Name: マウスの弁膜症の包括的表現型の特徴のための心エコーアプローチとプロトコル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 12 min 12 s
Description: 学ぶマウスの心エコー法による弁膜症の包括的表現型評価プロトコル。心臓と弁機能の複雑な相互作用を理解し、複数の弁機能障害を検出する標準化された手法を習得できます。

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<li>Yamada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induced+pluripotent+stem+cell+intervention+rescues+ventricular+wall+motion+disparity%2C+achieving+biological+cardiac+resynchronization+post-infarction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Induced pluripotent stem cell intervention rescues ventricular wall motion disparity, achieving biological cardiac resynchronization post-infarction.</a> J Physiol. 591, 4335-4349 (2013).</li>
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<li>Ferferieva, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+strain+and+strain+rate+by+two-dimensional+speckle+tracking+in+mice%3A+comparison+with+tissue+Doppler+echocardiography+and+conductance+catheter+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Assessment of strain and strain rate by two-dimensional speckle tracking in mice: comparison with tissue Doppler echocardiography and conductance catheter measurements.</a> Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14, 765-773 (2013).</li>
<li>Fine, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+and+right+ventricular+strain+and+strain+rate+measurement+in+normal+adults+using+velocity+vector+imaging%3A+an+assessment+of+reference+values+and+intersystem+agreement%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Left and right ventricular strain and strain rate measurement in normal adults using velocity vector imaging: an assessment of reference values and intersystem agreement.</a> Int J Cardiovasc Imaging. 29, 571-580 (2013).</li>
<li>Pernot, M., Fujikura, K., Fung-Kee-Fung, S. D., Konofagou, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ECG-gated%2C+mechanical+and+electromechanical+wave+imaging+of+cardiovascular+tissues+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">ECG-gated, mechanical and electromechanical wave imaging of cardiovascular tissues in vivo.</a> Ultrasound Med Biol. 33, 1075-1085 (2007).</li>
<li>Liu, J. H., Jeng, G. S., Wu, T. K., Li, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ECG+triggering+and+gating+for+ultrasonic+small+animal+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Ultrason+Ferroelectr+Freq+Control%22%5BJournal%5D)">ECG triggering and gating for ultrasonic small animal imaging.</a> IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control. 53, 1590-1596 (2006).</li>
<li>Monin, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-gradient+aortic+stenosis%3A+operative+risk+stratification+and+predictors+for+long-term+outcome%3A+a+multicenter+study+using+dobutamine+stress+hemodynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Low-gradient aortic stenosis: operative risk stratification and predictors for long-term outcome: a multicenter study using dobutamine stress hemodynamics.</a> Circulation. , 319-324 (2003).</li>
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著者らは開示するものは何もない。

麻酔導入 適切な麻酔の導入および保守は、マウスの心臓弁の変化の正確な評価や心機能のために重要です。イソフルランによって誘発される麻酔の迅速な誘導と深い麻酔後にこの麻酔薬の比較的長いウォッシュアウト時間を考えると、我々は誘導のために、スタンドアロンの麻酔室を使用しないでください。上記で詳細に述べたように代わりに、動物を麻酔の比較的低濃度の麻酔の迅速かつ制御された誘導を可能にする麻酔コーンに直接導かれます。 マウスのほとんどの株は十分に1.5％未満のイソフルランで鎮静状態に残ります。心機能に対するイソフルランの累積的影響は密接しかし、監視する必要があり、および麻酔薬の濃度の小さな減少は、時間の経過とともに必要になることがあります。相互に、麻酔薬の濃度の小さな増分もねかもしれeded。 （麻酔の不十分な深さを示唆する）任意の移動のためにとHRの増加または減少のために動物を慎重に監視します。これは、麻酔の深さを迅速かつプロアクティブな管理を可能にします。 <p class="jove_conten...

