豚の長期心血管運動テストのためのカテーテルの外科的配置

ここでは、覚醒状態の豚、安静時、および段階的なトレッドミル運動中の心肺機能を評価するためのプロトコルを提示します。慢性的な器具は、心臓抑制性麻酔薬の影響を受けずに血行動態測定を繰り返すことができます。

この手術の全体的な目標は、心血管疾患の有無にかかわらず、警戒動物の心肺負荷試験中に血行動態測定を可能にするために、動物を慢性的に器具化することです。この方法は、メタボリックシンドロームが左心室機能や灌流にどのような影響を与えるか、駆出率が維持された心不全の発症に寄与するなど、心血管分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の2つの重要な利点は、覚醒した動物から血行動態測定と血液サンプルが取得され、安静時や運動などの心血管ストレス時にこの技術を実行できることです。

この技術の意味は、肺の微小血管機能、ならびに右心室機能と灌流を疾患の導入後に明確に定義された段階で測定できるため、肺高血圧症の早期診断にまで及ぶ可能性があります。この手法の視覚的なデモンストレーションは不可欠です。この血管の血管痙攣のため、冠状動脈の周囲にフロープローブを配置する方法を学ぶことは困難です。

また、開胸術に対してこの血管の位置により、大動脈の周囲にフロープローブを配置することは困難です。手順を実演するのは、当研究室の技術者であるAnnemarie Verzijlです。動物を手術のために準備した後、肩甲骨の左下角に1センチメートルの尾側から始まり、左腋窩まで下向きに切開して、皮膚を切開します。

切開後、ジアテルミーを使用して皮膚の血管を焼灼します。次に、ジアテルミーの切断法を用いて、鋸筋と大胸筋を切断します。ジアテルミーを引き続き使用して、筋肉層の血管を焼灼します。

次に、鈍的解剖を使用して、4番目の左肋間腔の肋間筋を慎重に分割します。蚊帳クランプを使用してこれを終了します。次に、内臓胸膜と頭頂胸膜で覆われている左肺の肋骨表面を露出させます。

次に、胸膜の両方の層を慎重に突き刺し、それらを引き裂いて開いて胸膜腔に入ります。胸部リトラクターを使用して、傷口と肋骨の端を分離し、組織を力強く押し離すことにより、露出を改善します。心臓と大きな血管を露出させるには、左肺を尾側に押し、濡れたガーゼで所定の位置にくさびで留めます。

手術のこの部分は、下行胸部大動脈を囲む約2平方センチメートルの結合組織を切除するための鈍的解剖から始めます。次に、非吸収性のUSP 3-0編組シルク縫合糸を使用して、大動脈壁に3針の巾着縫合糸を配置します。次に、ステンレス鋼の16ゲージ針で縫合糸を通して大動脈血管壁を貫通します。

針に続いて、液体で満たされたカテーテルの先端を大動脈に挿入します。次に、巾着の紐の縫合糸をしっかりと引っ張って結びます。カテーテルを固定するには、余分な縫合糸をリングの上のカテーテルの周りに3回巻き付けて結び、挿入部位に約1センチの頭蓋骨に新しいステッチを追加します。

次に、液体で満たされたカテーテルを、コンピューターに接続された校正済みの圧力トランスデューサーに接続します。したがって、後続のステップで平均動脈圧を監視します。次に、横隔神経を損傷することなく、交差した切り傷で心膜を開きます。

カットの下で、肺動脈を特定し、それを尾側にそっと引っ張ることにより、ファラボフ開創器で上行大動脈と大動脈弓を露出させます。大動脈を露出させた状態で、Metzenbaumハサミを使用して、上行大動脈と肺動脈の間の結合組織に1センチメートルの切り込みを入れます。次に、フロープローブを取り付けます。

まず、縫合リードを使用して血管の周りに輪ゴムを取り付けます。次に、フロープローブ測定装置を輪ゴムに取り付けます。第三に、フロープローブをコンピューターに接続し、第四に、心拍出量信号をチェックして、プローブが適切に配置されていることを確認します。

次のステップは、左前下行冠状動脈の近位部分を露出させて解剖することです。まず、鉗子で組織を持ち上げます。次に、Metzenbaumはさみを使用して、ティッシュに小さな切り込み

次に、綿棒を使用して動脈から組織を慎重に取り除きます。また、冠状動脈が完全に解剖されるように、その下に小さなまっすぐな角度の蚊クランプを通します。冠状動脈の血管痙攣が発生した場合は、10%リドカンをスプレーして血管を弛緩させます。

