Name: 麻酔ラットにおける電図および視覚誘発電位の同時記録 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: 学ぶ 麻酔ラットにおける電図および視覚誘発電位の同時記録法。網膜機能と視覚皮質処理を包括的に評価し、加齢や疾患による視覚経路への影響を解明する神経科学研究に有用です。

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>jove_content<このプロジェクトの資金は、National Health and Medical Research Council (NHMRC) 1046203 (BVB, AJV) と Melbourne Neuroscience Institute Fellowship (CTN) によって提供されました。

<ol><li>Nguyen, C. T. O., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Prog Retin Eye Res. 27, 1-44 (2008).</li>
<li>Tsai, T. I., Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+acute+intraocular+pressure+challenge+on+rat+retinal+and+cortical+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of acute intraocular pressure challenge on rat retinal and cortical function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 1067-1077 (2014).</li>
<li>Cowey, A., Franzini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+retinal+origin+of+uncrossed+optic+nerve+fibres+in+rats+and+their+role+in+visual+discrimination%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The retinal origin of uncrossed optic nerve fibres in rats and their role in visual discrimination.</a> Exp Brain Res. 35, 443-455 (1979).</li>
<li>Weinstein, G. W., Odom, J. V., Cavender, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visually+evoked+potentials+and+electroretinography+in+neurologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Visually evoked potentials and electroretinography in neurologic evaluation.</a> Neurol Clin. 9, 225-242 (1991).</li>
<li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+evoked+potentials+standard+%282004%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visual evoked potentials standard (2004).</a> Doc Ophthalmol. 108, 115-123 (2004).</li>
<li>Ridder, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causes+of+cataract+development+in+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Causes of cataract development in anesthetized mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li>
<li>Nixon, P. J., Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+cone+responses+to+rat+electroretinograms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Experiment+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The contribution of cone responses to rat electroretinograms.</a> Clin Experiment Ophthalmol. 29, 193-196 (2001).</li>
<li>Bui, B. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+the+electroretinogram+to+understand+how+intraocular+pressure+elevation+affects+the+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Using the electroretinogram to understand how intraocular pressure elevation affects the rat retina.</a> J Ophthalmol. 2013, 262467(2013).</li>
<li>Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+measure+of+the+electrical+activity+of+human+rod+photoreceptors+using+electroretinography%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A quantitative measure of the electrical activity of human rod photoreceptors using electroretinography.</a> Vis Neurosci. 5, 379-387 (1990).</li>
<li>Birch, D. G., Hood, D. C., Locke, K. G., Hoffman, D. R., Tzekov, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+electroretinogram+measures+of+phototransduction+in+cone+and+rod+photoreceptors+-+Normal+aging%2C+progression+with+disease%2C+and+test-retest+variability%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Quantitative electroretinogram measures of phototransduction in cone and rod photoreceptors - Normal aging, progression with disease, and test-retest variability.</a> Arch Ophthalmol. 120, 1045-1051 (2002).</li>
<li>Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+receptoral+responses+in+pigmented+and+albino+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Development of receptoral responses in pigmented and albino guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Doc Ophthalmol. 99, 151-170 (1999).</li>
<li>Robson, J. G., Saszik, S. M., Ahmed, J., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+and+cone+contributions+to+the+a-wave+of+the+electroretinogram+of+the+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rod and cone contributions to the a-wave of the electroretinogram of the macaque.</a> J Physiol. 547, 509-530 (2003).</li>
<li>Severns, M. L., Johnson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+care+and+fitting+of+Naka-Rushton+functions+to+electroretinographic+intensity-response+data%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The care and fitting of Naka-Rushton functions to electroretinographic intensity-response data.</a> Doc Ophthalmol. 85, 135-150 (1993).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+of+electroretinogram+amplitude+growth+during+light+adaptation+in+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Origin of electroretinogram amplitude growth during light adaptation in pigmented rats.</a> Vis Neurosci. 23, 155-167 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> J Physiol. 555, 153-173 (2004).</li>