エージングは、心血管石灰化1の漸進的増加と関連しています。血行動態的に重要な大動脈弁狭窄症は、65 2歳以上の人口の3％に影響を及ぼし、さらには中程度の大動脈弁狭窄（3-4メートル/秒のピーク速度）を有する患者は、40％未満の5年無イベント生存率を持っています3。現在、そこに大動脈弁の石灰化の進行を遅らせるために有効な治療法はなく、外科的大動脈弁置換術は、高度な大動脈弁狭窄4のための唯一の可能な治療です。 大動脈弁石灰化の開始および進行に寄与するメカニズムのより深い理解を得ることを目的とした研究は、大動脈弁狭窄5、6を管理するための薬理学的および非外科的方法に向かって移動中の重要な最初のステップです。遺伝学的なLY-変更されたマウスは、種々の疾患に貢献し、今大動脈弁狭窄6、7、8の生物学を理解することを目的とした機構研究の最前線に来ているメカニズムの理解を開発する上で大きな役割を果たしてきました。アテローム性動脈硬化症や心不全、血管および心室機能を評価するための標準プロトコルは大部分がされているような他の心血管疾患とは異なり、マウスにおける心臓弁の機能のin vivoでの表現型に関連付けられている固有の課題は、十分に確立された-があります。最近のレビューは、多数のイメージングおよびげっ歯類9、10、11における弁の機能を評価するために使用侵襲的モダリティの長所と短所についての徹底的な議論を提供してきたが、今日まで、私たちはCOMPREを提供する出版物を認識していませんhensive、マウスでは心臓弁の機能を表現型のためのステップバイステップのプロトコル。 本稿の目的は、マウスにおける心臓弁の機能を表現型にする方法およびプロトコルを記述することです。すべての方法及び手順は、メイヨークリニック制度動物実験委員会によって承認されています。このプロトコルの主な構成要素は、麻酔の深さ、心機能の評価、および心臓弁の機能の評価を含みます。我々は、この報告書は、心臓弁疾患の分野の研究を追求に興味を持って研究者を案内するのに役立つだけでなく、この急速に成長している分野で、データの再現性と妥当性を確保するためのプロトコル標準化に関連する国内および国際的な対話を開始することを願っています。重要なことには、高解像度の超音波システムを使用して成功したイメージングは​​、基本Principでの理解を加工超音波検査の原理の知識（及び一般的に超音波検査で使用される用語）を必要とレ心臓生理学、およびげっ歯類における心機能の正確かつ時間効率の評価を可能にするために超音波検査での豊富な経験の。

<table><tbody><tr><td>高解像度超音波診断装置</td><td>VisualSonics、Fujifilm</td><td>Vevo 2100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>イソフルランディフューザー(1 L/min 100% O2</subと混合された1 % 〜 1.5% のイソフルランを供給可能></td><td>VisualSonics、富士フイルム</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>小型マウス (550D) または大型マウス (400) 用トランスデューサーMicroScan</td><td>、VisualSonics、富士フイルム</td><td>MS 550D、MS 400</td><td></td></tr><tr><td>動物プラットフォーム</td><td>VisualSonics、富士フイルム</td><td>11503</td><td></td></tr><tr><td>高度な生理学的モニタリングユニット</td><td>VisualSonics、富士フイルム</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>テレル</td><td>NDC 66794-019-10</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン ディフューザーと 100% O2</td><td>カスタム エンジニアリングされた社内</td><td>--</td><td></td></tr><tr><td>毛のかみそり</td><td>Andis スーパー AGR+ 獣医パック クリッパー</td><td>AD65340</td><td></td></tr><tr><td>超音波ゲル</td><td>Parker Laboratories</td><td>REF 01-08</td><td></td></tr><tr><td>電極ゲル&nbsp;</td><td>Parker Laboratories</td><td>REF 15-25</td><td></td></tr><tr><td>粘着テープ</td><td>Fisher Laboratories</td><td>1590120B</td><td></td></tr><tr><td>ペーパータオル</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

