログレッシブ比スケジュールを収容します。 であるために広く便利な、汎用のマイクロインジェクションの手順は、現在利用可能なほぼすべての試薬のマイクロインジェクションのために広く適用されるべきであることを提示しました。そのため、私たちは、この技術はマイナーな修正を加えて、将来的に同様の高い有用性であり続けることを期待しています。唯一のいくつかの変数を変化させることにより、この方法は、試薬の広い数に適用することができます。最も一般的に操作することになるパラメータは、マイクロインジェクターがカニューレ、注射の量、注入速度から突出長さがあります。例えば、1は、インジェクタは、通常、慢性移植片の周りに形成グリア性瘢痕を避けるために、カニューレ先端からさらに突出することができます。さらに、一つはより大きな体積を注入することを望むかもしれません。線条体ウイルスマイクロインジェクションのために、1μLの量は、一般的に使用され、このボリュームは、一般的に、より長い時間かけて注入される使用と比較して（頻繁に7から10分の追加の拡散時間 - 10分プラス3）薬理学的試薬用のD（通常は0.3から3分プラス1 - - 2オーバー0.5μL3分の追加の拡散時間）。ユーザーは文献を参照してくださいおよび/または経験的に自分のニーズに最適なパラメータを決定する必要があります。 1）カニューレの長さ、2）マイクロインジェクターの長さ、3）マイクロインジェクターの噴霧パターンの品質、及び4）注射前に、システムの整合性：いずれにしても、この手順の成功は、4つの変数に決定的に依存しています。マイクロインジェクションの場所はマイクロインジェクタがカニューレから突出した深さに依存しているため、それは両方のカニューレ（ステップ1.2.8）と、マイクロインジェクターの長さ（ポスト曲げ、ステップ2.2.1）の両方を正確既知およびすべての被験者の間で均一であることが肝要です。これは、簡単に簡単に任意のはそれが最後の再測定に必要な長さではありません実現拒否することによって制御することができます。これはガイドカニューレの直下に発生した場合、また、注入位置は、予測することができます。 DOEこのように、任意のマイクロインジェクターテストの際に長い、細い流れ（ステップ2.4​​.6）が拒否されるべき噴霧しませんよ。質の注入はまた、注入前に、システムの完全性に関連しています。インジェクタからすべての水を分配した後（前の試薬で充填する）は、複数のスポットをラボワイプ上で観測されている場合、リークは（ステップ2.4​​.8に注意してください）​​是正する必要があります。さらに、（試薬とマイクロインジェクターを充填した後）PE20チューブ内の水からの薬物が一つではない分離バブル（ステップ2.4​​.9）、単一のバブル場合、インジェクタは、部分的に詰まっています。この詰まりは防止または注射をそらすことができどちらか。これも（ステップ2.4​​.8に注意）は、容易に改善することができます。 1は3つの選択肢がある動物が定位フレームにある間に顕微注入することを望むべきです。第1に、それは定位マニピュレータによってしっかりと保持し、また、PE20チューブとの接続を可能にするために十分遠くまで延長することができるように、マイクロインジェクターの襟の長さを増加させることができます。第二に、上eは、時間的にカニューレを移植し、ここで紹介する標準マイクロインジェクターを使用することができます。第三に、人は描かれ、研磨されたガラスピペットを使用することができます。16,17 ここで紹介する手順の重要な制限は、それが最善の手順を熟知しているだけでなく、扱いラットで実施されていることです。同じ研究者が2ヶ月以上毎日ラットを取り扱うため、結果のセクションで説明したデータに使用したラットは、特別な取り扱い手順を必要としません。これは、少なくとも2週間、外科用インプラントの毎日の観察および操作が含まれていました。しかし、ラットは急速に応力が作用することができるプレパルス阻害アッセイの前に使用されている多数の技術により馴化され得ます。これらの特別な馴化技術がうまく以前に詳述されている。43これらの手順に加えて、ラットが短くmicroinjectorsはデュ使用されているマイクロインジェクションの手順に慣らしすることをお勧めしますリング「偽」噴射。これらの偽注射中に、マイクロインジェクターは、組織損傷を制限するために組織内に突出しないことが重要です。つまり、マイクロインジェクターは、もはや14ミリメートル以上曲げてはなりません。したがって、この手法の最適な実施のために必要な完全な慣れは、限定と見なすことができます。 いくつかの行動パラダイムは動機を測定するために存在するが、進行性の比率は、一般的に、被験者が強化子を得るために発揮していく所存です努力を定量化するために使用されます。プログレッシブ比パラダイムは、多くの場合、最後に完了した比率のレバー押しの最大数として定義されたブレークポイントとして知られている指標を生成;。。 すなわち 、最大のものは強化子を生成応答21プログレッシブ比は大きさを補強するために敏感です。例えば、より高いコカイン（またはスクロース）の用量は、より高いブレークポイントと低いコカイン（またはスクロース）を生成低いbreakpをもたらす用量OINT。21,22により、ブレークポイントがモチベーションおよび/ ​​または有効性を補強するための日常的に使用するプロキシです。21,23-26ブレークポイントの意図は、動物が応答を停止したときを決定することであるため、プログレッシブ比パラダイムの重要なパラメータでありますセッションの長さ。有限セッションの長さは、ブレークポイントの値に偽のキャップを置くことができ、これは異常に自己投与またはその増加後の補強休止の速度を減少させる前処理によって悪化することができます。この交絡は、アプローチの任意の数によって克服することができる;例えば、動物は平均間の注入間隔の倍数によって応答する源泉徴収したときに終了するセッションは、このアプローチの44より一般的に適用される変異体は、セッションが一度した応答終了することです。被験者全体で一定に保持されているいくつかの実験的に決定された値によって源泉徴収されて。私たちは、ステップ4.4.9.11にこの手法を適用する方法を提供しています。

