Name: ブタモデルにおける異自家腎移植：ステップバイステップのプロトコル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-21T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 47 s
Description: 学ぶブタモデルにおける異自家腎移植の手術手順。HTK溶液を用いた腎臓摘出・保存、血管吻合術、尿管吻合術の詳細なステップを解説。移植後の腎機能評価と組織学的検査による妥当性も示す。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Sorin Group(イタリア、ミラノ)、XVIVO Perfusion Inc.(スウェーデン、ヨーテボリ)、Braun AG(ドイツ、メルズンゲン)の支援に感謝します。ジョン・デイビッド・アンド・シグニー・イートン財団のご支援に深く感謝いたします。

すべての動物は、人道的なケアを受け、すべての研究私たちは動物管理上のカナダの評議会の方針やガイドラインに従って行います。すべての手順は、大学健康ネットワーク施設内動物管理委員会によって承認された動物の使用プロトコル下で行いました。 注：試験プロトコールの概略を図1に示されています。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig1.jpg" /> 図1.研究プロトコル。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 1.動物<ol><li>このプロトコルで男性のヨークシャーブタ（30キロ）を使用します。 </li></ol> 2.腎移植検索<ol><li>術前の手順<ol><li>ハウスオスYorkshirそれらを慣らすために、少なくとも1週間のための研究施設での電子豚。 ストレプトコッカス・スイス（Streptococcus suis）やサルモネラ菌による感染の潜在的なリスクを軽減するために3日間、このようなセフチオフルとして、第三世代セファロスポリンの筋肉内注射を使用してください。誤嚥を防ぐために麻酔の導入前に、6時間の最小値のための豚を速いです。 </li><li>ケタミン（20 mgの/ kg）を、アトロピン（0.04ミリグラム/キログラム）、及びミダゾラム（0.3ミリグラム/キログラム）の筋肉内注射により豚の麻酔を開始します。その後、手術室（OR）に収容施設から動物を輸送します。 </li><li> ORのテーブルの上に仰臥位で豚を置きます。豚が自発的にイソフルランの5％と酸素の2 Lを呼吸することを可能にします。喉頭鏡で声帯を公開し、挿管誘発性喉頭痙攣を防ぐために2％リドカイン局所用溶液でそれらをスプレー。 6.5ミリメートル管と挿管後、空気3〜5 mlのカフをブロックします。 注：カプノメトリが正しいpositioを確認します気管チューブのn個。 </li><li> 2.5パーセントにイソフルランガスを減少させます。 14-16呼吸/分、10〜15ミリリットル/ kg体重一回換気量に人工呼吸器を設定します。密接に豚を監視します。心拍数および酸素飽和度は、パルスオキシメトリによって記録されます。減少した（150拍/分以下）心拍数と血圧（100 mmHgの収縮期値以下）だけでなく、ブタの動きの欠如（筋弛緩剤の無使用）によ​​り、適切な麻酔を確認してください。 </li><li>無菌条件下で、9.5神父を紹介セルジンガー法27を用いて、内頸静脈へのシングルルーメン永久カテーテル。簡単に言えば、静脈を穿刺するために針を使用しています。ガイドワイヤを導入した後、血管カテーテルとワイヤの交換が続くピールアウェイイントロデューサ針を交換してください。 3-0シルクまたは非吸収性モノフィラメント縫合糸を使用して皮膚にカテーテルを修正しました。 <ol><li>メトロニダゾール500mgの、セファゾリンの1グラム、およびパントプラゾール20mgを投与します。広告大臣5％デキストロース（D5W）および静脈内手術を通して、毎時1ミリリットルのフェンタニルクエン酸と乳酸リンゲル液の200ミリリットル。麻酔下ながら乾燥を防ぐために、目に獣医の眼軟膏を適用します。 </li></ol></li></ol></li><li>外科手術<ol><li>滅菌消毒や手術野の報道に続いて、長さ25cmの正中切開を行います。開創器を挿入します。タオルで大小の腸を覆い、右の腎臓への最適なアクセスのために左側にそれらを配置します。 </li><li>焼灼を使用して、任意の付着組織から尿管と右腎自身を解放します。 </li><li>下大静脈と大動脈からその起源までメスを使用して、右腎静脈と動脈を解剖、それぞれ、自由です。動脈血管攣縮を回避するために、パパベリンの30〜65 mgの投与を考慮すべきです。 </li><li>完全な腎解剖、ネクタイ（シルク、3-0）の後および遠位尿管を切りました。 Prepar氷のEAボウルと滅菌オルガンバッグ。 </li><li>まず、血管クランプを使用して、大静脈に近い腎静脈をクランプ、大動脈および第二の近くに腎動脈をクランプします。次に、腎臓移植片を切除し、直ちに腎動脈カニューレと腎動脈にカニューレを挿入。血液を洗い流すために氷のように冷たいヒスチジン - トリプトファン - ケトグルタル酸（HTK）溶液500mlを使用してください。移植まで氷上に腎臓を保管してください。 </li><li> その場では 、結紮糸（絹、2-0）と連続縫合（プロレン、6-0）で腎静脈と残りの腎動脈を閉じます。 </li><li>出血のための解剖エリアを確認した後、実行している縫合糸（モノフィラメント、1）及び3-0絹または非吸収性モノフィラメント縫合糸で皮膚と腹壁を閉じます.. </li></ol></li><li>術後の手順<ol><li>それは、不要な操作を防止するために、豚の背中に静脈カテーテルの縫合糸（絹、3-0）を皮下トンネルを修正しました。発生しやすい豚を配置した後、Suture（シルク、3-0）皮膚にしっかりとカテーテル。 </li><li>人工呼吸器から豚を離乳させると、それは抜管後の住宅地で回復しましょう​​。体積膨張のために静脈内に乳酸リンゲル液を投与し、鎮痛のために0.3 mgのブプレノルフィンを管理します。それは胸骨横臥位を維持するのに十分な意識を取り戻したまで無人の動物を放置しないでください。 </li></ol></li></ol> 3.腎移植移植<ol><li>術前の手順<ol><li> 50-100ミリグラム/時間の速度でプロポフォールの連続注入に続いて、プロポフォールの静脈内注射（1-2 mg / kg体重）を使用して豚を麻酔。ステップ2.1.3と2.1.4で説明したように豚を再挿管と3から4パーセントにイソフルランガスを設定します。 </li><li> 2.1.4に記載したのと同じ麻酔プロトコルを使用し、手術の間、セファゾリン1g及びパントプラゾールIV 20mgを投与します。 </li><li>滅菌消毒した後、気管の横4センチメートルのカットを行います。 TIを解剖頸動脈を露出させるssue。動脈の周りにオーバーホルト鉗子や絹のネクタイ（2-0）を渡します。継続的に手術全体の動脈圧を測定するためにプラスチック製のカテーテルを導入するためにセルジンガー法を使用してください。あるいは、非侵襲的な血圧測定技術を利用することができます。 </li></ol></li><li>外科手術<ol><li>滅菌消毒した後、皮膚および筋膜縫合糸のステッチを切断することにより腹腔を再度開き、腹腔を露出させ、そして腎臓下の血管へのより良いアクセスを許可するように左側に腸を再配置する手術用開創を再導入。 </li><li>腎臓下の大静脈と大動脈に保存腎移植端側を移植。したがって、5-8以上のcmのピックアップや焼灼を使用して、腸骨分岐の上大静脈と大動脈を解剖。可能な場合は、リンパ管を邪魔しません。可能でない場合は、5-0プロレン縫合糸でそれらを閉じます。 </li><li>解剖を完了した後、foをチェック出血Rおよび血管から残りの組織を除去します。 Satinskyクランプと大静脈と大動脈の完全なクランプが実現可能であることを確認してください。 </li><li>次に、対側（左）の腎臓を切除。これを行うには、右に腸を配置。尿管、腎臓自体、腎静脈、および付着組織から腎動脈を解剖。尿管や血管を結ぶと腎臓を切除。出血を確認してください。 </li><li>腎臓下の大動脈と大静脈を露出するために左に腸を再配置します。ヘパリン（100 IU / kg体重）を注入し、少なくとも2分間待ちます。 </li><li>静脈吻合： <ol><li>完全に大静脈をクランプし、11ブレードを用いて、腎静脈の開口部の大きさに一致するスリット切開を作るためにSatinskyクランプを使用してください。ポットのはさみは、さらにスリットを拡張するために使用することができます。 </li><li>無菌の氷を含ませた布に腎臓をラッピングした後、氷からそれを削除し、手術野にそれを配置します。 2重武装6-0を使用します頭蓋と尾コーナーステッチを実行するためのプロレン縫合糸。 </li><li>腎臓を近似、上部コーナーを結ぶと6-0プロレンを使用して、実行中の縫合を行い、後壁から始まります。 2/3を終えた後、前方側に縫合糸を完了するために、タイのもう一方の端を使用します。頭蓋ステッチを結ぶ後、尾コーナーで縫い目を結びます。 </li><li>腎静脈上のブルドッグクランプを置き、Satinskyクランプを開きます。出血のための吻合を確認してください。 </li></ol></li><li>動脈吻合： <ol><li> Satinskyが完全に大動脈をクランプするために、再度クランプを使用します。腎動脈の開口部に一致する、スリットの切開を作るために11ブレードを使用してください。きれいな開口部を確保するために4.0ミリメートルラウンドパンチを使用してください。 </li><li>受信者側で開始する、動脈吻合を実行するために、1つ6-0プロレン縫合糸を使用してください。動脈内皮は解剖を防止するために、各縫合糸に含まれていることを確認してください。一方、norepinephr 10ミリリットルの持続点滴を開始INE（16ミリグラム/ 250ミリリットル）は乳酸リンゲル液500mlに希釈し、100 mmHgの上記の収縮期血圧を維持するために滴定します。 </li><li>動脈吻合が完了する前に、ベラパミル動脈内に注入し、血管攣縮を防止するために、容器の外側に局所パパベリンを投与します。 </li><li>腎動脈上のブルドッグクランプを置き、Satinksyクランプを開きます。出血のための吻合を確認してください。 </li><li>布から腎臓のラップを解除し、氷を取り除きます。動脈ブルドッグクランプ続いて、最初の静脈ブルドッグクランプを開きます。再灌流後、尿産生はすぐに開始する必要があります。 </li><li>移植移植のための有利な位置を確保し、均質な再灌流を維持するために布を使用してください。 </li></ol></li><li>尿管吻合： <ol><li>移植片から尿管および0.5センチ縦の長さにわたって受信者を開くには、ポットのはさみを使用してください。 </li><li>横方向のUREのための2つの6.0のポリエステル、ポリ（p-ジオキサノン）縫合糸を使用してくださいテラル吻合。前壁に続いて、最初に連続的に後ろの壁を実行し、各側のコーナーシュティッヒを実行します。 </li><li>出血を確認した後、布を取り外し、位置に保持するために腎臓の周りに小腸の一部を包みます。 2モノフィラメント1縫合糸で腹壁を閉じます。 3-0シルクまたは非吸収性モノフィラメント縫合糸で皮膚を閉じます。 </li><li>豚が発生しやすい位置に配置されたまで慎重にノルエピネフリンの注入を滴定することによって連続的に100 mmHgの上記の収縮期血圧を維持します。 </li></ol></li></ol></li><li>術後の手順<ol><li>前述したように腹部の閉鎖後、豚加熱パッドと熱循環毛布を使用して温めておきます。 、動脈ラインを取り外し6-0プロレンシュティッヒと動脈に穿刺孔を閉じ、切開部位を閉じます。 </li><li> 、腹臥位に豚を回しノルエピネフリン点滴を停止し、人工呼吸器から豚を離乳させます。アル手順からのスムーズな回復を確実にするために、その住宅地に回復し、密接にそれを監視する低豚。移植された頸静脈カテーテルを介して血液ガスサンプルを各時間を取ります。代替ボリュームに乳酸リンゲル液を提供し、鎮痛のために0.3 mgのブプレノルフィンを投与します。 </li><li>自然に飲むことができるようになるまで抜管後、密接に豚を監視します。それは胸骨横臥位を維持するのに十分な意識を取り戻したまで無人の動物を放置しないでください。完全に回復するまで、他の動物の会社に手術を受けた動物を返さないでください。 </li></ol></li></ol> 4.術後フォローアップ<ol><li>必要に応じて、少なくとも2日後に手術以上0.3ミリグラムのブプレノルフィン静脈ごとに8時間を管理します。日常的に手術中に抗生物質の単予防的用量を投与。感染の徴候が発生した場合、1日に1回、昼とメトロニダゾールIV二回までセファゾリン1グラムIVを管理します臨床症状の改善が発生します。豚は十分な水を飲むまで、乳酸リンゲルを管理します。千IUヘパリンは、凝固を防ぐために、カテーテルをロックするために使用することができます。 </li><li>豚の臨床症状や腎機能を評価するために頸静脈カテーテルと尿のサンプルを介して、静脈血サンプルを採取します。 </li><li>安楽死のために、プロポフォール静脈（5〜10 ml）で豚の麻酔を誘導し、イソフルラン5％でそれを維持します。上記のように豚を挿管。 relaparatomyおよび腎組織サンプル採取後、40 mvalのKClの静脈内注射により心停止を引き起こします。 </li></ol>