マウスの弁膜症の包括的表現型の特徴のための心エコーアプローチとプロトコル

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

この原稿と付随するビデオの目的は、げっ歯類の心臓弁機能のイメージングに使用される方法とアプローチの概要を提供することであり、適切な麻酔方法、使用される心エコー検査ウィンドウ、画像取得のためのイメージング平面とプローブの向き、データ分析の方法、および心機能と弁膜機能の評価のための新しい技術の限界についての詳細な説明とともに説明します。 重要なことに、私たちはまた、前臨床動物モデルにおける弁疾患の病因についての洞察を得るために活用できる可能性のある、心臓および心臓弁イメージングにおけるいくつかの将来の研究分野を強調しています。 私たちは、マウスの心臓および心臓弁の機能を評価するための体系的なアプローチを使用すると、より堅牢で再現性のあるデータが得られるだけでなく、遺伝的に変更されたマウスおよび/または生理学的にストレスを受けたマウスで以前に過小評価されていた表現型の発見を促進することを提案します。

日常的に動物の心臓の超音波画像から得られる画像の例は、この原稿に含まれています。動物の胸にトランスデューサ配置の図が読者に変換器が記載されているように画像を取得するように配置されるの明確な理解を与えるために設けられています。超音波実験室セットアップの写真はまた、適切な装置、特に、使用される超音波トランスデューサと麻酔の方法の重要性を強調するために含まれています。 2D / Bモード、Mモード、カラードップラー、正常および異常な弁のディスプレイ、右心室および左心室と大動脈根が適切に標識されています。ひずみ速度イメージングが日常的に行われていないが、例も含まれています。 僧帽弁逆流は、S中に弁を横切って高い、通常、非層状血流速度（モザイク着色）することを特徴としますystole（ 図5）。 ECGトレース中のQRS群の後に発生するMV全体の左心房、左心室から、このようなモザイクカラードップラーフローパターンの存在は、MRの...

このプロトコルは、マウスの心臓および心臓弁機能の包括的な表現型のための心エコー検査アプローチの詳細な説明を提供します。

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

このエコープロトコルの全体的な目標は、げっ歯類の心臓弁機能を画像化するために使用される方法とアプローチを示すことです。今日お見せする方法は、心臓弁膜症の条件下で心臓を統合ユニットとして評価することに特に重点を置いて、心臓病の分野における重要な質問に答えることができます。心臓の包括的な心エコー検査評価により、複数の心臓弁の弁機能障害の検出が可能になるだけでなく、研究者が心機能と心臓弁機能のさまざまな測定値との間の複雑な相互作用を理解できるようになるため、このアプローチの意味は心臓弁疾患の分野にとって非常に深いものです。この方法は、心臓弁膜症が主な欠陥である動物モデルを特徴付けるために活用できますが、心不全や胸部大動脈瘤などの他の障害に続いて心臓弁機能障害が現れる可能性のある他のシステムにも適用できます。したがって、ほとんどの調査研究で包括的な心臓および心臓弁の表現型を日常的に実施することをお勧めします。私たちは最初に、心臓弁の機能を評価するために使用される方法とプロトコルに大きなばらつきがある多くの会議に出席した後、包括的な心臓および心臓弁表現型へのアプローチを撮影するというアイデアを思いつきました。この原稿とそれに付随するビデオが、従うべき最善の方法論と基準に関する現場での議論に拍車をかけ、最終的には、研究研究の厳密性と再現性を向上させるための国立衛生研究所の最近の取り組みと一致することを願っています。心エコー検査の主な利点は、心臓の形態と機能をリアルタイムで非侵襲的に評価できることです。実行が簡単で、連続して実行できます。したがって、逐次追跡調査に最も理想的です。一般的に、心臓弁や心臓弁のイメージングに不慣れな方は、麻酔の投与や漸増に伴う物流上の課題、心エコー検査に使用できる非常に小さな解剖窓に関連する技術的な課題、イメージング中に心臓の構造やプローブの向きを正確に特定する必要性など、苦戦を強いられることになります。私たちのアプローチの視覚的なデモンストレーションにより、研究者がマウスの心エコー検査の実施を学ぶ速度が加速し、最終的には小動物イメージングのベストプラクティスを議論するためのプラットフォームとして機能することを願っています。まず、高周波超音波トランスデューサーを搭載した超音波装置の電源を入れます。測定する動物のIDと、日付、時刻、その他の関連情報を入力します。プラットフォームを摂氏37度に予熱してから、ネズミの尻尾をそっとつまみ、首筋で動物をしっかりと保持します。動物の鼻をノーズコーンに導き、付属のテキストプロトコルで説明されているように麻酔を開始します。鎮静剤を投与したら、動物を仰臥位でプラットフォームに素早く正確に置き、前足と後足がプラットフォームのECGセンサーの上にくるようにします。粘着テープを使用して、動物を四肢すべてに固定し、ノーズ