<li>Tremblay, F., Laroche, R. G., Debecker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Electroretinographic+Diagnosis+of+the+Incomplete+Form+of+Congenital+Stationary+Night+Blindness%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">The Electroretinographic Diagnosis of the Incomplete Form of Congenital Stationary Night Blindness.</a> Vision Res. 35, 2383-2393 (1995).</li>
<li>Bayer, A. U., Keller, O. N., Ferrari, F., Maag, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+glaucoma+with+neurodegenerative+diseases+with+apoptotic+cell+death%3A+Alzheimer%27s+disease+and+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Association of glaucoma with neurodegenerative diseases with apoptotic cell death: Alzheimer's disease and Parkinson's disease.</a> Am J Ophthalmol. 133, 135-137 (2002).</li>
<li>Wostyn, P., Audenaert, K., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+abnormal+high+trans-lamina+cribrosa+pressure+difference%3A+A+missing+link+between+Alzheimer%27s+disease+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neurology+and+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">An abnormal high trans-lamina cribrosa pressure difference: A missing link between Alzheimer's disease and glaucoma.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 110, 753-754 (2008).</li>
<li>Yucel, Y. H., Zhang, Q. A., Weinreb, R. N., Kaufman, P. L., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+retinal+ganglion+cell+loss+on+magno-%2C+parvo-%2C+koniocellular+pathways+in+the+lateral+geniculate+nucleus+and+visual+cortex+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of retinal ganglion cell loss on magno-, parvo-, koniocellular pathways in the lateral geniculate nucleus and visual cortex in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 22, 465-481 (2003).</li>
<li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+changes+can+we+expect+in+the+brain+of+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Survey+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">What changes can we expect in the brain of glaucoma patients.</a> Survey of Ophthalmology. 52, 122-126 (2007).</li>
<li>Kong, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+aging+and+diet+restriction+on+retinal+function+during+and+after+acute+intraocular+pressure+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Impact of aging and diet restriction on retinal function during and after acute intraocular pressure injury.</a> Neurobiol Aging. 33, 1115-1125 (2012).</li>
<li>Bui, B. V., Sinclair, A. J., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroretinograms+of+albino+and+pigmented+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Aust+N+Z+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Electroretinograms of albino and pigmented guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Aust N Z J Ophthalmol. 26, Suppl 1 98-100 (1998).</li>
<li>Jobling, A. I., Wan, R., Gentle, A., Bui, B. V., McBrien, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+choroidal+TGF-beta+in+the+tree+shrew+model+of+myopia%3A+isoform+expression%2C+activation+and+effects+on+function%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and choroidal TGF-beta in the tree shrew model of myopia: isoform expression, activation and effects on function.</a> Exp Eye Res. 88, 458-466 (2009).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+dark-adapted+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Dissecting the dark-adapted electroretinogram.</a> Doc Ophthalmol. 95, 187-215 (1998).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Prog Retin Eye Res. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hudnell, H. K., Boyes, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparability+of+rat+and+human+visual-evoked+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The comparability of rat and human visual-evoked potentials.</a> Neurosci Biobehav Rev. 15, 159-164 (1991).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+wireless+electroretinogram+and+visual+evoked+potentials+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Conscious wireless electroretinogram and visual evoked potentials in rats.</a> PLoS One. 8, e74172(2013).</li>
<li>Hetzler, B. E., Berger, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine-Induced+Modification+of+Photic+Evoked-Potentials+in+the+Superior+Colliculus+of+Hooded+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Ketamine-Induced Modification of Photic Evoked-Potentials in the Superior Colliculus of Hooded Rats.</a> Neuropharmacology. 23, 473-476 (1984).</li>
</ol>

