2015年9月3日
マウスの超音波発声(USV)は、年齢、性別、状態、遺伝的背景によって異なります。この2つの選択式試験では、異なる場所で同時に放送する2つの超音波エミッターを使用して、USVの異なる特性に対するマウスの認識と選好反応を評価できます。
この手順の全体的な目標は、2つの選択再生テストを使用して、マウスの超音波発声またはUSVの好みを決定することです。これは、最初にライブの個人からU SVSを記録することによって実現されます。2番目のステップは、録音された私たちとそれに応じて編集およびトリミングし、ステレオサウンドファイルを生成することです。
次に、超音波エミッターをキャリブレーションし、USVボリュームを調整します。アッテネーターとアンプを使用して、最後のステップは、対象のマウスをテストボックスに入れ、2つのサウンドファイルの再生を同時に開始することです。最終的に、行動監視により、マウスが一方の音を他の音よりも好むかどうかを明らかにすることができます。
私たちが開発したUSVエミッターは、パーティー、異なるタイプの私たちの生物学的意義など、私のスポークコミュニケーションに関する重要な質問に答えるのに役立ちます。パゾ電気トランスデューサーのような既存のデバイスに対する私たちの苛性エミッターの主な利点は、周波数応答に共振ピークがないことです。超音波ビジョンの広帯域洪水ミシシッピは、調和の歪みがなく、複雑な音響通信コースを再現するためにエミッターを使用することを可能にします。
この方法を通じて、s bsまたは男性に対する女性の反応についての洞察を提供することができます。また、母親とポップスの間、成人男性間、成人女性間など、他のタイプの社会的相互作用にも適用できます。性的に経験豊富な雄マウスと処女雌マウスの入手を開始するには、毎日膣塗抹標本を採取してesraサイクルを追跡します。
塗抹標本をギザで染色し、標準的な手順に従ってesraサイクルの表面を決定します。超音波発声を録音するには、またはUSB広告コンバーターを使用して超音波コンデンサーマイクをPCに接続します。
広告コンバーターのゲインレベルを7に設定すると、音響データを16ビットで録音できます。オーディオキャプチャソフトウェアを使用して400キロヘルツのサンプリングレートでファイルをフォーマットし、音声再生用のDAコンバーターを接続し、DAコンバーターをPCに接続し、アッテネーターを介して2つのアンプをDAコンバーターに接続し、サイドウォールに直径6cmの穴が開いた小さなケージを修理します。穴を0.5センチの金網で覆います。
寝具など、カサカサという音を発し、録音を汚染する可能性のあるものは使用しないでください。超音波マイクをメッシュで覆われた穴の横に置きます。準備ができたら。
オスのマウスと性的に成熟したメスのマウスをケージに入れます。私たち対3〜5分間録画してください。
テストボックスは、ニュートラルゾーンとルームAゲートとBゲートの3つのコンパートメントに分かれています。ニュートラルゾーンを他の部屋から分離します。A室とB室は、それぞれ4cmの穴が開いており、その端には金網で覆われています。
超音波エミッターをメッシュに当て、ゴム板で囲んで音漏れを防ぎます。部屋AとBの間の壁の両側にリードシールを配置して遮音性を確保し、再生音を作成します。以前に記録したファイルからUSBの22番目のセグメントをキャプチャします。
デジタルオーディオ編集ソフトウェアを使用して、このセグメントからバックグラウンドノイズを選択してキャプチャし、ノイズセグメントを繰り返して22番目のバックグラウンドノイズファイルを作成して2つのサウンドファイルを再生します。同時に、1 つのステレオサウンドファイルとしてエクスポートし、1 つのファイルを左耳用、もう 1 つのファイルを右耳用に書き出します。カットオフが 40 キロヘルツのハイパスフィルターを使用して、サウンドファイルをフィルタリングします。
ノイズリダクションツールを使用してノイズを減らします。後処理ソフトウェアで、ノイズリダクションプロファイルにUS VS.As が含まれていないファイルのセグメントを選択してキャプチャし、レベル40でノイズリダクションを実行して、再生中のサウンドレベルを調整します。まず、マイクを超音波エミッターから10センチ離して配置します。
再生を開始し、音圧レベルをデシベルで測定します。アッテネーターとリファイアを使用して、USVの音量を調整します。超音波エミッターによって、男性のUS vs.Recorded earlierと同じ音圧レベルに生成されます
。2つの超音波エミッターが同じ音圧レベルを示すことを確認します キャリブレーション音を使用して file 私たちの2つのストリームで構成される場合と、生成された2つの音圧レベルを同じレベルに調整します。
2つの選択肢のテストを開始するには、部屋AとBのゲートを閉じ、女性の被験者を中立ゾーンに慣れさせます。30分間、脱出を防ぐために箱をアクリル板で覆います。30分後、ボックスの上に取り付けられたビデオカメラを使用して、手順全体を録画します。
ゲートを取り外し、女性がサウンドゾーンを含むテストボックスの残りの部分を自由に探索できるようにします。女性が両方のメッシュサークルを調査し、ニュートラルゾーンに戻ったら、前に準備した22番目のサウンドファイルの再生を開始します。サウンドファイルを繰り返し再生しながら、動物の行動を5〜10分間監視します。
超音波エミッターの位置をランダムに切り替えて、2つの部屋の間にサイドバイアスが生じないようにします。雌マウスは、音を再生する前に部屋を探索することを許可された場合、部屋AとBの間の好みを示さなかった。部屋への入場数は、バックグラウンドノイズを含むチャンバー間または男性のUSと男性の間で類似
していましたが、被験者はusと再生されたチャンバーでかなり長い時間を過ごしました。特に最初の5分間は。ミドルゾーンの探索は、サウンド再生によって変更されませんでした。
女性は、サウンドゾーン内で、チャンバー内の金網を探索する時間が大幅に長くなり、男性のUS対特に最初の5分間は、Bシックスとバブの両方を演じました。女性は、オスとペアになった側と別の系統の側を調査するのにより多くの時間を費やしました。
このビデオを見た後、開発後の2つの選択肢のフレーバーテストを使用してマウスのスプレーの好みを決定する方法をよく理解しているはずです。この手法は、この分野の研究者やブランド研究が健全な人間の相互作用を探求する道を開きました。USVは、年齢、性別、遺伝的背景によって異なる必要があります。
この手順に従って、トランスジェニック質量のUSBプロファイルを測定し、送信USBと保存USBが変更されたかどうかを判断できます。
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本研究では、マウスの超音波発声(USV)について、年齢、性別、遺伝的背景などのさまざまな要因に基づく好みに焦点を当てて調査します。マウスが異なるUSV特性に対してどのような認識および好みの反応を示すかを評価するために、2肢選択再生テストを用います。
マウスにおける超音波発声(USV)の好みを理解することは、神経精神疾患モデルに関連する社会的コミュニケーション表現型を評価するための行動学的指標となります。この2者択一の再生テストにより、聴覚的な好みと識別能の定量的な測定が可能になり、遺伝学的または薬理学的な操作を社会的顕著性処理の測定可能な変化に結びつけることで、中枢神経系(CNS)創薬におけるターゲットバリデーションを支援します。本手法は、社会的モチベーション、不安、または報酬経路を調節する化合物を評価するためのトランスレーショナルなアッセイを提供し、メカニズム的なリスク低減に寄与します。
この手法は、標的仮説の検証からリード化合物の同定に至るディスカバリー・コンティニュアム(創薬探索の流れ)に適合しており、分子操作と社会行動領域における機能的アウトプットとの間の行動学的橋渡しを可能にします。