Name: 人間外側広筋骨格筋生検 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 16 s
Description: 学ぶ外側広筋の経皮的筋生検法。Weil-Blakesleyコンコトームを用いて、組織化学と分子解析に十分な組織を最小限の侵襲で採取する安全で許容性の高い技術です。臨床および研究現場で応用可能です。

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私たちは、この作業を可能にしてくださった研究参加者に感謝したいと思います。また、NIHRサウサンプトン生物医学研究センターとウェルカムトラスト臨床研究施設、サウサンプトン大学病院のスタッフには、研究測定の支援をしていただきたいと思います。
この作業は、NIHRサウサンプトン生物医学研究センター、栄養学、MRCライフコース疫学ユニット、サウサンプトン大学の支援を受けました。このレポートは、NIHR BRC Funding Schemeによる独立した調査です。この出版物で表明された見解は著者のものであり、必ずしもNHS、NIHR、または保健省の見解ではありません。AMBはNIHR臨床研究フェローシップによってサポートされており、HPPはNIHRサウサンプトン生物医学研究センターによってサポートされています。

倫理の声明：我々は我々の施設内に従う筋生検手順の説明は、現在次の。筋生検手順は、ハートフォードシャー州調査委員会番号07 / Q0204 / 68によって承認されたハートフォードシャー州サルコペニア研究で使用されています。すべての参加者は書面によるインフォームドコンセント20を与えました。 注：単一のオペレータは、不安を軽減し、彼らはすべての回で快適であることを確実にするために、会話の中で参加者を従事することができアシスタントによって助け手順を実行することができます。処置室は、シンク、高さ調節可能なソファ、清浄な表面と手順トロリーに装備する必要があります。 1.参加者を準備します（図2） <ol><li>ソファの上に仰向け、快適に配置するために参加者を確認して下さい。鼠径部の折り目から優先太ももを公開します。露出した太ももの下に使い捨て吸収性シートを広げます。脚は手順を通してまっすぐでリラックスしたままであることを確認しますが、太ももは、 外側広筋の概要を説明するために一時的に緊張されています。 </li><li>マーク約2/3膝蓋骨に前腸骨棘から仮想線ダウン手順サイト。 </li></ol> 2.スキンを準備し（図2） <ol><li>無菌のシェービング刃で提案された生検部位を囲む直径約4 cmの皮膚を剃るとアルコール綿で皮膚をきれいに。 注：これは、治癒過程中の創傷における後続の毛捕捉を防止するためです。このステップは、操作者の好みに応じて任意です。 </li><li>局所麻酔薬で皮膚と上に筋膜を潜入。その後、23 G針で皮下組織に深く浸透し、2％のリドカインの皮下ブレブを上げるために25 G針を使用してください。生検部位での皮下組織含有量に応じて1インチに少なくとも半分に浸透することを目指しています。この深さは、上にFASを確実にするために十分であるべきですCIAは麻酔されています。アクションへの麻酔薬のために5分 - 2を許可します。針または手術用メスの刃の先端で軽く肌をプロービングすることによって麻酔を確認してください。 </li></ol> 3.滅菌野を準備します（図2） <ol><li>石鹸で手を洗い、滅菌ガウンを着用されるまで、清潔な手を維持します。手順トロリーに滅菌フィールドを作成する前に滅菌手袋と手をカバーしています。 </li><li> 2％クロルヘキシジン/イソプロピルアルコール溶液またはヨウ素ベースの皮膚の消毒剤と生検部位を滅菌します。生検部位を露出させるだけでなく、無菌領域を維持するために、接着剤開口部と滅菌ドレープを適用します。 </li></ol> 4.手順を実行します（図2） <ol><li>ダウンとその上の筋膜を介して、皮膚上の10ミリメートルの切開 - サイズ11メスで、5を作ります。深さ平均の半分に1インチに、大腿骨の長軸に対して直角に切開を通してconchotomeの閉じた痛烈な先端を挿入します。必要な使用している場合conchotomeの先端は、筋肉内に開閉される一方で、生検部位の周囲の大腿部を保持し、サポートするために、フリーハンド。 </li><li>筋肉をカットして180° - 90を介してconchotomeを回転させます。 conchotomeを撤回し、無菌生理食塩水によって減衰滅菌ガーゼ上に先端を開きます。必要に応じて十分な筋肉組織を得るために、単一の創傷部位内の手順を繰り返します。氷の上に置かれた容器の中にガーゼを転送します。地元の機関のプロトコルに従って筋肉を処理するための準備室にコンテナを転送します。 </li></ol> 5.ポスト​​手順（図2） <ol><li>最大5分間創傷に直接圧力を適用します。直角とは対照的にsteriストリップが誤って削除された場合、潜在的に瘢痕組織を除去し、傷を再び開く回避するために、創傷に平行に配置してsteri-ストリップで傷口を閉じます。 steriストリップに滅菌吸収性包帯を置き、二層を結びます圧縮のために包帯やテープで固定します。 </li><li> 4日手順の後 - 彼らは3ドレッシングの変更を実行する必要がありますよう参加者に創傷ドレッシング方法を説明します。参加者は後でその夜寝る前に圧迫包帯を削除していることを確認してください。 </li></ol> 6.ポスト生検を見ます<ol><li>穏やかな運動（ 例えば 、歩行）によって緩和することができるいくつかの太ももの剛性を体験することが一般的であることを参加者に通知します。アセトアミノフェンなどの単純な鎮痛を使用してください。 2週間まで持続し得る生検部位の周りの過渡しびれだけでなく、創傷感染の潜在的な合併症についての参加者を警告します。 </li></ol>件名POST手順7.手順<ol><li> （このような登山、ランニング、重い物を持ち上げるように）72時間精力的な活動を避けるために、参加者を確認して下さい。 72時間 - 48水に浸漬を避けるために、参加者を確認して下さい。しかし、participanを指示ドレッシングの乾燥を保つためにシャワーを有するときに生検部位の周りにラップフィルムまたは類似をラップするトン。 </li><li> 4日と1週間後steriストリップを削除 - 3の後にドレッシングを変更するには、参加者を確認して下さい。 注：参加者は、ポスト生検ケアのための説明書、予備のドレッシングや手順を実行を担当するチームの緊急連絡先の詳細を与えられるべきです。 </li></ol>