著者は、この研究に関連する開示を行っていません。

ERGおよびVEPはそれぞれ網膜と皮質からの視覚機能の客観的な尺度です。同時記録​​の利点は、全体の視覚経路のより包括的なビューが与えられるということです。具体的には、それらの同時評価から補足情報は例えば、視神経障害がプライマリ脳萎縮19と共存することができる、ERGはまだ明確なVEPは18症状重複する障害のために（視覚路に損傷部位の鮮明な描写を提供することができ、 20、またはVEP損失）は視覚路21,22にいくつかの場所での怪我の症状によって混乱することができるとき。同時にERGおよびVEPを測定することによって、網膜および皮質応答の間のゲインの指数も導出することができます。これは微妙な病理学的変化を検出するための有用なツールを提供することができます。現在のプロトコルは、一般的に使用される実験用ラットにERGおよびVEP測定を可能にするが、容易に広告することができます他の哺乳動物種23-25 ​​にapted。げっ歯類からERGおよびVEP波形は26-28人間の目で観察された応答のた...

電図（ERG）と視覚誘発電位（VEP）の測定は、視覚経路の完全性の有用な定量的評価を提供します。 VEPは、同じ光のイベント、次の一次視覚野への網膜から視覚経路の対応する機能の完全性を測定しながら、ERGは、光刺激に対する網膜の電気的応答を測定します。この原稿は、一般的に使用される実験用モデル、ラットにおけるERGおよびVEP応答の記録と分析のためのプロトコルについて説明します。 ERGは、光のフラッシュに網膜の総電気​​的応答を定量化することにより、キー網膜細胞クラスの数の機能的完全性の指標を提供します。イオンフラックスの協調一連の光開始によって開始され、オフセット、眼の外側に配置された表面電極を用いて測定することができる電圧の検出可能な変化を生じます。得られた波形がseの組み合わせを表し、振幅、タイミングおよび周波数の異なる明確に定義されたコンポーネントのリース、。研究の実質的な本体は、これらのコンポーネントは、比較的、多くの脊椎動物の網膜を横切って部品を互いに分離することができる保存されていることを示しています。思慮深く刺激（フラッシュ刺激、背景、刺激間隔）の条件を選択し、分析するために合成波形の特定の機能を選択することによって1は網膜細胞1,2の特定のグループの測定値を返すのを確信することができます。これらの特性は、網膜機能の非侵襲的測定として有用性ひいてはERGの広範なアプリケーションの基礎となります。この原稿が正（すなわち、光受容体（PIII成分）、双極細胞（PII成分）と網膜神経節細胞、ERGを測定し、網膜の主要な細胞のクラスのいくつかについての情報を返すために、その機能を解析するための方法論に焦点を当てて暗順応閾値応答またはPSTR）。 3の領域V1に視神経、視索、視床（外側膝状核、LGN）と光学放射を介してシリアルに伝え。げっ歯類では、大多数-それぞれの目のX字形の4から視神経線維の（90〜95％）とは反対側の中脳を支配します。 ERGとは異なり、特定の細胞のクラスにVEPの異なるコンポーネントを帰するようまだできていない、どこにも視覚的な経路に沿って5こうして変更はVEP波形に影響を与える可能性があります。それにもかかわらず、VEPは、ビジュアル性能と視覚路の完全性の有用な非侵襲性の尺度です。 VEPは、ERGと組み合わせて使用される場合、視覚系（ すなわち、網膜/視覚経路）のより完全な評価を提供することができます。 ERGおよびVEP記録は、アプリに応じて、単独で又は組み合わせて実施することができますカチオン。この論文に記載の方法は、網膜と皮質視覚誘発両眼からの電気生理学や麻酔したラットにおける両半球の同時評価を可能にします。これは、より包括的に網膜機能および網膜機能の変化が視覚誘発皮質機能に持つことができる上流の効果を評価するための便利な方法です。