echocardiographic-approaches-protocols-for-comprehensive-phenotypic

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医学

経胸壁心エコー検査は、マウスの心機能の評価のための非侵襲的方法を提供しています。超音波検査とドップラーイメージングモダリティの組み合わせは、一緒に心臓の収縮期および拡張期のパフォーマンスの評価を提供する、心臓と心臓内の血流の寸法測定を、得るために使用することができます。...

マウスにおける経胸壁心エコー

このビデオでは、麻酔マウスの心エコー検査を実行するためにレールマウント高周波超音波プローブの使用方法を示します。方法は、カラードップラー、歪みの解析だけでなく、一般と標的コントラストイメージングなどの新しい、より強力なツールに加え、心機能の両方を従来の2次元およびMモードの測定値を説明します。...

マウス心エコー検査と超音波イメージング

このビデオでは、実験用マウスで心エコー検査を行うためのプロトコルについて説明しています。...

マウス心エコー検査:心臓の形態を評価するための非侵襲的技術

この記事では、マウスの右心室の大きさや肺高血圧症の心エコー評価のためのプロトコルを提供します。アプリケーションでは、心筋症および肺血管疾患のトランスジェニックおよび毒素誘発マウスモデルにおける表現型の決定およびシリアル評価を含める。...

マウスの右心の心エコー評価

このプロトコルの目的は、非侵襲的B-およびMモード心エコー法およびカラー/脈波ドップラーイメージングを用いて、横方向の大動脈狭窄によって作成された心臓病のマウスモデルにおいて心臓の構造的および機能的変化を評価することです。...

心臓形態学的および心エコーイメージングによって横大動脈狭窄のマウスモデルにおける機能の変更の評価

以下のプロトコルは、マウスの左心房容積（LAV）、大動脈（AO）の直径、および肺動脈（PA）の直径を得るために使用される心エコー画像の取得および分析のための方法を記載しています。この技術は、心肺機能の評価を可能にする非侵襲性、非末端の手順です。...

左心房、大動脈、肺動脈のマウス心エコー

心エコー検査は、マウスで多用されます。高価な高分解能超音波デバイスは、この目的のために開発されています。このプロトコルでは、心臓形態を決定する組織学的形態計測学的解析と組み合わせて現実的な心エコー手順について説明します。...

マウスの心臓形態の心エコー検査・組織学的検討

ここでは、マウスにおける頂点4チャンバービューを得るための2つの位置を説明し、比較する。これらの位置は右心室機能の定量化を可能にし、同等の結果を提供し、交換可能に使用することができる。...

マウスにおける右心室拡張期パラメータの心エコー測定

本プロトコルは、7日齢の新生児マウスにおける左心室の形態、機能、および冠状動脈血流の心エコー検査評価について説明しています。...

新生児マウスにおける左心室構造、機能、冠動脈流の心エコー特性評価

この記事では、胎児心エコー検査、剖検、およびエピスコピック共焦点顕微鏡(ECM)を使用したエピスコピック蛍光画像キャプチャ(EFIC)を使用したマウス先天性心疾患(CHD)診断方法とそれに続く3次元(3D)再構成について詳しく説明します。...

マウス胎児の構造的心臓欠損を特徴付けるパイプライン

学ぶマウスの心エコー法による弁膜症の包括的表現型評価プロトコル。心臓と弁機能の複雑な相互作用を理解し、複数の弁機能障害を検出する標準化された手法を習得できます。

マウスの弁膜症の包括的表現型の特徴のための心エコーアプローチとプロトコル

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