げっ歯類と人間は、行動に関連する刺激1-3に対して非常によく似た方法で反応します。このことは、げっ歯類が行動の分子基質や複雑な精神疾患の解明に適した対象であることを示唆している4。モチベーションなどの複雑な行動プロセスの分子基質を理解するには、多くの場合、脳のマイクロインジェクションが必要です。ここでは、脳マイクロインジェクション技術と主要な動機付けアッセイの両方を紹介します。ラットを被験者として使用しますが、これらの手順は、適切に処理されたマウスに容易に適応できます。本明細書には、必要なカニューレ、オブチュレーター(ダミーカニューレまたはスタイレット)、およびマイクロインジェクターの製造手順が含まれる。提示された方法は、プレハブの道具よりもはるかに柔軟性があり、費用対効果が高くなります。この柔軟性は、条件を最適化する際に価値があります。重要なのは、マイクロインジェクション手順を使用して無数の仮説を検証できるためです。ここで紹介する手法は、広く適用できるはずです。例えば、受容体リガンドをマイクロインジェクションして神経化学を理解することができます3,5,6;細胞透過性ペプチドおよび低分子をマイクロインジェクションして、細胞内シグナル伝達経路を理解することができます7-10;毒素、イオンチャネル遮断薬、またはアンタゴニストカクテルをマイクロインジェクションして、回路を理解することができます1,11,12。
ここで提示されている一般的なプロトコルは、ユーザーが特定のニーズに合わせて容易に適応させることができますが、マイクロインジェクションは軽度の手の拘束下にある覚醒したげっ歯類でマイクロインジェクションが発生するため、行動アッセイに特に適しています。麻酔や特別な拘束は必要ありません。これは、脳自体に痛みの感覚がないために可能です。ただし、麻酔を使用しない場合は、以前に定位固定されたカニューレを介してマイクロインジェクションを行う必要があります。これは、侵害受容器が頭皮、脳を囲む膜である髄膜13、頭蓋骨を覆う膜である骨膜14に存在するためです。麻酔下でのマイクロインジェクションが望ましい場合があることに注意すべきです。一例は、ウイルスが注入されているときであり、ステンレス製のスチールニードル15またはガラスピペットのいずれかを介して直接ウイルスを注入することを望むかもしれない、なぜならこれは組織の損傷を減らし、形質導入効率を向上させることができるからである。16,17 以下に説明するマイクロインジェクターは、この目的のために変更することができ、その方法に関する提案はディスカッションで見つけることができます。他のJoVEの記事では、脳定位性脳カニューレの移植が実証されているため18-20、これらの手順はここでは取り上げません。
これらのマイクロインジェクション手順を、モチベーションを定量化するアッセイとともに提示します。現在、ランウェイボックスやバリアスケーリングなど、やる気のある行動のいくつかのげっ歯類モデルが使用されています。ここでは、オペラントの漸進的強化率のスケジュールを使用して、オペラントの応答が強化子によって維持されている動機を定量化する方法について説明します。プログレッシブ比での応答は、強化子の大きさに応答します。したがって、このアッセイは、モチベーションおよび/または強化効果の代理として日常的に使用されています。 21,23-30 このトピックについては、いくつかの優れたレビューが詳細に取り上げられているため、21,24 主に実際的な問題に焦点を当てます。