<table><tbody><tr><td>ワニ口クリップ</td><td>ジェネリックブランド</td><td>HM3022</td><td>ステンレス鋼 VEPスクリュー電極をケーブルに接続するための26 mmクリップ</td></tr><tr><td>バイオアンプ</td><td>ADInstruments</td><td>ML 135</td><td>ERGおよびVEP信号を増幅するための</td></tr><tr><td>カルボキシメチルセルロース ナトリウム 1.0%</td><td>アラガン</td><td>CAS 0009000-11-7</td><td>アクティブERG電極の信号品質を改善するための粘性流体</td></tr><tr><td>カルプロフェン 0.5%</td><td>ファイザーアニマルヘルスグループ</td><td>CAS 53716-49-7</td><td>独自の名前:リマジル注射剤(50 mg / ml)。術後鎮痛用、生理食塩水で0.5%(5mg/ml)に希釈</td></tr><tr><td>クロルヘキサジン0.5%</td><td>Orion Laboratories</td><td>27411, 80085</td><td>手術器具の消毒用</td></tr> 循環<tr><td>水浴</td><td>Lauda-K&ouml;nigshoffen</td><td>MGW ラウダ</td><td>手術や電気生理学的記録中に麻酔をかけた動物の体温を維持するため</td></tr><tr><td>歯科用アマルガム</td><td>DeguDent GmbH</td><td>64020024</td><td>電極頭蓋骨アセンブリを包み込み、より堅牢にするため</td></tr><tr><td>歯科用バー</td><td>ストルツインスツルツルメンツ、バウシュ、ロム</td> <td>#E0824A</td><td>直径~0.7mmのミニチュアドリルヘッドで、各半球の頭蓋骨に小さな穴を開けてVEPネジを埋め込み</td></tr>ます <tr><td>ドリル</td><td>ボッシュ</td>・<td>ドレメル300シリーズ</td><td>トレパニング用自動ドリル</td></tr><tr><td>電極リード</td><td>グラステレファクター&nbsp;</td><td>F-E2-30</td><td>銀線電極をアンプに接続するためのプラチナケーブル</td></tr><tr><td>ファラデーケージ</td><td>カスタムメイド</td><td></td><td>暗順応を維持するための耐光性を確保します。信号対雑音比を改善するためにGanzfeldのセットアップを囲</td></tr>みます <tr><td>ガーゼ綿棒</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd</td><td>57-100B</td><td>手術中に外科的切開部と露出した頭蓋骨表面を乾燥させるため</td></tr><tr><td>Ganzfeld積分球</td><td>測光ソリューション国際</td><td></td><td>カスタム設計の光刺激装置:直径36mm、開口部サイズ13cm</td></tr>ベル<tr><td>クロ</td><td>ベルクロオーストラリアPty Ltd</td><td>ベルクロブランド 再利用可能</td><td>記録プラットフォーム上の電極と動物を固定するためのラップ面ファスナー</td></tr><tr><td>イソフルラン 99.9%</td><td>Abbott Australasia Pty Ltd</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>専有名:イソフロ(TM)吸入麻酔薬。VEP電極インプラント手術用酸素ガス混合薬剤用吸入麻酔薬</td></tr><tr><td>ケタミン&nbsp;</td><td>Troy</td><td>Laboratories Ilium Ketamil</td><td>専売名:Ketamil Injection、ブランド:Ilium。電気生理学的記録のための医薬品グレードの麻酔薬</td></tr><tr><td>Luxeon LEDs</td><td>Phillips Lighting Co.</td><td></td><td>光刺激には、20個の5Wと1個の1WのLEDがあります。</td></tr><tr><td>マイクロマニピュレーター</td><td>ハーバード装置</td><td>BS4 50-2625</td><td>記録中にERGアクティブ電極を保持します</td></tr><tr><td>ニードル電極</td><td>グラステレファクター&nbsp;</td><td>F-E2-30</td><td>ERGとVEPの両方の接地電極として機能するために尾部に皮下挿入</td></tr><tr><td>フェニレフリン2.5%ミニムス&nbsp;</td><td>ボシュロム</td><td>CAS 61-76-7</td><td>Tropicamideを点滴してERG記録のための最大の拡張を達成するために</td></tr><tr><td>Povidoneヨウ素10%</td><td>Sanofi-Aventis</td><td>CAS 25655-41-8</td><td>Proprietory name:Betadine、手術のための剃った皮膚を準備するための防腐剤 10%、500ミリリットル</td></tr>の<tr><td>Powerlabデータ収集システム</td><td>ADInstruments</td><td>ML 785</td>は<td>、LEDプロキシ</td></tr><tr><td>メタカイン0.5%</td><td>アルコンラボラトリーズを制御します&nbsp;</td><td>CAS 5875-06-9</td><td>ERG記録中の角膜麻酔用</td></tr><tr><td>生理食塩水</td><td>Gelflex</td><td></td><td>非注射可能、電気めっき用銀線電極</td></tr><tr><td>スコープソフトウェア</td><td>ADInstruments</td><td>version 3.7.6</td><td>Powerlabシステムを介して刺激を同時にトリガーし、データを収集します</td></tr><tr><td>銀(細い丸いワイヤー)</td><td>A&Eメタル</td><td>0.3 mm</td><td>アクティブおよび非アクティブERG電極、および非アクティブVEP電極</td></tr><tr><td>ステンレスストリールネジの製造に使用されます&nbsp;</td><td>MicroFasterners</td><td></td><td>0.7 mmシャフト直径、長さ3 mmは、一次視覚野に埋め込まれ、アクティブなVEP電極として機能します</td></tr><tr><td>固定装置フレーム</td><td>David Kopf</td><td>Model 900</td><td>Paxinos &ワトソンの2007年ラット脳アトラス座標</td></tr>外科<tr><td>用ブレード</td><td>スワンモートン株式会社</td><td>0206</td><td>VEP電極を埋め込むために一次視覚野を覆う皮膚の領域を切開するため</td></tr><tr><td>縫合</td>糸 <td>上海浦東金環医療製品有限公司</td><td></td><td>3-0 絹編組縫合糸 非吸収性、VEP電極移植手術中の皮膚収縮用</td></tr><tr><td>トブラマイシン眼軟膏 0.3%</td><td>アルコンラボラトリーズ&nbsp;</td><td>CAS 32986-56-4</td><td>専有名:Tobrex。手術後に皮膚の傷の周りに適用される予防的抗生物質軟膏</td></tr><tr><td>トロピカミド0.5%</td><td>アルコンラボラトリーズ&nbsp;</td><td>CAS 1508-75-4</td><td>専有名:0.5% ミドリアシル点眼薬、ERG記録のための散瞳を達成するために点滴</td></tr><tr><td>キシラジン</td><td>トロイ研究所</td><td>イリウムキシラジル-100</td><td>電気生理学的記録のための医薬品グレードの麻酔薬</td></tr><tr><td>ピペットチップ</td><td>Eppendorf Pty Ltd</td><td>0030 073.169</td><td>Eppendorf epTIPS 100 - 5,000 ml、カスタムメイド電極用</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel</td><td>Microsoft</td><td>データ分析のためのバージョン2010</td><td>スプレッドシートソフトウェア</td></tr><tr><td>Lethabarb Euthanazia Injection、</td><td>Virbac(オーストラリア)、Pty Ltd</td><td>LETHA450</td><td>325 mg / ml、ペントバルビタールナトリウム、迅速な安楽死</td></tr></tbody></table>