<ol><li>Wolfe, R. A., Ashby, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+mortality+in+all+patients+on+dialysis%2C+patients+on+dialysis+awaiting+transplantation%2C+and+recipients+of+a+first+cadaveric+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Comparison of mortality in all patients on dialysis, patients on dialysis awaiting transplantation, and recipients of a first cadaveric transplant.</a> N Engl J Med. 341 (23), 1725-1730 (1999).</li>
<li>Ingsathit, A., Kamanamool, N., Thakkinstian, A., Sumethkul, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+advantage+of+kidney+transplantation+over+dialysis+in+patients+with+hepatitis+C%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Survival advantage of kidney transplantation over dialysis in patients with hepatitis C: a systematic review and meta-analysis.</a> Transplantation. 95 (7), 943-948 (2013).</li>
<li>Tonelli, M., Wiebe, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+review%3A+kidney+transplantation+compared+with+dialysis+in+clinically+relevant+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Systematic review: kidney transplantation compared with dialysis in clinically relevant outcomes.</a> Am J Transplant. 11 (10), 2093-2109 (2011).</li>
<li>Global Observatory on Donation & Transplantation. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.transplant-observatory.org/Pages/home.aspx">http://www.transplant-observatory.org/Pages/home.aspx</a> (2014).</li>
<li>Matas, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN%2FSRTR+Annual+Data+Report+2012%3A+Kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">OPTN/SRTR Annual Data Report 2012: Kidney.</a> Am J Transplant. 14, Suppl 1. (2014).</li>
<li>Rahmel, A. Annual Report 2013 - Eurotransplant International Foundation. . , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.eurotransplant.org/cms/mediaobject.php?file=AR20135.pdf">https://www.eurotransplant.org/cms/mediaobject.php?file=AR20135.pdf</a> (2013).</li>
<li>Morrissey, P. E., Monaco, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+circulatory+death%3A+current+practices%2C+ongoing+challenges%2C+and+potential+improvements%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Donation after circulatory death: current practices, ongoing challenges, and potential improvements.</a> Transplantation. 97 (3), 258-264 (2014).</li>
<li>Maggiore, U., Oberbauer, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+to+increase+the+donor+pool+and+access+to+kidney+transplantation%3A+an+international+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol+Dial+Transplant%22%5BJournal%5D)">Strategies to increase the donor pool and access to kidney transplantation: an international perspective.</a> Nephrol Dial Transplant. 30 (2), 217-222 (2014).</li>
<li>Summers, D. M., Johnson, R. J., Hudson, A., Collett, D., Watson, C. J., Bradley, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+donor+age+and+cold+storage+time+on+outcome+in+recipients+of+kidneys+donated+after+circulatory+death+in+the+UK%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Effect of donor age and cold storage time on outcome in recipients of kidneys donated after circulatory death in the UK: a cohort study.</a> Lancet. 381 (9868), 727-734 (2013).</li>
<li>Wadei, H. M., Heckman, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+kidney+function+between+donation+after+cardiac+death+and+donation+after+brain+death+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Comparison of kidney function between donation after cardiac death and donation after brain death kidney transplantation.</a> Transplantation. 96 (3), 274-281 (2013).</li>
<li>Moers, C., Smits, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+perfusion+or+cold+storage+in+deceased-donor+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Machine perfusion or cold storage in deceased-donor kidney transplantation.</a> N Engl J Med. 360 (1), 7-19 (2009).</li>
<li>Pereira-Sampaio, M. A., Favorito, L. A., Sampaio, F. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+kidney%3A+anatomical+relationships+between+the+intrarenal+arteries+and+the+kidney+collecting+system.+Applied+study+for+urological+research+and+surgical+training%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Pig kidney: anatomical relationships between the intrarenal arteries and the kidney collecting system. Applied study for urological research and surgical training.</a> J Urol. 172 (5 Pt 1), 2077-2081 (2004).</li>
<li>Bagetti Filho, H. J. S., Pereira-Sampaio, M. A., Favorito, L. A., Sampaio, F. J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+kidney%3A+anatomical+relationships+between+the+renal+venous+arrangement+and+the+kidney+collecting+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Pig kidney: anatomical relationships between the renal venous arrangement and the kidney collecting system.</a> J Urol. 179 (4), 1627-1630 (2008).</li>
<li>Giraud, S., Favreau, F., Chatauret, N., Thuillier, R., Maiga, S., Hauet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+large+pig+for+renal+ischemia-reperfusion+and+transplantation+studies%3A+the+preclinical+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Contribution of large pig for renal ischemia-reperfusion and transplantation studies: the preclinical model.</a> J Biomed Biotechnol. 2011 (21), 532127(2011).</li>
<li>Gallinat, A., Paul, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+oxygenation+in+hypothermic+machine+perfusion+of+kidneys+from+heart+beating+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Role of oxygenation in hypothermic machine perfusion of kidneys from heart beating donors.</a> Transplantation. 94 (8), 809-813 (2012).</li>
<li>Thuillier, R., Allain, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Benefits+of+active+oxygenation+during+hypothermic+machine+perfusion+of+kidneys+in+a+preclinical+model+of+deceased+after+cardiac+death+donors%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Benefits of active oxygenation during hypothermic machine perfusion of kidneys in a preclinical model of deceased after cardiac death donors.</a> J Surg Res. 184 (2), 1174-1181 (2013).</li>
<li>Hosgood, S. A., Barlow, A. D., Yates, P. J., Snoeijs, M. G. J., van Heurn, E. L. W., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pilot+study+assessing+the+feasibility+of+a+short+period+of+normothermic+preservation+in+an+experimental+model+of+non+heart+beating+donor+kidneys%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A pilot study assessing the feasibility of a short period of normothermic preservation in an experimental model of non heart beating donor kidneys.</a> J Surg Res. 171 (1), 283-290 (2011).</li>
<li>Delpech, P. O., Thuillier, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+ischaemia+combined+with+cold+preservation+on+the+hypoxia-inducible+factor+1%CE%B1+pathway+in+an+experimental+renal+autotransplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Effects of warm ischaemia combined with cold preservation on the hypoxia-inducible factor 1α pathway in an experimental renal autotransplantation model.</a> Br J Surg. 101 (13), 1739-1750 (2014).</li>
<li>Kirk, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crossing+the+bridge%3A+large+animal+models+in+translational+transplantation+research%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Rev%22%5BJournal%5D)">Crossing the bridge: large animal models in translational transplantation research.</a> Immunol Rev. 196, 176-196 (2003).</li>
<li>Golriz, M., Hafezi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+we+need+animal+hands-on+courses+for+transplantation+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transplant%22%5BJournal%5D)">Do we need animal hands-on courses for transplantation surgery.</a> Clin Transplant. 27, Suppl 25. 6-15 (2013).</li>
<li>He, B., Musk, G. C., Mou, L., Waneck, G. L., Delriviere, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+surgery+for+kidney+orthotopic+transplant+in+the+pig+model%5BTitle%5D)+AND+%22JSLS%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic surgery for kidney orthotopic transplant in the pig model.</a> JSLS. 17 (1), 126-131 (2013).</li>
<li>Faure, A., Maurin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+porcine+model+of+heterotopic+renal+autotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">An experimental porcine model of heterotopic renal autotransplantation.</a> Transplant Proc. 45 (2), 672-676 (2013).</li>
<li>Hosgood, S. A., Yates, P. J., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1400W+reduces+ischemia+reperfusion+injury+in+an+ex-vivo+porcine+model+of+the+donation+after+circulatory+death+kidney+donor%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">1400W reduces ischemia reperfusion injury in an ex-vivo porcine model of the donation after circulatory death kidney donor.</a> World J Transplant. 4 (4), 299-305 (2014).</li>
<li>Ghanekar, A., Mendicino, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+induction+of+fgl2+contributes+to+thrombosis+during+acute+vascular+xenograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Endothelial induction of fgl2 contributes to thrombosis during acute vascular xenograft rejection.</a> J Immunol. 172 (9), 5693-5701 (2004).</li>
<li>Ghanekar, A., Lajoie, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+rejection+of+human+decay+accelerating+factor+transgenic+pig-to-primate+renal+xenografts+with+administration+of+rabbit+antithymocyte+serum%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Improvement in rejection of human decay accelerating factor transgenic pig-to-primate renal xenografts with administration of rabbit antithymocyte serum.</a> Transplantation. 74 (1), 28-35 (2002).</li>
<li>Cowan, P. J., Cooper, D. K. C., d'Apice, A. J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Kidney xenotransplantation.</a> Kidney Int. 85 (2), 265-275 (2014).</li>
<li>Seldinger, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter+replacement+of+the+needle+in+percutaneous+arteriography%3B+a+new+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+radiol%22%5BJournal%5D)">Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography; a new technique.</a> Acta radiol. 39 (5), 368-376 (1953).</li>
<li>Hanto, D. W., Maki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoperative+administration+of+inhaled+carbon+monoxide+reduces+delayed+graft+function+in+kidney+allografts+in+Swine%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Intraoperative administration of inhaled carbon monoxide reduces delayed graft function in kidney allografts in Swine.</a> Am J Transplant. 10 (11), 2421-2430 (2010).</li>
<li>Maathuis, M. -H. J., Manekeller, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+kidney+graft+function+after+preservation+using+a+novel+hypothermic+machine+perfusion+device%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved kidney graft function after preservation using a novel hypothermic machine perfusion device.</a> Ann Surg. 246 (6), 982-991 (2007).</li>
<li>Gallinat, A., Paul, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+reconditioning+of+porcine+kidney+grafts+by+short-term+preimplantation+machine+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Hypothermic reconditioning of porcine kidney grafts by short-term preimplantation machine perfusion.</a> Transplantation. 93 (8), 787-793 (2012).</li>
<li>Snoeijs, M. G., Matthijsen, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+transplantation+of+ischemically+injured+kidneys+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Autologous transplantation of ischemically injured kidneys in pigs.</a> J Surg Res. 171 (2), 844-850 (2011).</li>
<li>Golriz, M., Fonouni, H., Nickkholgh, A., Hafezi, M., Garoussi, C., Mehrabi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+kidney+transplantation%3A+an+up-to-date+guideline%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Pig kidney transplantation: an up-to-date guideline.</a> Eur Surg Res. 49 (3-4), 121-129 (2012).</li>
<li>Hosgood, S. A., Bagul, A., Yang, B., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relative+effects+of+warm+and+cold+ischemic+injury+in+an+experimental+model+of+nonheartbeating+donor+kidneys%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The relative effects of warm and cold ischemic injury in an experimental model of nonheartbeating donor kidneys.</a> Transplantation. 85 (1), 88-92 (2008).</li>
<li>Hoyer, D. P., Gallinat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+oxygen+concentration+during+hypothermic+machine+perfusion+on+porcine+kidneys+from+donation+after+circulatory+death%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Influence of oxygen concentration during hypothermic machine perfusion on porcine kidneys from donation after circulatory death.</a> Transplantation. 98 (9), 944-950 (2014).</li>
</ol>