<table><tbody><tr><td>カニューレチューブ</td><td>アマゾン供給/小部品</td><td>HTXX-26T-60</td><td>26 G、ハイポチューブ S/S 316-TW 26GA</td></tr><tr><td>オブチュレーター</td><td>アマゾン供給/小部品</td><td>GWXX-0080-30-05</td><td>33ゲージ、ワイヤー S/S 316LVM 0.008 IN</td></tr><tr><td>マイクロインジェクター ワイヤー</td><td>MicroGroup</td><td>33RW 304</td><td>33ゲージ</td></tr><tr><td>瞬間接着剤</td><td>ロックタイト</td><td>3924AC</td><td>液体、非ゲル、オートクレーブ滅菌可能</td></tr><tr><td>マイクロインジェクター プラスチックチューブ</td><td>ベクトン ディクソン</td><td>427406</td><td>PE20</td></tr><tr><td>中重量止血剤</td><td>ワールド プレシジョン インスツルメンツ</td><td>501241-G</td><td></td></tr><tr><td>定規</td><td>フィッシャー</td><td>09-016</td><td>150 mm</td></tr><tr><td>#7 鉗子</td> スト<td>ールティング</td><td>52100-77</td><td>デュモン、デュモスター</td></tr><tr><td>ロータリー ツール</td><td>ドレンメル</td><td>285</td><td>2速</td></tr><tr><td>カットオフ ディスク</td><td>マクマスターCarr</td><td>3602</td><td>15/16" x 0.025"</td></tr><tr><td>マイクロインジェクションポンプ</td><td>ハーバード装置</td><td>PhD 2000</td><td></td></tr><tr><td>1 ulガラスシリンジ</td><td>ハミルトン</td><td>7001KH</td><td>針スタイル:25s / 2.75 "/ 3</td></tr><tr><td>コットンチップアプリケーター</td><td>フィ</td><td>ッシャー23-400-101</td><td></td></tr><tr><td>ラボワイプ</td><td>キムワイプ</td><td>34133</td><td></td></tr><tr><td>オペラントソフトウェア</td><td>Coulbourn</td><td>グラフィック、ステート</td><td></td></tr><tr><td>、オペラント、チェンバース、</td><td>コールボラン</td><td>、ハビテスト</td><td></td></tr></tbody></table>

動機付け行動の分子基質を研究するために齧歯類の脳マイクロインジェクション

Rodent Brain Microinjection to Study Molecular Substrates of Motivated Behavior

脳マイクロインジェクションは、モチベーションなどの複雑な行動の分子基質の解明を助けることができます。この目的のために、げっ歯類は適切なモデルとして役立つことができますが、これは、行動に関連する刺激に対する応答と、刺激-作用結果を解析する回路が、人間とげっ歯類の間で驚くほど類似しているためです。複雑な挙動の分子基質を研究する上で、特定のシステムを修正、増強、または沈黙させる試薬のマイクロインジェクションは非常に貴重な技術です。ただし、結果の解釈を支援するためには、マイクロインジェクション部位を正確に標的にすることが重要です。手術器具とマイクロインジェクション針の製造方法を提示し、最小限のコストで正確なマイクロインジェクションと無制限のカスタマイズを可能にします。重要なことに、この技術は、必要な外科的処置をカバーした他のJoVEの記事と組み合わせて実施すれば、覚醒しているげっ歯類で成功裏に完了することができます。さらに、モチベーションの測定に適した多くの行動パラダイムがあります。プログレッシブレシオは、(多くの場合、指数関数的に)増加する作業要件にもかかわらず、応答を維持するための強化子の有効性を定量化する一般的に使用される方法です。このアッセイは、強化子の大きさと薬理学的操作に敏感であり、これにより強化効果および/または動機を決定することができます。また、プログレッシブレシオ強化スケジュールに対応するためのプログラムオペラントソフトウェアへの簡単なアプローチも紹介します。