麻酔ラットにおける電図および視覚誘発電位の同時記録

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

網膜電図(ERG)と視覚誘発電位(VEP)は、視覚経路の完全性を評価するために一般的に使用されます。ERGは光刺激に対する網膜の電気的応答を測定し、VEPは、同じ光イベントに続く網膜から一次視覚野への視覚経路の対応する機能的完全性を測定します。ERG波形は、さまざまな網膜ニューロンおよびグリア細胞クラスからの応答を反映する成分に分解できます。VEP波形の初期の成分は、視神経と高位皮質中枢の完全性を表しています。これらの録音は、アプリケーションに応じて、単独で行うことも、一緒に行うこともできます。この論文で説明されている方法論は、両眼と両半球からの網膜と皮質の視覚誘発電気生理学の同時評価を可能にします。これは、網膜機能をより包括的に評価し、網膜機能の変化が視覚誘発皮質機能に及ぼす可能性のある上流の影響を評価するための有用な方法です。

ERG波（&gt; -1.38ログcd.sm -2）、B波（&gt; - 4.99ログcd.sm -2）のSTR（&lt; - 4.99ログcd.sm -2）とVEPに（&gt; - 0.52 cd.smを記録-2）（ 図1および3）を同時に記録しました。非常に薄暗い点滅で約220ミリ秒（ 図1および図2）では、正のSTR（PSTR）をフラッシュした後、約110ミリ秒を見られて、負のSTR（NSTR）。大B波とのERG、そのPII応答を分析することができる適度なフラッシュの発症後50〜100ミリ秒の間のピーク（ 図1および図2）。この刺激エネルギーで、ピークの前に負の波は無視できます。明るく発光エネルギーでは負のたわみ波はPIII応答（ 図2）を用いて定量することができる、より顕著になります。続い - ;暗所視のVEP波形は否定応答（70ミリ秒ウィン...