著者らは開示するものは何もない。

ブタ腎臓移植のモデルは、人間の外科の面で類似性に起因する移植、生理学、生化学、および免疫学14の分野を促進するユニークな機会を提供します。 実験的研究の目的に応じて、腎臓の自己移植のモデルは、同種移植モデルと比較していくつかの利点を有します。いくつかのグループは、同種移植28後に良好な腎移植片機能を報告しているが、ブタの免疫抑制は、特に腎移植では、困難です。術前の血液サンプルは、ブタ白血球抗原（SLA）との互換性を確保するために分析可能であるが、高価であり、実用的でない14。術後、このようなタクロリムスおよびシクロスポリン（カルシニューリン阻害剤、CNI）などの提案の免疫抑制剤は、経口投与または静脈28されています。豚は通常、経口MEDICAを飲み込むことを拒否するように経口投与は、非現実的でする。また、腸の障害物は、免疫抑制薬や治療薬のレベルの維持の十分な吸収を回避することがあります。アクティブな動物におけるCNIのIVの連続注入は、技術的に厳しいです。 IVボーラス投与が毒性を引き起こす高いピーク値をもたらします。したがって、新たな保存技術の調査のために、腎臓の自己移植のモデルはいくつかの利点を有します。上記の実証allotransplantated腎臓移植、クレアチニン及びBUNの遅延と増加したピークの代表的な結果では組織学的評価によって実証された拒絶反応を、示しています。 自家移植のブタモデルは、以前に新しい保存技術14,18,29を調査するために使用されてきました。しかし、心臓の拍動シナリオにおける自家移植豚の報告術後の血清クレアチニンとBUN値はかなり実験系22,30によって異なります</sup&gt;。私たちはここに提示心臓鼓動ドナープロトコルは2.8ミリグラム/デシリットル（±0.7）及び（7.4±）25.3ミリグラム/ dlでのBUNピークの低術後の血清クレアチニンピークになります。これらの結果は、Hantoや同僚28とSnoeijsや同僚31によって提示された低ピーク値と同等です。 ブタの自家移植モデルにおける腎移植後の成功した結果を確実にするために、我々はある種の合併症の割合を最小限に抑えるいくつかの重要な技術的な要因を同定しました。ウィスコンシン大学（UW）ソリューションと比較すると、ヒスチジン - トリプトファン - ケトグルタル酸溶液（HTK）の使用は、カリウムのその下の内容に血管攣縮のリスクを低減します。さらに、再灌流の時点で血管痙攣のリスクを減少させるために、ベラパミルは、腎動脈に注入することができ、パパベリン、検索中および再灌流後に局所的に投与することができます。また、ノルエピネフリンの連続点滴を維持するために滴定100 mmHgの上記の収縮期血圧は、均質な再灌流を保証します。ブタの傾向に配置される少なくともまで、この血圧を維持するのに有用です。さらに、移植された移植片の位置決めは、新たに吻合血管のねじれを防止することが重要です。したがって、前に大規模な機械的操作を回避するために、グラフトの吻合を縫製に反対側の左腎臓を切除すると便利です。尿管吻合を終えた後、移植された移植片の周りに小腸をラッピングすることは腹壁の閉鎖後にその位置を確保しています。そのような腸のねじれによる腸閉塞などの合併症はほとんど観察されないが、腸閉塞、腸穿孔、および死亡を含む重篤な合併症につながることができます。良好な臨床転帰および移植片機能を確保フォローアップ中に全体的に、正確な手術手技、気配り麻酔と綿密なモニタリング。 動脈と静脈吻合をperfoすることができます異なる技術を使用してrmed。移植片の同所配置は、腎動脈と静脈のエンドツーエンドの吻合を可能にします。異移植の場合、移植片は、腸骨血管へのエンドツーエンドの吻合のための反対側の腎臓窩、直接遠位大動脈に配置することができます。吻合を有する異移植大動脈すると、それは血栓症および血管痙攣32のリスクを減らすことができるように静脈直接エンド・ツー・サイド手法でこのモデルにおいて好ましいです。非常に初期の静脈分岐部との解剖学的バリエーションは、2つの別々の静脈吻合を縫製の必要性につながる可能性があります。動脈または静脈が比較的短い場合、移植片は、血管の長さを得るために180°回転させることができます。尿管側側吻合は、狭窄または尿漏れを複雑にすることなく、良好な実験結果を得ることができます。 一般的には、腎移植のブタモデルは、他の動物モデルと比べて利点を提供しています。 dと上記の傍接した、特定の類似点は、ブタおよび臨床診療への新技術の比較的高速な翻訳を可能にする人間の設定、間に存在します。移植の技術は、げっ歯類モデルに比べて技術的に容易です。さらに、静脈カテーテルの配置によって、末梢血サンプルを容易に収集することができ、さらなる調査のために処理しました。尿の採取は、腎臓損傷および機能のさらなる評価を可能にします。尿サンプルを採取するために、経皮的カテーテルを膀胱に挿入することができます。豚による操作を回避するために、遠位端は、動物の背中の皮下にトンネルされるべきです。尿収集のための別のオプションは、長期の収集期間は、尿中のクレアチニンクリアランスおよびさらなるバイオマーカーの濃度を推定することを可能にする代謝ケージの使用です。超音波検査、CTスキャン、MRI画像が可能です。循環死​​のプロトコル後の寄付は暖かい適用することによって模倣することができます前の検索に虚血。また、豚は彼らの攻撃的な行動を制限する去勢場合は取り扱いが比較的容易です。 欠点は、動物の購入、住宅、外科手術などの医療機器、および労働力の高いコストが含まれます。これらの要因は、各試験群の動物の多数を含むことが不可能であることを意味します。また、げっ歯類モデルに比べて、参照の限られた数は、豚規範的、生物学的データについての文献で入手可能です。このような新規保存方法などの新開発技術の評価のための代替として、他のグループは、腎移植33,34の代替として正常体温ex vivoでの再灌流を記載しています。この技術は、実行するのが容易かつ安価です。しかし、標準化された腎臓移植片移植は臨床診療へのより多くの同様のモデルを提供し、長い期間をフォローアップできます。したがって、それは評価するより現実的な移植のために提供していますメント。 結論として、異自家腎移植のブタモデルは、腎臓移植の成果の改善のための革新的な新たなアプローチを調査する臨床の重要なシナリオを提供します。具体的には、このプロトコルは、自家腎移植モデルの成功確立を容易にする重要な技術的な詳細を提供していますし、臨床試験への新たな知見の迅速な翻訳を可能にします。