ここでは、上記の手順で得られる結果の例を示します。示す第一は、ウイルスベクター（ 図3）によってトランスフェクトされた典型的な領域です。一般的に、約1 から 3mmのトランスフェクトされた体積は、線条体組織で得られます。トランスフェクトされた領域の体積は、カバリエリのメソッドを使用して、連続切片全体で定量することができる32重要なのは、トランスフェクトされたボリュームは、このようなトランスフェクトされる組織の種類など、多くの要因に依存します。ウイルス血清型;プロモーター;速度と容量注入。注入された粒子の数;注入液のpHは、およびマンニトールなど高浸透圧性試薬、かどうか、使用された。33,34は一般的に、我々は10分かけて10 12粒子/ ml、1μL/側を顕微注入すると、閉塞具を交換する7追加分前に許可します。また、注入液は、pHが8次の周りに一般的ですが、私たちはモチベーションがいずれかの導入遺伝子発現によって操作することができることを示している（ 図4）または薬理学的試薬マイクロインジェクション（ 図5）。 図4では 、我々は排他的デザイナー薬（DREADDs）によって活性化デザイナー受容体を発現しました。 DREADD受容体コード領域は、内部リボソーム侵入部位とmCitrineカセットが続きました。 mCitrineは、トランスフェクトされた細胞の便利な可視化を可能にします。 DREADDは、ヘテロ三量体Gタンパク質Gαqに結合させました。アストロサイト、28,35とDREADD自体を刺激することができるGαq結合DREADDの活性化は、クロザピン-N-オキシド（CNO、3ミリグラム/ kg、腹腔内）の全身投与により活性化することができる。14,22,36ラットはに訓練されましたレバーは、3レバー押しが60個の連続日間、毎日1時間のセッション中に飲む1のチャンスを得たエタノールの強化のために応答します。次に、ラットを禁欲を余儀なくされ、Gαq結合DREADDsは、コアアストロサイトの側坐核で発現させました。 3週間の禁欲後、自己ADMIに意欲<html> nisterエタノールがブレークポイントで測定した。核の21,27-30活性化は、コアアストロサイトを側坐核、全身CNOの投与を介して、車両に比べて禁欲後エタノール自己投与を再開するために、ラットのモチベーションを低下させました。重要なことは、CNOは、代わりにDREADDの緑色蛍光タンパク質を発現していた同じように訓練されたコホートでは効果がなかったです。 <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/53018/53018fig3.jpg" /> マイクロインジェクション、ウイルスによってトランスフェクト図3.代表腹側線条体の領域が。この画像は、核の領域が上記の方法に従うことにより、トランスフェクションしたアストロサイトを側坐核示しています。データは、著作権者の許可を得てブルら13から転載されています。詳細は、出版物および付随する補足資料に記載されています。「ブランク&gt;この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。 <img alt="図4" src="/files/ftp_upload/53018/53018fig4.jpg" /> 自己投与エタノールが核内で過剰発現された導入遺伝子を活性化することにより、減少したのラットの図4.動機は、コアアストロサイトを側坐核。ウイルスを表現するために、ウイルスのために1週間後にマイクロインジェクション可能とモチベーションがブレークポイントを経由して測定しました。導入遺伝子は、排他的デザイナー薬（DREADDs）によってデザイナー受容体活性化された表現しました。一方向ANOVA（F（2,30）= 3.29、P = 0.04）シェッフェ事後によって明らかに続いているクロザピン-N-オキシドの全身投与によるDREADDの活性化（CNO、3ミリグラム/ kg、腹腔内）大幅CNOはなく、DRの緑色蛍光タンパク質（GFP）を発現しても同様に訓練を受けたコホートでは効果がなかった車両に比べて禁欲後に自己投与エタノールにラットのモチベーションを低下させましたEADD。データは、著作権者の許可を得てブルら13から転載されています。詳細は、出版物および付随する補足資料に記載されています。 <img alt="図5" src="/files/ftp_upload/53018/53018fig5.jpg" /> 図5.ギャップ結合ブロッカーのマイクロインジェクションは、禁欲後に自己投与エタノールにラットの意欲を増加させた二つのギャップ結合ブロッカーは、自己投与エタノールへのラットの（ブレークポイントを介して測定）モチベーションに及ぼす影響について評価した：メフロキンと18- α-グリチルレチン酸（18-α）。二元配置ANOVAは、核内へのギャップ接合ブロッカーのマイクロインジェクションは、コアが禁欲（F（3,40）= 5.56、P = 0.003）の後に自己投与エタノールにラットのモチベーションを増加側坐核ことを明らかにしました。データは、著作権者の許可を得てブルら13から転載されています。詳細は同公報に記載されていますし、添付補足資料。

