C-FOSタンパク質免疫組織学的検出：特定の生理反応に関与する中央経路のマーカーとして有用ツール

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2016年4月25日

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2016年4月25日

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Anne-Sophie Perrin-Terrin¹^,² , Florine Jeton¹^,³ , Aurelien Pichon¹^,³^,⁴ , Alain Frugière² , Jean-Paul Richalet¹^,³ , Laurence Bodineau² , Nicolas Voituron¹^,³

¹Sorbonne Paris Cité, Laboratory “Hypoxia & Lung” EA2363, University Paris 13, ²UPMC Univ Paris 06, INSERM, UMR_S1158 Neurophysiologie Respiratoire Expérimentale et Clinique, Sorbonne Universités, ³Laboratory of Excellence GR-Ex, ⁴Laboratory MOVE (EA 6314), University of Poitiers

ここでは、in vivoおよびex vivoの特定の生理学的応答に関与するニューロン集団の同定に使用される古典的な技術であるc-FOSタンパク質免疫組織学的検出に基づくプロトコルを紹介します。

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c-FOS免疫組織化学的検出

脳幹ニューロン活性

低酸素高二酸化炭素刺激

免疫組織化学プロトコール

ニューロン経路マッピング

脳組織切片作成

DABニッケル染色

アビジン・ビオチン複合体

ペルオキシダーゼ抑制

ヤギ血清ブロッキング

Chapters in this video

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タイトル

0:44

1日目：内因性ペルオキシダーゼ活性の除去、非特異的結合部位のブロックおよび一次抗体によるインキュベーション

1:44

3日目：二次抗体によるインキュベーションおよび呈色反応の開発

3:21

サンプルの封入

4:16

結果：対照群マウスおよびin vivoで低酸素状態に置かれたマウスの延髄切片におけるc-FOS陽性ニューロン

5:17

結論

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