腎臓移植は、透析1-3と比較して罹患率と死亡率が低いため、末期腎疾患の患者に最適な治療法です。腎移植後の患者の転帰は大幅に改善されましたが、移植片の不足は依然として世界中で深刻な課題となっています。腎臓移植を待っている患者の数は、利用可能な臓器の数をはるかに上回っています4〜6。移植に利用できる腎臓の数を増やし、患者の待ち時間を短縮するためには、腎移植片のさらなる供給源が必要です。
一般的には、脳死後の提供(DBD)からの標準基準ドナー(SCD)および拡張基準ドナー(ECD)の腎臓移植片、および生体ドナー(LDKT)から回収された腎臓が利用されます。1990年代以降、ドナープールをさらに拡大するために、循環死後(DCD)シナリオで回収される腎移植片の数が増えています7,8。ただし、DCDおよびECD腎移植片は、ドナーの年齢、温虚血時間と寒冷虚血時間、および9-11に使用された保存技術などのさまざまな要因に応じて、移植後の結果は許容できるが減少することを示しています。したがって、辺縁腎移植を受けている患者の転帰を改善し、ドナープールをさらに増やすためには、追加の研究が必要です。
ブタの腎移植モデルは十分に確立されており、辺縁的な腎移植の結果を改善するための革新的なアプローチを調査するための臨床的に重要なシナリオを提供しています。単葉性であるげっ歯類およびイヌの腎臓とは対照的に、ブタおよびヒトの腎臓は多葉性であり、特に動脈、静脈、および尿収集システムに関して解剖学的に類似している12,13。さらに、ブタとヒトの腎臓は、虚血再灌流障害(IRI)の病態生理学、生化学、および免疫学的パラメータにおいて類似性を示しています14。したがって、ブタ腎移植は、辺縁腎移植片15-17の新しい臓器保存方法の研究、ヒトIRIのモデル18、免疫経路と同種移植耐性の研究19、外科的トレーニングの提供20-22、新しい薬理学的治療法のテスト23、新しい医療機器の実装、および異種移植における新しい免疫学的メカニズムの研究24-26によく適しています。
腎臓のブタとヒトの移植環境は完全に類似しているわけではありません。この記事では、腎自家移植モデルの確立を成功させるための重要な技術的詳細に焦点を当てています。種に適応した術前および術後の住居、綿密なモニタリングによる麻酔の投与、および一致する外科的技術がプロトコルで説明され、ビデオで実証されています。対側天然腎臓の切除は、移植された腎臓の機能を評価する機会を提供します。静脈カテーテルと尿道カテーテルの配置と代謝ケージの使用により、より詳細な評価が可能になります。IRIの代替移植片保存方法とメカニズムを調査することを目的とした研究では、自家移植モデルは、拒絶反応と免疫抑制薬の使用に関連する合併症や交絡バイアスを回避するため、同種移植モデルよりも優れています。