げっ歯類は、行動の分子基質や複雑な精神障害を調査するための適切なモデルです。覚醒しているげっ歯類の脳マイクロインジェクションは、疾患基質の解明に使用できます。効率的でカスタマイズ可能な脳マイクロインジェクション法と、モチベーションを定量化するオペラントパラダイムの実行が提示されます。

Brain microinjection can aid elucidation of the molecular substrates of complex behaviors, such as motivation. For this purpose rodents can serve as ...

本手順の目的は、カニューレおよびマイクロインジェクターを正確に作製し、マイクロインジェクションを適切に実施することです。まず、適切な長さのカニューレを作製します。次に、マイクロインジェクターを切断し、組み立てます。次に、マイクロインジェクター、チューブ、およびポンプを準備してマイクロインジェクションに備えます。最終ステップとして、マイクロインジェクションを完了し、拡散時間を設けます。最終的に、マイクロインジェクションは、適切な取り扱いを実証しながら、目的の脳領域に試薬を正確に注入するために使用されます。マイクロインジェクションの操作は、私の研究室の学生であるRyan Polandが行います。一般的に、この手法に不慣れな方は、カニューレを適切に配置し、正確な位置にマイクロインジェクションを行うために細心の注意を払い、すべてのステップにおいて十分な配慮が必要となるため、苦労することがあります。まずカニューレを準備するために、細いペンを使用してテープに15 millimeterの基準線を引きます。次に、それをガイドとして、鋭い油性マジックでカニューレチューブに15 millimeter間隔のセクションを順にマークします。次に、ロータリーツールの低速回転するカットオフディスクにチューブを接触させ、切り込みを入れます。マークした箇所でカニューレを180度回転させ、チューブの反対側にも切り込みを入れます。閉塞の原因となる可能性があるため、チューブを完全に切り離さないでください。その後、チューブを鋭角に折り曲げ、15 millimeter ごとのセクションに分割します。次に、カニューレの両端を、切り出したディスクに対して垂直になるように親指と人差し指で保持します。カニューレチューブの先端をカットオフディスクの表面に接触させながら回転させ、鈍端（ブラントチップ）を作成します。続いて、26ゲージのベベル針を用いてカニューレの両端をリーミングし、バリがすべて除去され、カニューレに閉塞がないことを確認します。オブチュレータークランプを準備するために、中型の直線型止血鉗子を使用して、カニューレのほぼ中点付近を挟みます。カニューレがベンチに対して垂直になるように、ロックした止血鉗子をベンチの上に置きます。次に、atorワイヤーの一端を、ベンチに到達するまでカニューレに挿入します。オブチュレーターとベンチの接触を維持したまま、指でワイヤーをつまんで曲げ、30度の角度にします。その後、ワイヤーをカニューレから取り出し、曲がり点から2.5 mmの位置で、小型のニッパーを使用して余分な部分を切り取ります。本手順では、マイクロインジェクターチューブの一端を、ロックしたストレート止血鉗子で垂直に保持します。チューブに張りをかけたまま止血鉗子を回転させ、止血鉗子の周りにチューブを少なくとも1回きつく巻き付けます。次に、マイクロインジェクターチューブの反対側の自由端から32 millimetersを測定し、その点を2本目の止血鉗子で垂直に把握します。チューブが切れるまで、テンションをかけたまま前後に曲げます。その後、マイクロインジェクターのチューブを点検し、両端が直線的であること、および内径に詰まりがないことを確認します。巻尺に5 mmの基準線を引き、油圧カニューレチューブに永久マーカーを用いて5 mm間隔のセクションを順次的にマークします。次に、カニューレチューブの印がついた箇所を、低速回転しているカットオフディスクに触れさせて、チューブに切り込みを入れます。次に、マイクロインジェクターのカラーチューブを鋭角に曲げ、5 mm間隔で切り分けます。各マイクロインジェクターチューブの端から約2 cmの位置に、カラーを1つずつスライドさせて装着します。