急性心筋梗塞の豚モデルにおける主要アウトカム評価

この方法論の全体的な目標は、急性心筋梗塞のブタモデルにおける新しい治療法の評価のための信頼性と再現性のある結果測定値を取得することです。この方法は、融合損傷のスキーマに対する治療的介入の影響や、急性心筋梗塞のモデル化など、心血管領域の主要な質問に答えるのに役立ちます。これらの技術の主な利点は、虚血再灌流障害と心臓リモデリングの正確で臨床的に関連性のある評価を可能にすることです。

この方法により、心筋虚血再灌流障害に関する洞察を提供することができます。また、心機能の評価を含む他の研究にも適用できます。現在のプロトコルでは、急性心筋梗塞の前または後に主要な結果測定値を取得することができます。

梗塞は、引用されたビデオで詳しく説明されているように、左前下行動脈の75分間の経管バルーン閉塞を使用して行われます。このビデオでは、3次元経食道心エコー検査の実施方法と、ベースライン、短期、および長期のフォローアップ測定のためのボリュームループ測定の圧力を示します。また、このビデオでは、終了後の梗塞のサイズとリスクのある領域の染色を測定する方法も示しています。

テキストプロトコルに記載されているように麻酔でブタを準備し、心電図リードを使用して動物を心エコー装置に接続します。次に、エコープローブを準備します。先端に超音波ジェルを貼り、ロックを解除して柔軟性を持たせます。

ハンドヘルド操作ピースを使用して、イメージング角度を90度に調整します。ブタを右横の位置にして、口を開き、プローブを慎重に食道に挿入します。圧力をかけすぎないように注意し、ツェンカー憩室に似た通常の解剖学的咽頭ポーチを避けてください。

次に、プローブを50〜60センチ挿入し、鼻先から測定し、頭をゆっくりと回転させて左前外側の位置に曲げて心臓を視覚化します。すべてのハートの壁がはっきりと見えることを確認してください。必要に応じて、エコープローブの先端をロックして、画像取得を安定させます。

ディスプレイで、3Dフルボリュームオプションを切り替えて、左心室の垂直画像を生成します。次に、FV Opt Volumeを選択して、取得されるセクター幅を最大化します。次に、換気を一時停止し、[取得]を押して、全体積測定値を取得します。

完全な測定値を取得したら、機械換気のスイッチを入れます。エコー取得後、プローブのロックを解除し、ゆっくりと動物から取り外します。次に、手術から回復するまで豚を監視します。

準備として、カテーテルのセンシングチップを0.9%生理食塩水に少なくとも20分間浸します。.ブタを手術用に準備した後、1キログラムあたり100国際単位のヘパリンを注入し、頸動脈に8Fイントロデューサーシースを、頸静脈に9Fシースを配置します。次に、9Fシースと考えたスワンガンツカテーテルを挿入し、カテーテルの先端でバルーンを膨らませ、小さな肺動脈に挟みます。

肺の末梢部に適切に配置したら、バルーンを収縮させ、スワンガンツカテーテルを外部心拍出量デバイスに接続します。接続したら、 view 外部心拍出量デバイスの心拍出量メニュー。動物の体重をシステムに入力し、BMIが22.5になるように長さを計算します。

室温0.9%生理食塩水を含む20ミリリットルの注射器をロードし、最も近位のデバウシュメントで照明に接続された注入ポートに取り付けます。換気をオフにして、5回の心拍を待ちます。まず、Manualを押し、次に出力デバイスのStartを押します。

次に、5ミリリットルの生理食塩水を迅速に注入して、心拍出量を測定します。15秒以内に、デバイスの測定値が表示されます。次に、換気のスイッチを入れます。

この手順を3回繰り返して、平均ストローク量を計算します。注入の合間に、呼気終末二酸化炭素が既存の値に戻るまで1〜2分待ちます。次に、スワンガンツカテーテルを取り外し、頸静脈の9Fシースに8Fフォガティカテーテルを挿入し、下大静脈に配置します。

先端が0.9%生理食塩水のままである間に、コースボタンとファインボタンを使用して、PVループカテーテルの圧力信号をできるだけ0に近づけて校正します。次に、測定したストローク量をシステムに入力します。次のステップは、PVループカテーテルを頸動脈の8Fシースに通して前進させ、透視法を使用しながら、先端を左心室に進めて中央に配置することです。

次に、生のコンダクタンス信号を圧力信号に対してプロットすると、長方形のループが作成されます。このグラフを使用して、適切に配置された最大のセグメントを選択します。次に、機械換気を一時停止し、圧力ボリュームループモジュールのEnterキーを押してベースラインスキャンを行い、コンダクタンスをボリュームに変換します。

モジュールに心拍数、収縮期および拡張期コンダクタンスが表示されたら、呼吸を再びオンにします。先に進む前に、測定された心拍数は心電図または圧力から導き出された心拍数と等しくなければなりません。不整脈はあり得ず、収縮期および拡張期のコンダクタンスを適切に感知する必要があります。

ベースラインデータが適切であると判断された場合は、Enterキーを押してそれを受け入れ、PVループモジュールに示されている心拍数と収縮期および拡張期コンダクタンスを書き留めます。次に、圧力信号に対して体積信号をプロットします。ループは長方形のままである必要があります。

次に、換気を一時停止し、10〜12回の連続した心拍を記録することにより、ベースライン圧力量を取得します。次に、換気を再度オンにし、呼気終末二酸化炭素レベルが既存の値に戻るのを待ちます。次に、透視ガイドの下で、フォガティカテーテルを膨らませて予負荷を減らします。