<table><tbody><tr><td>麻酔器</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>麻酔器、Optimax</td><td>Moduflex 麻酔器</td><td>SN5180</td><td></td></tr><tr><td>輸液ポンプ3,000</td><td>SIMS Graseby LTD.</td><td></td><td></td>SN300050447</tr><tr><td>輸液ポンプライン</td><td>Smith Medical ASD Inc.</td><td>21-0442-25</td><td></td></tr><tr><td>静脈内永久カテーテル(9.5 Fr)</td><td>Cook Medical Company</td><td>G01865</td><td></td></tr>イ<tr><td>ソフルラン蒸気19.1</td><td>Draeger Medical Canada Inc.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Mallinckrodt, 気管チューブ, 6.5 mm</td><td>Covidien Canada</td><td>86449</td><td></td></tr><tr><td>Temperature Therapy Pad</td><td>Gaymar Industries Inc</td><td>TP26E</td><td></td></tr><tr><td>Ventilator, AV 800</td><td>DRE Medical Equipment</td><td>40800AVV</td><td></td></tr><tr><td>Warm Touch, Patient Warming System</td><td>Nellcor/ Covidien Canada</td><td>5015300A</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>会社</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>Surgical Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Abdominal Retractor</td><td>Medite GmbH</td><td>07-0001-00</td><td></td></tr> 大<tr><td>動脈/静脈パンチ 4.0 mm、丸型</td><td>Scanlan International Inc.</td><td>1001-602</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey、非外傷性末梢、Clamp</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB463R</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey-Beck, Atraumatic Vena Cava, Clamp</td><td>Aesculap Inc. (株)</td><td>FB519R</td><td></td></tr><tr><td>デ・ベイキー アトラクティック・ミニブルドッグ (株) ストレート・</td><td>エイスクラップ</td><td>FB422R</td><td></td></tr><tr><td>デ・ベイキー アトラクティック・ミニブルドッグ カーブド・</td><td>エイスクラップ社</td><td>FB423R</td><td></td></tr><tr><td>de Bakey、非外傷性縮窄クランプ、Angled</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB453R</td><td></td></tr><tr><td>解剖刃 #11</td><td>フェザー安全カミソリ株式会社</td><td>089165B</td><td></td></tr><tr><td>コネクター(1/4インチ)、オスルアーロック付き</td><td>Sorin Group Inc.</td><td>AB1452</td><td></td></tr><tr><td>肝臓管理セット(フラッシュライン)</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>17175</td><td></td></tr><tr><td>Maxon、1</td><td>Covidien Canada</td><td>606173</td><td></td></tr><tr><td>Med-RX吸引接続チューブ</td><td>Benlan Inc.</td><td>70-8120</td><td></td></tr><tr><td>オルガンバッグ</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>2990</td><td></td></tr><tr><td>Potts &ndash;デ・マーテル、シザーズ・</td><td>エースクラップ株式会社</td><td>BC648R</td><td></td></tr><tr><td>腎動脈カニューレ、1.6インチ</td><td>ソリングループ</td><td>VC-11000</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 2-0</td><td>Covidien Canada</td><td>S405</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 3-0</td><td>Covidien Canada</td><td>S404</td><td></td></tr><tr><td>Satinsky, Suprahepatic Cava Clamp</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB605R</td><td></td></tr><tr><td>サクションチップ</td><td>Tyco Healthcare Group LP</td><td>8888501023</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II, 6-0</td><td>Covidien Canada</td><td>VP733X</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, Cautery Pencil</td><td>Covidien Canada</td><td>E2515H</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, Force Tx</td><td>Valleylab Inc.</td><td></td><td></td>216151480</tr><tr><td>Valleylab、患者復帰電極</td><td>Covidienカナダ</td><td>E7507</td><td></td></tr><tr><td>名前</td><td>会社</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>Medication</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>アトロピン硫酸塩15mg / 30ml</td><td>ラフター 8 製品</td><td>238481</td><td></td></tr><tr><td>ブプレノルフィン 0.3 mg/ml</td><td>RB ファーマシューティカルズ LDT</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>セフチオフール 3 mg/ml</td><td>ファイザー カナダ インク</td><td>11103</td><td></td></tr><tr><td>セファゾリン 1 g</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td></td><td></td>2237138</tr><tr><td>クエン酸フェンタニル 0.25 mg/5 ml</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td></td><td></td>2240434</tr><tr><td>ヘパリン 10,000 iU/10 ml</td><td>サンド カナダ</td><td>10750</td><td></td></tr><tr><td>ヒスチジン-トリプトファン-ケトグルタル酸(HTK)溶液</td><td>メタファーム</td><td>CU001LBG</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン99.9%、250 ml</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td></td><td></td>2231929</tr><tr><td>ケタミン塩酸塩&nbsp; 5,000 mg/50 ml</td><td>Bimeda-MTC Animal Health Inc.</td><td></td><td></td>612316</tr><tr><td>乳酸リンガー 's + 5% デキストロース 1 L</td><td>バクスター</td><td>コーポレーション JB1064</td><td></td></tr><tr><td>ラクテート リンガー's 1 L</td><td>バクスターコーポレーション</td><td>JB2324</td><td></td></tr><tr><td>メトロニダゾール 500 mg/100 ml</td><td>バクスターコーポレーション</td><td>870420</td><td></td></tr><tr><td>ミダゾラム 50 mg/10 ml</td><td>カナダ ファーマシューティカル・パートナー</td>ズ<td></td><td></td>2242905</tr><tr><td>ノルエピネフリン 16 mg/250 ml デキストロース 5%</td><td>バクスター コーポレーション</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>パントプラゾール 40 mg</td><td>サンド カナダ インク</td><td></td><td></td>2306727</tr><tr><td>パパベリン 65 mg/2 ml</td><td>サンド カナダ</td><td>9881</td><td></td></tr><tr><td>プロポフォール 1,000 mg/100 ml</td><td>ファーマサイエンス</td><td></td><td></td>2244379</tr><tr><td>生理食塩水0.9%、1リットル</td><td>バクスターコーポレーション</td><td>60208</td><td></td></tr><tr><td>Solu-Medrol 500 mg</td><td>ファイザーカナダ株式会社</td><td></td><td></td>2367963</tr><tr><td>ベラパミル</td><td>サンドカナダ株式会社</td><td></td><td></td>2166739</tr><tr><td>キシロカイン気管内 10 mg/50 ml</td><td>アストラゼネカ</td><td>2003767</td><td></td></tr></tbody></table>

ブタモデルにおける異自家腎移植：ステップバイステップのプロトコル

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

腎臓移植は、末期腎疾患に苦しむ患者に最適な治療法です。透析と比較して、平均余命が長く、生活の質も高くなります。過去数十年で腎臓移植後の患者の転帰に大きな改善が見られましたが、利用可能な臓器の不足の増加は世界中で深刻な問題を表しています。ドナープールを拡大するために、拡張基準ドナー(ECD)から回収された辺縁腎移植片、または循環死後に提供された腎移植片(DCD)が移植に受け入れられるようになりました。これらの辺縁移植片の術後転帰をさらに改善するためには、研究は代替保存技術、免疫調節、遺伝子導入、幹細胞投与などの新しい治療アプローチに焦点を当てる必要があります。
動物モデルでの実験的研究は、新たに開発された技術が臨床実践に応用される前の最終ステップです。ブタ腎臓移植は、ヒト移植の優れたモデルであり、新しいアプローチの研究を可能にします。ブタモデルの主な利点は、解剖学的および生理学的に人体に類似しているため、新しい知見を臨床試験に迅速に変換できることです。この記事では、自家移植モデルの外科的なステップバイステップのプロトコルを提供し、実験の成功を確実にするための重要な要素を強調します。適切な術前および術後の住居、注意深い麻酔、および一貫した外科的技術により、術後の結果が良好になります。対側天然腎臓の切除は、移植後の移植片機能を評価する機会を提供します。静脈カテーテルと尿道カテーテルの配置と代謝ケージの使用により、さらに詳細な評価が可能になります。長期的な追跡調査や代替移植片保存技術の研究において、自家移植モデルは、拒絶反応や免疫抑制薬によってもたらされる交絡バイアスを回避するため、同種移植モデルよりも優れています。

