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核小体クロマチン組織に基づいてマウス洞卵母細胞の単離とキャラクタリゼーション
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JoVE Journal Developmental Biology
Isolation and Characterization of Mouse Antral Oocytes Based on Nucleolar Chromatin Organization

核小体クロマチン組織に基づいてマウス洞卵母細胞の単離とキャラクタリゼーション

Full Text
14,085 Views
07:16 min
January 7, 2016

DOI: 10.3791/53616-v

Manuela Monti1, Carlo Alberto Redi1,2

1Research Center for Regenerative Medicine,Fondazione IRCCS Policlinico San Matteo, 2Department of Biology and Biotechnology "L. Spallanzani",University of Pavia

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、核小体の組織に基づいて、マウス胞状卵母細胞の特徴付けのためのプロトコルを提示します。

この手順の全体的な目標は、将来の胚発生を完全に維持する能力に応じて、クロマチン組織に基づいてマウス胞子卵子を特徴付けるために必要なすべてのステップを詳述することです。この方法は、哺乳類の卵巣の胞状コンパートメントに存在する2種類の胞状卵子、SN(囲まれた核小体)とNSN(非囲まれた核小体)を区別して分離する方法など、発生生物学の分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。卵巣を採取するには、まず生後3〜6週齢の雌マウスIPに2.5国際単位の妊娠牝馬血清ゴナドトロピンを注射します。

2日後、収穫の約1時間前に、滅菌シャーレ1枚にM2培地を入れ、2枚目のシャーレに20ミリリットル滴のM2培地を数滴加え、各滴を1.5ミリリットルの鉱油で覆います。次に、すべてのペトリ皿を摂氏37度、二酸化炭素5%のインキュベーターに移して、培地を平衡化させます。次に、滅菌解剖ハサミを使用して腹壁を覆う皮膚を切開し、続いて最初にホルモンを注射したマウスの腹膜を切開します。

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