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誰も宣言しませんでした。

参加者の安全を確保し、効率的に筋生検を行うためには、プロトコル内の重要なステップに注意を払うことが重要です。 参加者は慎重に、このような出血や創傷治癒不良などの合併症を避けるために除外基準を考慮した後に選択する必要があります。手順全体で厳格な無菌状態が不可欠です。正しい技術の適用は、参加者の快適性を確保参加者の組織に不要な外傷を最小化し、分析のために十分なサンプル収量が可能になります。時々、参加者が過剰な皮下脂肪組織を有している場合は特に、筋肉サンプルを得ることが困難となります。過剰な出血があっても手順を続行するという決定がなされるべきで、その場合には、参加者を慎重に選択した後に発生する可能性があります。最大5分間の創傷部位への直接の圧力が止血を奨励し、あざを最小化する必要があるかもしれません。出血を最小限にする別の方法はです地元の血管収縮を引き起こしますエピネフリンとリドカインを使用します。しかし、エピネフリンは、その後の分析を妨害し得ると注意を使用する必要があります。この手順の間にエピネフリンを使用しない作者の好みです。 ...

ミオパシーおよび他の神経筋変性疾患の診断のための骨格筋を取得することは許容され、患者1に無能力化されない安全で効率的な方法に依存しています。歴史的に、分析のための筋肉組織を得る方法は、全身麻酔下または死後から実行オープン生検が含まれていました。これらの技術は、筋肉の直接可視化を可能にし、筋肉の大きい作品は生検することが許可しました。これらの技術は入院と回復の点で患者に持っている潜在的な欠点を考えると、経皮的な「セミオープン」筋生検法は、代替として導入されました。この技術は、最初にトロカール自己構築針を使用し、全身麻酔2せずに生体からの筋肉サンプルを得ることができたデュシェンヌ（1806から1875）により行いました。その後、生検針の様々な形態は、3,4,5使用されています。しかし、生検nは1962年にバーグストロムによって開発eedleは、最も一般的に臨床で使用されています。両方の子供と大人でだけでなく、研究6,7,8,9,10インチこれは、組織のポスト生検を追放するために鋭利なトロカール、切断カニューレとプッシュロッドを有しています。この手順から得られた筋肉の収率は繰り返しサンプリング11,9後25 -293ミリグラムの範囲であると報告されています。 Henrikssonは、代替セミオープン筋生検法（ 図1）12として1979年にワイル・ブレークスリーのconchotomeを導入しました。機器はバーグストロムとは異なり、単一の構造の構築であり、シャープな痛烈な先端を有する鉗子のように設計されています。チップサイズを4mmの幅が6mmの範囲であることができます。痛烈な先端の2つの縁部が反対した場合、中空は筋肉のキャプチャを確実に形成されています。 conchotome 5を通って挿入される - 10mMの皮膚切開とscalpeなどの筋肉とその上の筋膜を貫通するためのトロカールのための必要性を回避しますLは、筋肉への追跡を行うために使用することができます。 この方法は、操作性13,14度の高い組織浸透を制御することができます。これは、過度の圧力が潜在的に神経血管または基礎骨構造などを破損する恐れがあります。、前脛骨15,14の部位でのサイトのために特に有用です。 conchotomeを使用して、筋肉の収率が可変することができ、私たちの実際に20 - 筋の200 mgを繰り返しサンプリングした後に得られています。ベルイストロームの針の上conchotomeの1つの潜在的な利点は、それが提供する機動性の高い程度に加えて、痛烈な先端が先鋭化やバーグストロムのトロカール16を構築ほど頻繁に交換する必要がないことです。 ワイルブレークスリーのconchotomeを使用して、筋生検の全体的な目標は、診断およびresearの両方のための組織化学および分子分析を可能にするために筋肉組織の十分な量を得ることですchの研究。これは、簡単に学ぶことができる簡単で安全な手技です。この技術では、生検に適した筋肉は上腕二頭筋、三頭筋、三角筋、腓腹筋、前脛骨筋、ヒラメ筋とsacrospinals 17,15,7,18,14が含まれています。それは太もも内の主な神経血管構造を回避するように外側広筋の最も外側の部分は、生検のために使用される最も一般的なサイトです。これは、上前腸骨棘と膝蓋骨を結合する仮想線の下の約3分の2に識別されます。筋肉形状データは、 広筋由来例myofibreエリア、myofibre比率、毛細血管密度のためのサンプリングは研究11,19間の比較を可能にする文献で ​​広く入手可能である外側の 。