以下では、腎臓の自己移植実験の結果は、（N = 4）で示されます。初期グラフト検索した後、豚は彼らの住宅地で回収されました。また、腎臓移植片は7時間35分（±18分）の平均時間氷上で保存しました。麻酔と繰り返し開腹の再寛解導入後、反対側の腎臓を切除し、説明したように、冷間保存された移植片はheterotopically移植しました。 （ 図1参照）は 、人工呼吸器から離乳後、ブタを手術から回復させ、10日まで続きます。毎日の（1-4術後日; POD）または一日おきに（6-10ポッド）血液試料を血液ガス分析を行うために収集しました。腎機能を評価するために、血清クレアチニンおよび血中尿素窒素（BUN）の値を推定しました。比較のために、あるallotransplanted腎臓移植の結果を示します。免疫抑制のために、この豚はシクロスポリン100mgの経口および共同受信しましたrtisone 250 mgを使用する外科技術は、自家移植プロトコルと同じであったivbid。何の暖かい虚血時間が適用されませんでした。 全てのブタは、フォローアップ期間の間に良好な臨床状態にありました。クレアチニンとBUN値は手術後一日目で最大の増加を明らかにした血清（クレア2.8±0.7ミリグラム/ dlで、BUN 25.3±7mgの/ DL）とポッド10（クレア1.7±0.4ミリグラム/ dlで、BUN 10.7±4まで減少しました初期ベースライン値に近いミリグラム/デシリットル）。拒絶反応の可能性が最も高い自家移植、（ 図2および3）と比較した場合、allotransplanted腎臓移植片は、良好な初期移植片機能の後に、より高いクレアチニンとBUN値を示しました。酸塩基止血（ 図4）及び電解質レベル（ 図5）の介入なしに安定でした。組織学的検査は、自家移植、腎臓（Figurに保存尿細管間質を示しました。E 6）、およびallotransplanted腎臓で間質性炎症、尿細管炎、及び糸球体炎を拡散（ 図7）。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig2.jpg" /> ベースラインおよび術後10 図 2. 血清クレアチニン値を。血清クレアチニン値（平均値と標準偏差）。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig3.jpg" /> 図3.血清BUN値。ベースラインの血清BUN値（平均値と標準偏差）と10日手術後。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 図4.酸塩基止血。ベースラインの酸塩基止血（平均と標準偏差）と10日手術後。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図5" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig5.jpg" /> 図5.電解質レベル。電解質レベル（平均値と標準偏差）は、ベースラインおよび10日手術後。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図6" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig6.jpg" /> 図6.組織学（H＆＃38; 10日手術後の自家移植腎臓におけるE）、100X倍率ノーマル尿細管間質。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig6large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図7" src="/files/ftp_upload/53765/53765fig7.jpg" /> 図7.組織学（H＆E）、100X倍率。豊富な間質性炎症、尿細管炎、及び糸球体炎、拒絶反応と一致して、10日手術後allotransplanted腎臓で。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53765/53765fig7large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a>

ブタの臓器移植モデルは、臓器保存のメカニズムを研究するための重要なプラットフォームを提供します。この記事では、辺縁腎移植片を使用した移植の結果を改善するための新しいアプローチを調査できる異所性ブタ腎自家移植モデルについて説明します。