同じ手法を使用して、肺動脈、右心室、左心室、および左心房に液体で満たされたカテーテルを配置します。これで、すべてのカテーテルがコンピューターに接続されました。次に、冠状静脈カテーテルに接続された縫合糸を使用して、前心室間冠状静脈と平行にステッチを作成します。

縫合後、冠状静脈カテーテルの20ゲージ針で静脈を穿刺し、カテーテルのカニューレを静脈内に挿入します。次に、既存のステッチでカテーテルを固定します。針を取り外し、延長線に接続します。

次に、以前に解剖した左前下行冠状動脈の周囲に冠状動脈フロープローブを配置します。プローブを配置した状態で、コンピューターで冠状動脈の流れの信号を確認し、フロープローブが正しく配置されていることを確認します。冠状動脈血流信号の形状は、ここに示されているものと似ている必要があります。

手術のこのフェーズは、最初の切開部と平行に、尾側に約8センチメートルの1.5センチの切開を行うことから始めます。次に、大きく湾曲した蚊クランプを使用して、胸膜腔からのドレーンを第6肋間腔を通ってこの切開部まで皮下的に導きます。ドレンを吸引装置に接続して、胸部から残っている液体を取り除きます。

次に、大きく湾曲した蚊クランプを使用して、フロープローブを左3番目の肋間腔と肋骨の上の筋肉に個別にトンネルします。液体で満たされたカテーテルを 3 番目または 5 番目の左肋間腔に通します。まず、液体で満たされたカテーテルをクランプします。

次に、ピアス領域を最小限に抑えるために、三方活栓を取り外します。そして第三に、肋間筋を突き刺します。次に、フロープローブと液体充填カテーテルを非吸収性のUSP 2-0編組シルクで固定します。

肋間筋に巾着縫合糸を使用します。このサトレは、負の胸腔内圧を回復した後の空気漏れも防ぎます。次に、左に約2センチ、脊柱と平行に皮膚を3回切開します。

これらの3つの切開部を長さ3センチ、互いに3センチ離します。次に、吻側切開部位から背中の切開部まで、左広背筋の下にトロカールを突き刺します。次に、トロカールを使用して、フロープローブと液体カテーテルを後ろにトンネルします。

トンネリングが完了したら、液体で満たされたカテーテルに活栓を置き、clを取り外しますamp.血栓と気泡を取り除くために、血液を採取します。次に、液体で満たされたカテーテルに1, 000単位/ミリリットルでヘパリンを充填し、冠状静脈カテーテルを5, 000単位/ミリリットルでヘパリンで充填します。

第4肋間腔の肋骨を2つの別々の場所で一緒に引っ張って胸部を閉じます。非吸収性のUSP6編組ポリエステルを使用してください。次に、鋸筋と大胸筋をランニングステッチで閉じます。

非吸収性のUSP 2-0編組シルクを使用して、ランニング皮下縫合糸で皮膚を閉じます。次に、カテーテル間の背側の切開部を縫います。まず、結び目を直接皮膚に結び、切開部を閉じます。

次に、皮膚から約1センチメートルのところに別の結び目でカテーテルを縫合糸に固定します。フロープローブをポリグラクチン縫合糸で縫合し、フロープローブのワイヤーが縫合糸で切断されないようにします。次に、胸膜腔内の陰圧を回復させるために、インクションの頭蓋側に圧力をかけながらドレーンを慎重に取り外します。

次に、巾着縫合糸で切開部を閉じ、傷口をワセリンで塞いで手術を完了します。動物の回復方法とトレッドミル実験の実施方法に関するテキストプロトコルに従ってください。豚に時速5kmまで移動させる運動をすると、心拍出量が2倍になりました。

体内酸素消費量が3倍になることが観察されました。これは、心拍出量の増加とヘモグロビン濃度の増加、および体内酸素抽出の増加によるものでした。これは主に、一回生量がわずかに増加した心拍数の増加によって達成されました。

一回拍出量の増加は、左心室圧の 1 次導関数の最大値の増加と、左心室の弛緩速度の増加、および左心室の充満圧である左心房圧の増加によって証明されるように、左心室収縮性の増加によって促進されました。全身性血管コンダクタンスの増加と全身性血管抵抗の減少によって証明されるように、全身性血管拡張が発生しました。これにより、心拍出量の増加にほぼ完全に対応し、平均大動脈圧はわずかに上昇しました。

他のいくつかのパラメータのさらなる解釈は、テキストプロトコルで提供されています。このビデオを見れば、その後の心血管実験で血行動態測定を行うために動物を慢性的に計測する方法を十分に理解できるはずです。