<table><tbody><tr><td>Weil-Blakesley conchotome</td><td>Gebr&uuml;der Zepf Medizintechnik, D&uuml;rbheim, ドイツ</td><td>なし</td><td>6 mm 噛む先端</td></tr><tr><td>5 ml 2% リドカイン</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td>5 ml バイアル 1 本で十分な麻酔</td></tr><tr><td>アルコール綿棒</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>5 ml シリンジ</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>25 G および 23 G 滅菌針</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>滅菌メス サイズ 11</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>滅菌ガーゼ 正方形</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>塩化ナトリウム 0.9% 10 ml</td><td>ファニン</td><td>1122/002/001</td><td></td></tr><tr><td>ステリ・ドレープ&trade;接着剤開口部付き小型ドレープ</td><td>3M</td><td>1020</td><td></td></tr><tr><td>ChloraPrep 2% w/v /70% v/v 皮膚液&nbsp;</td><td>CareFusion</td><td>270400</td><td>Two</td></tr><tr><td>Steri-Strip&trade; 1/4 インチ x 3 インチ 強化接着スキン クロージャー</td><td>3M</td><td>R1541</td><td></td></tr><tr><td>PRIMAPORE 滅菌ドレッシング 15 cm x 8 cm</td><td>スミス &&nbsp; 甥</td><td>66000318</td><td></td></tr><tr><td>コットンちりめん包帯 ホスピクレープ 233 7,5 cm x 4,5 m</td><td>ハルトマン</td><td>915562</td><td></td></tr><tr><td>フレキシブルな凝集性包帯 Co-Plus LF</td><td>BSN 医療用</td><td>2904565</td><td></td></tr><tr><td>使い捨て吸収シート</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>マイクロポアまたはトランスポアテープ</td><td>ジェネリック使用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>滅菌紙付き滅菌ガウンタオル</td><td>汎用</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>滅菌手袋</td><td>汎用</td><td>なし</td><td></td></tr></tbody></table>

人間<em&gt;外側広筋</emワイル・ブレークスリーconchotomeを使用&gt;骨格筋生検

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

ワイル・ブレークスリーのconchotomeを使用して、経皮的筋生検はよく両方の臨床と研究の実践において確立されています。それは、安全で効果的かつ良好な忍容手法です。 6ミリメートル幅の広い中空 - ワイル・ブレークスリーのconchotomeは4シャープな痛烈な先端を有します。これは、5を通って挿入される - 10mMの皮膚切開と制御組織浸透のために操作することができます。先端が開閉組織内に、次に筋肉を切断する90 -180°回転されます。繰り返しサンプリング後に得られた筋肉の量は、20mgのから組織学および分子生物学的研究の両方のために処理することができる290 mgまで変化させることができます。傷は活動の正常レベルは、手順の直後に再起動することができますが、約72時間の最小に抑え、乾燥し、活発な身体活動を保つ必要があります。細心の注意を被験者、完全な無菌状態とポスト手続きのケアの選択に支払わされている場合、この手順は、安全かつ効果的です。左右両方Vastusの外側のは、参加者の好みに応じて生検に適しています。