その後、先ほどと同様にベンチレーションなしで10〜12拍連続で録音します。収縮期血圧は水銀柱の60ミリメートルを超えている必要があり、不整脈が測定を妨げることはありません。データを取得した後、フォガティカテーテルを収縮させ、換気のスイッチを入れ、呼気終末二酸化炭素が既存のレベルに戻るのを待ちます。

次に、フォガティとPVループカテーテルを取り外しながら、動脈圧を記録し続けて圧力ドリフトを補正します。最後に、動物が回復するまで動物を監視してから、他の動物に戻します。動物を手術の準備をした後、首の外科的探索を使用して両方の頸動脈にアクセスします。

次に、7Fと8Fのイントロデューサーシースをそれぞれの頸動脈に挿入します。次に、ヘパリンを1キロあたり100単位で投与します。胸骨切開術を行うには、胸骨上ノッチの直下から剣状突起のすぐ下の点まで、30〜40センチメートルの中程度の切開を行います。

次に、リネアアルバを通って胸骨まで進みます。ジアテルミーを使用して剣状突起を慎重に分割し、クリンケンバーグはさみを使用して後胸骨を心膜から分離します。頭蓋骨のように動きながら、ぶっきらぼうに分離を続けます。

心臓の損傷を避けるために、はさみの先端が胸骨に向かって上を向いていることを確認してください。ハンマーとレブシェナイフを使用して胸骨切開を行います。骨髄の出血は、骨髄に骨髄ワックスをこすりつけることで最小限に抑えることができます。

リトラクターで胸部を開きます。次に、手術用ハサミを使用して心膜を開きます。標準のY型カテーテルをガイディングカテーテルに接続します。

次に、10センチメートルの延長を備えた3方向タップを両方のYコネクタに接続します。次に、ガイドカテーテルの1つをシースの1つを介して左主冠状動脈の口に配置します。次に、左前下行動脈に挿入したガイドワイヤーを用いて、左主冠動脈カテーテルを通して冠動脈拡張カテーテルを前進させ、心筋梗塞導入時に冠動脈閉塞を行った場所にバルーンを配置します。

まだ膨らませないでください。他のシースを使用して、もう一方のガイディングカテーテルを右冠状動脈の口に配置することにより続けます。次に、冠動脈造影を行います。

透視下で造影剤を注入します。まず、左主冠動脈のガイディングカテーテルの正しい位置を前後図で確認します。その後、右冠状動脈を視覚化します。

造影剤注入は、バルーンをさらに冠状動脈に推進する可能性があります。必要に応じて位置を変更します。次に、作りたての2%エバンスブルー染料を使用したシリンジを三方タップに取り付けます。

次に、冠動脈造影を使用して、バルーンを膨らませ、冠状動脈の一部を完全に閉塞することを確認します。オクルージョンは重要です。バルーンを膨らませた状態で、両方のガイドカテーテルから毎秒5ミリリットルで染料を注入します。

心臓は、血流が奪われる左心室の部分を除いて、青くなってはいけません。心臓が自然に心室細動にならない場合は、色素注入の5拍後に心臓の非梗塞部分に9ボルトのバッテリーを触れます。.次に、ケーブル静脈を切開して圧力を解放し、吸引を使用して血液を排出します。

次に、バルーンを収縮させます。両方のガイディングカテーテルと一緒に引っ込めます。次に、周囲の膜を解剖し、大きな血管を横切って切り込みを入れて心臓を造設します。

すべての血液を洗い流し、外側と内側の両方で0.9%生理食塩水で染めてください。次に、左心室を慎重に解剖します。次に、心房心室溝に平行な平面に、頂点から基部までの厚さ10ミリメートルの等しいセクションを5つ作成します。

キャリブレーションのために、画像内の定規を使用して、周囲光条件下で5つのスライスすべての両面を撮影します。次に、スライスをTTCで染色し、再度写真を撮ります。3D経食道心エコー検査は、全体的な心機能の評価に使用されました。

急性心筋梗塞の1週間後、10匹の動物からの結果に基づいて、健康なベースライン値と比較すると、全体的な心機能が悪化しました。これは、前穿孔壁の収縮の減少によって説明されました。また、全体的な心機能の評価と、内因性心筋の特性の計算の両方に、圧力ボリュームループも使用されました。

前者の結果測定値は簡単に計算でき、右下隅にEDV、左上隅にESVが含まれます。これらの値は、左心室の形状に関する重要な情報を提供します。これらの測定値から、左心室ポンプ機能の重要な尺度である左心室拒絶率が、他のいくつかのパラメーターとともに計算されました。

内因性心筋機能については、収縮期末期と拡張期末期の圧力体積の関係など、PVループからさまざまな測定値が導き出されました。心筋梗塞後、収縮末期容積圧力関係の傾きが減少することがあり、収縮性の低下を示しています。最終的に、リスクのある領域から離れた心筋と梗塞した心筋を特定するために、染色が使用されました。

左心室の約22%がリスクのある領域を構成しており、そのほとんどが梗塞でした。このビデオを見れば、3D経食道心エコー検査、圧力ボリュームループデータ取得、リスクのある領域への梗塞サイズ染色の方法について十分に理解できるはずです。一度習得すると、経食道心エコー検査は20分で実行できます。

圧力ボリュームループのデータを30分で取得できます。そして、梗塞のサイズとリスクのある領域は60分で染色されます。PVループや梗塞サイズの領域を染色するリスクを試みている間は、不整脈を誘発しないように注意することが重要です。

このビデオで示されている手法は、心血管疾患の分野の研究者が大動物モデルで虚血と再灌流損傷を調査するのに役立ちます。