マイクロインジェクターチューブの一端から5 mmの位置に、少量の瞬間接着剤を塗布します。次に、瞬間接着剤の塗布箇所を覆うようにカラーをスライドさせ、マイクロインジェクションチューブの端から1 mmの位置に配置します。その後、カラーの両端を接着剤で覆います。次に、滅菌水を満たした1 mLシリンジに26ゲージの針を取り付けます。8 cmのマイクロインジェクター用プラスチックチューブを針にスライドさせて装着させますが、その際、チューブを突き刺さないように注意してください。その後、プラスチックチューブのもう一方の端を、乾燥させたマイクロインジェクターのカラー端に被せます。水で満たされたシリンジのプランジャーを押し、開通性を確認してください。このステップでは、完成したマイクロインジェクターを、カラーとは反対側の端から15 mmの地点で95度に曲げます。次に、プラスチックチューブを70センチメートルに切り、マイクロインジェクターのカラーに差し込みます。マイクロインジェクションに向けてポンプを準備するため、チューブにマイクロインジェクション針の直径、希望する注入速度、および目標注入量を設定します。その後、正確な容量が自動的に注入されるよう、ポンプモードを「volume」に設定します。次に、ポンプのバックストップを調整し、注入量にさらに0.2 µLを加えた量までシリンジに充填できるようにします。次に、ガス密閉シリンジの先端を小型ウェーボートに入れた滅菌水に浸し、プランジャーを軽く上下に動かして内部のワイヤーを均一に潤滑させます。ポンプのバックストップまでプランジャーを引き、マイクロインジェクションニードルに水を満たします。次のスライドです。マイクロインジェクターに接続されたPE 20チューブを、滅菌水1 mLを満たしたシリンジに取り付けられた26ゲージの針に接続します。マイクロインジェクターから滅菌水を噴射し、噴霧パターンと距離を確認してください。次に、滅菌済みのマイクロインジェクターを滅菌領域に置きます。チューブを針からずらし、水が滴り落ちないよう直立させた状態で、針によって損傷した部位より下でチューブを切断します。続いて、マイクロインジェクターのシリンジプランジャーをわずかに押し出して針先に液滴を作り、水で満たしたPE 20チューブを針に差し込みます。その後、プランジャーを完全に前方に押し出してサンプルのロードに備え、マイクロインジェクター内にエタノールの痕跡が残っていないことを確認します。マイクロインジェクターの先端に形成された水滴を清潔なラボワイプで数回タッチし、設定に漏れがないかチェックしてください。次に、シリンジのプランジャーを 0.2 microliters 引き戻し、滅菌水とPE 20チューブ、および注入する溶液との間に気泡を作ります。その後、マイクロインジェクターを注入する試薬の中に浸し、シリンジのプランジャーを後端までゆっくりと引きます。動物に注入の準備をさせるため、ラットの胸を実験者の胸に押し当てて固定します。ベタジンを浸した綿棒で、カニューレ周辺を清浄します。ヘッドキャップをBetadineで3回、その後エタノールで2回スワブします。次に、充填済みのマイクロインジェクターをカニューレに挿入します。マイクロインジェクションポンプのスタートボタンを押し、気泡の動きを確認します。注入が完了したら、マイクロインジェクターをカニューレから取り外し、オブチュレーターに交換します。この図は、マイクロインジェクションされたウイルスによる側坐核アストロサイト領域へのトランスフェクションを示しており、また、側坐核で過剰発現した導入遺伝子を活性化させることで、ラットのエタノール自己投与意欲が低下したことを示しています。CNOの全身投与による側坐核アストロサイト部位のDREADD活性化は、vehicle CNOと比較して、禁酒後のラットのエタノール自己投与意欲を有意に低下させました。一方、DREADDの代わりにGFPを発現していた同等に訓練されたコホートでは、CNOは影響を与えませんでした。この手法を用いることで、脳内マイクロインジェクション用器具のカスタマイズが可能となり、実験手順の柔軟性をさらに高めることができます。この手順を実施する際は、目的とする効果を得るために、マイクロインジェクションの位置を正確に定めることが不可欠である点に注意してください。