上記の手順は、両方の臨床と研究の設定において安全かつ許容可能です。生検が診断プロセスの一部として実行されると、筋肉が患者の症状や筋力低下の兆候に応じて選択すべきです。生検部位は、前の傷害、拘縮または計測21,1から自由でなければなりません。研究では、糖尿病患者の空腹時又は除外のような標準化された条件は、19を必要とすることができます。ワルファリンなどの抗凝固薬を中止し、凝固時間は、処置の前にチェックする必要があります。我々の経験は、それが著しく過剰出血22のリスクを増加させないとおり75mgの用量での単純なアスピリンを継続することができます。また、考慮すべきことは、創傷治癒を損なう薬を服用参加者に与えられるべきです。基本的に、薬を停止するリスクは、それぞれの手順の利点と比較検討する必要があります場合。参加者の選択時には、局所麻酔剤、ヨウ素/クロルヘキシジンおよび創傷被覆材への潜在的なアレルギーの詳細な履歴を取得し、必要に応じて使用する代替されるべきです。参加者は、皮膚の増加発赤、地元の腫れや水疱として現れる...

このビデオは、Weil-Blakesleyコンコトームを使用して、ヒトの外側広筋の経皮的筋生検の技術を示しています。

人間<em&gt;外側広筋</emワイル・ブレークスリーConchotomeを使用&gt;骨格筋生検

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

この方法の全体的な目標は、診断研究と研究研究の両方で組織化学および分子分析に十分な組織を得るために、外側広筋の筋生検の安全で効果的で忍容性の高い技術を導入することです。この方法は、研究者が参加者の不快感や外傷を最小限に抑えて十分な筋肉組織を取得するのに役立ちます。この技術の主な利点は、臨床と研究の両方の環境で安全で受け入れられることです。合併症は低く、標準的な技術を使用して手順を実行する場合、不快感は最小限に抑えられます。まず、参加者に仰臥位でソファに快適に横になるように依頼します。鼠径部のしわから好みの太ももを露出させ、露出した太ももの下に使い捨ての吸収シートを広げます。手術中は脚がまっすぐでリラックスしたままであることを確認してくださいが、大腿部は一時的に緊張して外側広筋の輪郭を描きます。前上腸骨棘から膝蓋骨までの想像上の線の約2/3下に処置部位をマークします。皮膚を準備するには、滅菌シェービングブレードを使用して、必要に応じて、提案された生検部位の周囲の直径約4センチメートルを剃ります。アルコール綿棒を使用して皮膚をきれいにします。局所麻酔薬を使用して皮膚とその上にある筋膜に浸潤し、次に25ゲージの針で2%リドカインの皮下ブブレを上げます。.次に、23ゲージの針を使用して皮下組織のより深く浸潤し、生検部位の皮下内容物にもよりますが、少なくとも1インチあたり1/2の浸透を目指します。麻酔が作用するまで2〜5分待ち、針またはメスの刃先を使用して皮膚を優しく探り、麻酔を確認します。滅菌フィールドを準備するには、石鹸と水で手を洗い、滅菌ガウンを着用するまで清潔な手を保ちます。手技用トロリーに滅菌フィールドを作成する前に、滅菌手袋で手を覆ってください。2%クロルヘキシジンイソプロピルアルコール溶液、またはヨウ素ベースの皮膚消毒剤を使用して、生検部位を滅菌します。接着開口部付きの滅菌ドレープを適用して、生検部位を露出させ、滅菌フィールドを維持します。最初の重要なステップは、皮膚に穴を開け、筋膜の内外に十分に深いトラックを作ることです。生検手順を実行するには、サイズ11のメスを使用して、皮膚に5〜10ミリメートルの切開を行い、その上にある筋膜を通して挿入します。生検部位を囲む大腿部を保持および支えながら、貝殻の閉じた噛み込み先端を切開部を通して、大腿骨の長軸に対して直角に、約1/2〜1インチの深さで挿入します。次に、コンチョトームを90度から180度回転させて筋肉を切断し、コンチョトームを引き抜いて、滅菌生理食塩水で湿らせた滅菌ガーゼに先端を開きます。ガーゼを氷の上に置いた容器に移します。2番目の重要なステップは、トラック内にコンチョトームを挿入し、十分な筋肉が得られるようにコンチョトームを操作することです。必要に応じて、トラック内で手順を繰り返し、単一の創傷部位で

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このビデオの目的は、人間の被験者に対する改良されたBergström骨格筋生検技術を紹介することです。...

