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DOI: 10.3791/53303-v
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このプロトコルは、子宮内エレクトロポレーションを介してC57BL/6中枢神経系の異なる領域を特異的にトランスフェクションする方法を詳細に説明しています。このプロトコルには、皮質、海馬、視床、視床下部、外側中隔核、線条体に発達する領域のトランスフェクションに関する詳細な指示が含まれています。
このin vivo細胞操作の全体的な目標は、マウス様皮質、海馬、視床、視床下部、外側中隔核、および線条体の中枢神経系の特定の領域の細胞を特異的に改変することです。この方法は、例えば、さまざまなシグナル伝達カスケードの同定や細胞分化レベルの決定などを通じて、脳の発達と機能に関する重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、時間のかかる遺伝子改変マウスの生成なしに、中枢神経系のさまざまな細胞タイプを迅速かつ効率的に操作できることです。
一般的に、この方法のデモンストレーションは役に立ちます、なぜなら、この方法に不慣れな個人は、特定のエレクトロポレーションにとって重要な適切な電極位置を見つけるのに苦労することが多いからです。この手順を開始するには、麻酔をかけた妊娠中のマウスの腹腔をメスで切り開きます。開いた腹腔が乾燥するのを防ぐには、0.9%温かいメチルアルコール生理食塩水で湿らせます。.
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