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

この外科的処置の全体的な目標は、ブタモデルでヘテロトピー性腎自家移植を確実に実施し、良好な腎移植機能を提供することです。このビデオと付属の原稿は、ブタモデルでヘテロトピア性腎自動車輸送をどのように行うかという重要な質問に答えるのに役立ちます。このビデオの主な利点は、すべての重要な主要なアクションを提供し、移植後の適切な腎移植機能を確保するために、ブタと臨床モデルの違いを強調することです。ブタに麻酔をかけ、手術台で準備した後、喉頭鏡を使用して声帯を露出させます。2%リドカイン溶液をコードにスプレーして、挿管によるけいれんを防ぎます。.次に、6.5ミリメートルのチューブでブタを挿管し、カフを3〜5ミリリットルの空気で塞ぎます。先に進む前に、気化器を調整し、深い麻酔を確認してください。麻酔が確認されたら、セルディンガー法を使用して9.5フレンチシングルルーメンカテーテルを頸静脈に導入します。これには、静脈に穴を開け、ガイドワイヤーを導入し、針を剥離式イントロデューサーに交換し、ワイヤーをカテーテルに交換することが含まれます。次に、3-0シルク縫合糸を使用してカテーテルを固定します。手術中は、カテーテルを使用して抗生物質と鎮痛剤のカクテルを導入します。また、乾燥を防ぐために、豚の目に獣医軟膏を塗ります。滅菌消毒と術野のカバレッジに続いて、長さ25センチメートルの正中線切開を行い、リトラクターを挿入します。大腸と小腸をタオルで覆い、右腎臓への最適なアクセスのために左側に配置します。次に、焼灼器を使用して、尿管と右腎臓自体を付着組織から解放します。次に、右腎静脈と動脈を焼灼器を使用して、下大静脈と大動脈の起源から解放されるまで解剖します。動脈血管痙攣を避けるためには、30〜65ミリグラムのパパバリンを投与することが役立つ場合があります。.腎解剖が完了したら、3-0シルク縫合糸で尿管を結び、尿管を遠位に切断します。このとき、氷の入ったボウルと滅菌済みのオルガンバッグを用意します。腎臓を採取するには、血管クランプを使用します。まず、腎動脈を大動脈の近くに固定します。次に、腎静脈を大静脈の近くに固定します。次に、腎臓移植片を切除し、氷の上に置きます。次に、すぐに腎動脈カニューレで腎動脈をカニューレします。500ミリリットルの氷冷HTK溶液を使用して血液を洗い流し、移植まで腎臓を氷の上に保存します。その場で、残りの腎動脈をシルク2-0結紮糸で閉じ、ランニングプロレン6-0縫合糸で腎静脈を閉じます。出血に対処した後は、腹部と皮膚を閉じます。次に、静脈カテーテルを3-0シルク縫合糸で皮下固定し、それを豚の背中にトンネルで貫通させて、不要な操作を防ぎます。豚を腹臥位にした後、カテーテルを皮膚にしっかりと縫合します。ブタに麻酔をかけ、手術部位を滅菌消毒した後、気管の隣に4センチの切り込みを入れ、組織を解剖して頸動脈を露出させます。オーバーホルト鉗子を動脈の周りに通し、2-0シルク縫合糸を配置します。次に、セルディンガー法を使用してプラスチックカテーテルを導入し、手術全体を通して動脈圧を連続的に測定します。これに続いて、以前と同様に腹腔を再度開きます。次に、保存された腎移植片を端から端まで腎下大静脈と大動脈に移植します。これを行うには、ピックアップと焼灼を使用して、腸骨分岐部の上の大静脈と大動脈の5〜8センチメートルを解剖します。リンパ管を避けてください。必要に応じて5-0プロレン縫合糸で閉じます。出血がないか確認し、血管から残っている組織をすべて取り除きます。目標は、サチンスキークランプを配置するのに十分な容器を露出させることです。次に、反対側の腎臓を切除します。まず、腸を右に向けます。次に、尿管、腎臓自体、腎静脈、腎動脈を周囲の組織から解剖します。次に、尿管と血管を結びます。次に、腎臓を切除し、出血がないか確認します。次に、腸の位置を変えて、腎下大動脈と大静脈を露出させます。ヘパリンを注射し、少なくとも2分間待ちます。腎臓移植片を取り、滅菌氷を入れた布で包みます。静脈吻合から始めます。サチンスキークランプを使用して、大静脈を完全にクランプします。次に、11番のブレードで、腎静脈の開口部と同じサイズのスリット切開を行います。必要に応じてポットハサミを使用してスリットを伸ばすことができます。2つのダブルアーム6-0プロレン縫合糸を使用して、頭蓋と尾側のコーナーステッチを行いました。次に、豚の腎臓を氷から取り出し、手術野に配置します。移植片に頭蓋と尾側の角を縫います。次に、腎臓の近似を行います。上隅を結び、後壁から始めて6-0プロレンを使用してランニング縫合を行います。2/3のところで、タイのもう一方の端を使用して、前面の縫合を完了します。頭蓋のステッチを結んだ後、尾側の角でステッチを結びます。次に、ブルドッグクランプを腎静脈に配置し、Satinskyクランプを開いて、静脈吻合の出血を確認します。サチンスキークランプを大動脈に置きます。次に、腎動脈の開口部に合わせてスリット切開を行います。11番のブレードを使用してください。続いて4ミリの丸パンチで開口部を空けます。次に、1つの6-0プロレン縫合糸を使用して、レシピエント側から始めて、吻合を行います。解離を防ぐために、動脈内皮を各縫合糸に含める必要があります。その間、500ミリリットルのリンゲル乳酸で希釈された10ミリリットルのノルエピネフリンの連続ストリップを開始します。これを滴定して、収縮期血圧を水銀柱の100ミリメートル以上に保ちます。動脈吻合を完了する前に、ベラパミルを動脈内に提供することができます。吻合が完了したら、ブルドッグクランプを腎動脈に配置し、サチンスキークランプを開いて出血を確認します。次に、腎臓をさらに広げて氷を取り除きます。最初に静脈ブルドッグクランプを開き、次に動脈ブルドッグクランプを開きます。均質な再灌流を維持するために腎臓を配置します。血管 ?? を予防するために、パパベリンを血管に局所的に投与してください。.再灌流後、尿の生成はすぐに開始する必要があります。.次に、尿管吻合を行いました。ポットハサミを使用して、グラフトの尿管を縦方向に0.5センチメートル開くことから始めます。レシピエント尿管にも同じことを行います。次に、2つの6-0 PDS縫合糸を使用して、左右の尿管吻合を行います。両側にコーナーステッチを行い、次に前壁を連続的に縫合します。吻合を回して後壁を露出させ、縫合を続けて続けます。吻合が完了したら、出血がないか確認してください。次に、2つのモノフィル1つの縫合糸で腹壁を閉じます。続いて、3-0シルク縫合糸で皮膚を閉じます。ノルエピネフリンを慎重に滴定することにより、ブタの収縮期血圧を水銀柱100ミリメートル以上に継続的に維持しました。これは、手順の重要なステップです。ブタが腹臥位になるまで収縮期血圧を監視し続けます。4つの腎自家移植が行われました。最初のグラフト回収では、グラフトを氷上に7.5時間保存しました。人工呼吸器から豚を離乳させた後、手術から回復し、10日間追跡されました。血液サンプルから、血清クレアチニンと血中尿素窒素の値を推定しました。測定値は、自家移植片に対して適切な結果を示しました。同種移植片の血清クレアチニンおよびBUN値の増加は、移植片拒絶反応を示しています。酸塩基止血と電解質レベルも介入なしで安定していました。組織学的検査では、自家移植された腎臓には尿細管間質が保存されたことが示されましたが、同種移植された腎臓では、びまん性の間質性炎症、尿細管、糸球体炎が示されました。このビデオを見れば、ブタモデルでヘテロトピア性腎自動輸送を行う方法についてよく理解できるはずです。腎移植後の腎移植片の良好な機能を確保するために、人間の設定と比較した外科的技術の主な違いが示されました。

heterotopic-renal-autotransplantation-porcine-model-step-step

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

マウスの腎移植は、成功のための慎重な術後ケアと治療を必要とする技術的に困難な手順です。...

マウス腎移植の手順

このビデオは、腎臓の1つと尿管の一部を取り除く外科的処置である腎摘出術を示しています。腎臓との間の血管は結ばれ、分割されています。切除した腎臓は移植手術に使用できます。...

ブタモデルにおける腎摘出術:移植のためのブタ腎臓移植片を回収するための外科的処置

このビデオでは、ブタモデルでの同所性腎臓自己移植について説明しています。この外科的処置には、動物の腎臓移植片を元の解剖学的位置に移植することが含まれます。このモデルは、ヒトの末期腎臓病に対する新しい治療法を調査するために使用されます。...

同所性ブタ腎臓移植:ブタモデルに移植片腎臓を移植する技術

実験的なex vivo灌流システムを実行することで、動物の臓器生理学の研究を達成できます。以前に開発されたex...

自家Ex vivo灌流ブタ肝腎臓実験の手順

ここでは、新しい心保護戦略を研究するためにしっかりと確立され、利用されている正頭外核移植の前臨床大型動物(ブタ)モデルについて説明する。...

オルソトピック心臓移植の前臨床ブタモデル

大型動物モデルは、前臨床移植研究に不可欠な役割を果たしています。臨床セットアップとの類似性により、本稿で説明する直交性腎臓自動移植のブタモデルは、臓器保存技術および治療介入の検査のための優れた生体内設定を提供する。...

24時間臓器保存と連続テレメトリを用いた豚モデルにおける異形性腎臓自動移植

我々は、ブタ異所性心臓移植モデルにおける心臓同種移植片全体への治療薬の送達のために、正常温熱 エクスビボ...

心臓同種移植への治療薬の送達のためのブタヘテロトピック心臓移植プロトコル

ここでは、その後の機械灌流または移植のための前臨床豚モデルにおける腎臓調達の外科的モデルについて詳しく説明するプロトコルを紹介します。...

前臨床大動物モデルにおける腎臓調達

ここでのプロトコルは、同種移植片の ex vivo 灌流を利用した循環死後の提供後の心臓移植の高忠実度ブタモデルについて説明しています。...

循環器死後の提供後の同所性心臓移植の高忠実度ブタモデル

どの年齢でも測定gyrification（皮質フォールディング）は初期の脳の発達にウィンドウを表します。したがって、我々は以前に半球上の点の数千にローカルgyrificationを測定するアルゴリズムを開発...

ローカルGyrificationのインデックスを計算するステップバイステップのチュートリアル：MR画像からの皮質折りたたみを測定する方法

学ぶブタモデルにおける異自家腎移植の手術手順。HTK溶液を用いた腎臓摘出・保存、血管吻合術、尿管吻合術の詳細なステップを解説。移植後の腎機能評価と組織学的検査による妥当性も示す。

ブタモデルにおける異自家腎移植：ステップバイステップのプロトコル

さらに動画を探す