変更されたベルイストローム法を用いたヒト骨格筋生検手順

ヒトの筋肉に由来する主な接着細胞タイプは、筋原性細胞と線維芽細胞です。ここでは、CD56抗原に基づく磁気活性化細胞ソーティングを用いて細胞集団を濃縮します。その後、特異的抗体による免疫標識と画像解析技術の使用により、個々の細胞の細胞質および核特性を定量化できます。...

ヒト骨格筋からの一次筋原細胞および線維芽細胞の単離および定量的免疫組織化学的特性評価

広筋のヘイケボタルの生検、精製されたミトコンドリアの準備、および呼吸計測プロファイリングのための方法が記載されている。小さな筋肉量の使用は、臨床研究用途のためにこの技術に適しています。...

経皮針生検によって得られた骨格筋組織から単離されたミトコンドリアの調製と呼吸計測評価

ここでは、実験用マウスから後肢の長骨(大腿骨と脛骨)を解剖するためのプロトコルを提示します。さらに、骨髄空間から骨髄を除去するために遠心分離を利用する、これらの骨からの骨髄分離のための迅速な技術について説明します。...

マウス後肢長骨解剖や骨髄の単離

(3DUS) 3 D 超音波により筋骨格系組織の迅速かつコスト効果の高い計測ができます。3DUS...

3 D の超音波画像診断: 筋骨格系組織の迅速かつコスト効果の高い計測

骨格筋線維タイプの新式の識別子として浮上している免疫組織化学的染色ミオシン重鎖アイソ フォームの (すなわち、タイプ I、IIA を入力、IIX を入力、IIB を入力)。ここでは、繊維の種類や繊維の形態の迅速な評価を容易にする新しい半自動アルゴリズムとともに汚損のプロトコルを提案する.

マウス骨格筋形態と繊維の種類組成の半自動解析

マウスの骨格筋を用いて小角X線回折実験を行うための詳細なプロトコルを提示する。ヒト疾患のトランスジェニックマウスモデルの広い可用性により、この実験プラットフォームは、遺伝的筋肉疾患の構造的基盤を解明するための有用な試験ベッドを形成することができます...

筋肉疾患の構造的基礎を研究するためのツールとしての無傷のマウス骨格筋のX線回折

骨格筋生検組織から得られたヒト原発性筋前駆細胞(hMpAc)を分離、培養、特徴付け、分化する技術を提示する。これらの方法によって得られ、特徴付けられたhMpPCは、その後、ヒトの筋形成および骨格筋再生に関連する研究の質問に対処するために使用することができる。...

骨格筋生検手順からのヒト筋前駆細胞の単離、培養、特徴付け、分化

ここで説明するプロトコルは、筋凍結切片における壊死性筋線維の直接免疫標識のためのプロトコルである。壊死細胞は、免疫グロブリンG(IgG)を含む血清タンパク質に透過性である。ミオファイバーによるIgGの取り込みを明らかにすることで、筋肉の状態に関係なく壊死を起こす筋線維の同定と定量を可能にする。...

筋生検における免疫標識筋線維変性

この技術報告書は、繊維損傷を制限する筋液脛節前部の生検のための修正されたベルクストローム技術のバリエーションを説明している。...

機械評価のためのヒト筋学の上室から骨格筋生検の収集

このプロトコルは、機械的剥離、酵素解離、ろ過、および示差超遠心分離を通じて、げっ歯類の筋肉組織から骨格筋間質細胞外小胞(SkM-EV)を分離および精製することを目的としています。一貫性と信頼性を示しています。単離されたSkM-EVは、筋肉の恒常性と疾患に関する洞察を提供し、診断バイオマーカーや治療手段としての応用が期待できます。...

骨格筋間質細胞外小胞の酵素的単離

学ぶ外側広筋の経皮的筋生検法。Weil-Blakesleyコンコトームを用いて、組織化学と分子解析に十分な組織を最小限の侵襲で採取する安全で許容性の高い技術です。臨床および研究現場で応用可能です。

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