rodent-brain-microinjection-to-study-molecular-substrates-motivated

Research

JoVE Journal

Behavior

行動

自由に動物を移動させるの異なる脳領域における細胞外神経伝達物質レベルのモニタリングは、神経伝達物質の放出と行動の間のリンク上の洞察を提供しています。および基底神経伝達を薬理学的または生理学的操作によって変更される方法については、電気化学検出と相まって生体微量透析に優れた解剖学的および化学的分解能を提供します。...

げっ歯類で存続可能な定位手術

出典: ポーランド、R. et al.動機付け行動の分子基質を研究するためのげっ歯類脳マイクロインジェクション。J. Vis.

覚醒したげっ歯類の脳への治療薬のマイクロインジェクションベースの送達

このプロトコルは、麻酔をかけたラットの標的脳領域への正確な薬物送達のための注射器の組み立てと使用を概説し、続いて記録された電気信号によるニューロン活動のモニタリングを行います。...

ラット脳における電気生理学的記録による薬物マイクロインジェクション

出典: Paolone, G., et al.げっ歯類脳におけるマイクロインジェクションのための個別化針J. Vis.

石英マイクロニードルを使用したげっ歯類脳マイクロインジェクション

マイクロRNAは、脳の構造と機能に重要な役割を持っている。ここでは、設計されたmiRNAの発現レンチウイルスの定位注射を使用して過剰発現海馬のmiRNAを強制する方法について説明します。このアプローチは、評価するための比較的急速な方法として役立つことができる...

の定位注入マイクロRNA発現マウス海馬CA1領域にレンチウイルスと行動アウトカムの評価

この記事では、マウスの脳にウイルスベクターを顕微注入すると、その後買収、絶滅と回復期を含む条件付け場所嗜好パラダイムでテストする方法を説明します。...

コカイン条件付け場所嗜好における標的遺伝子の役割を研究するためにCreリコンビナーゼを発現するウイルスベクターの定位マイクロインジェクション

ここでは、薬物のマイクロインジェクションによる脳深部構造の阻害と、同時の電気生理学的記録によるその影響のリアルタイムモニタリングという2つの機能を備えたガラスピペットを作ります。...

同時電気生理学的記録およびげっ歯類の脳における阻害剤のマイクロ注射

cDNAを発現するレンチウイルスまたはshRNAの定位注射は、マウスの特定の脳領域における遺伝子発現を調節することができます。ここでは、そのようなオープンフィールド試験（OFT）および強制水泳試験（FST）のような行動のタスク、と定位注射を結合するためのプロトコルを提示します。...

定位注入法を適用すると、動物の行動の遺伝的影響を研究するために、

我々 はラットの運動皮質の微小電極注入が即時かつ持続的な運動障害を引き起こすことを示しています。方法が提案電極注入手術と罰金または総モーター機能の運動野への注入による損傷のための潜在的な変化を明らかにする 3...

ラット皮質運動野の微小電極注入による機能的障害を評価するためにテスト行動の齧歯動物

ここでは、角度付きコロナアプローチを使用して(空間的な制限のために)困難で到達しにくい脳領域を標的にすることができる定位的手順を説明します。このプロトコルは、マウスおよびラットモデルの両方に適応可能であり、カニューレ移植およびウイルス構築物のマイクロインジェクションを含む多様な神経科学的用途に適用することができる。...

多目的神経科学技術のための適応可能な角度付き定位アプローチ

学ぼう、齧歯類の脳マイクロインジェクション技術を用いて行動の分子基質と精神疾患を研究する方法。カニューレ製作から正確な試薬投与までのプロトコルを習得し、行動神経科学の研究を前進させる実践的フレームワークを提供します。

動機付け行動の分子基質を研究するために齧歯類の脳マイクロインジェクション

さらに動画を探す