このプロトコルは、麻酔をかけたラットにおける網膜電図と視覚誘発電位の同時測定を説明しています。

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

本手順の目的は、ラットにおいて網膜電図（ERG）と視覚誘発電位（VEP）を同時に測定することです。この手法は、加齢や疾患が視覚路の特定の構成要素にどのような影響を及ぼすかなど、視覚神経科学分野における重要な課題の解明に寄与します。この手法の主な利点は、網膜機能および、それが視覚誘発皮質機能に及ぼす上流への影響を包括的に評価できることです。本手順を開始するために、70 mmの長さの銀線を切り、ラットの眼を囲むように直径8 mmのループを形成して、特製のERG不活性電極をあらかじめ作製します。1 mmのパイプヘッドチップ上で成形し、均一な円形に整えてループのサイズを調整してください。リングが小さすぎると関節内圧を不注意に上昇させる可能性があり、一方で大きすぎると信号のばらつきが増大するため、これは重要です。次に、70 mmの長さの銀線をカットして、カスタムメイドのVEP不活性電極をあらかじめ作製します。そして、ラットの切歯に掛けるために、直径8 mmの楕円形に成形します。次に、30 mmの長さの銀線を切断して特注のERG活性電極を予備的に作製し、直径約1〜2 mmの小さなループを形成します。これにより、角膜擦過を最小限に抑えつつ、ラットの角膜に緩やかに接触させることができます。その後、銀線を露出した内部導線に巻き付けて、電極を電極リードにしっかりと固定します。光起電アーチファクトを低減させるため、露出した余分な金属部分はマスキングテープで絶縁します。ERG活性電極については、マスキングテープをさらに重ねて貼り、巻き付けを厚く剛性を持たせることで、マイクロマニピュレーターで電極を保持しやすくすることができます。各ERG不活性電極には、齧歯類用ネックストラップに安定して固定できるよう、マスキングテープの上に面ファスナーの小さな破片を貼り付けます。次に、各VEP活性電極のリード線の内側ワイヤにアリゲータークリップを取り付けます。記録の直前に、信号伝導性を向上させるため、銀線の露出部分に塩化物を電気メッキします。その手順として、カソードを電池の負極に接続し、もう一方の端を生理食塩水に浸します。続いて、アノード線の銀チップを生理食塩水に浸し、この電極線のもう一方の端を9V電池の正極に接続します。20秒後に切り離すと、電極線の銀色の先端が均一に白くコーティングされているはずです。すべての銀製ERGおよびVEP電極に対して、この塩素化処理を繰り返します。この手順において、麻酔下にある動物の除毛部位を10%ポビドンヨードで3回消毒してください。メスを用いて頭部の正中線に沿って正中切開を行い、直径20mmの皮膚組織を円状に切除して頭蓋骨を露出させます。次に、ガーゼで掻き取り、乾燥させて下層の骨膜を除去し、冠状縫合と矢状縫合を露出させます。その後、両半球の頭蓋骨に2箇所の穴をドリルで開けます。しっかりと固定するため、あらかじめ開けておいた2つの穴にステンレス製ネジを深さ1 mmまでねじ込みます。次に、ガーゼで頭蓋骨を乾燥させ、2本の縫合糸で皮膚を牽引して、歯科用アマルガムによる処置のために手術部位を準備します。その後、露出した頭蓋骨上に歯科用アマルガムを塗布してネジ電極を固定し、記録用にネジが約1.5 mm露出するようにします。その後、牽引縫合糸を取り除きます。暗所記録の場合、すべての手順は暗室で実施します。ここでは、説明のために電極の配置を通常の室内照明の下で行っています。動物を12時間暗順応させた後、ケタミンとキシラジンで麻酔をかけました。瞳孔を散瞳させ、局所麻酔を施した後、不活性VEP電極を下顎切歯に掛けます。その後、ファラデーケージ内に設置されたガンツフェルトボウルの前にあるERGプラットフォームに動物を配置します。マジックテープを項（うなじ）に、しっかりしつつも締め付けすぎないように巻き付け、動物をプラットフォームに固定します。次に、強膜リングを眼球赤道部の周囲に非侵襲的に配置し、ERG不活性電極を設置します。これは角膜輪部から約3 mm後方になります。電極を項部のマジックテープに固定して安定させます。対側眼についても同様の手順を繰り返します。次に、ワニ口クリップを頭蓋内にあらかじめ埋め込まれたステンレス製ネジに取り付け、VEP活動電極を固定します。ERG能動電極を配置する前に、信号品質を向上させるため、1%カルボキシメチルセルロースナトリウムを電極に少量滴下します。カスタムメイドのステレオタキシスアームに取り付けられたマイクロマニピュレーターを使用して、ERG能動電極が角膜中心表面に軽く触れるように配置します。余分な液を拭き取り、カルボキシメチルセルロースナトリウムが強膜ではなく角膜にのみ接触していることを確認してください。次に、ステンレス製の接地針電極を尾部の皮下に2〜5mm挿入します。プラットフォームをガンツフェルトボウルの近くまでスライドさせ、両方の網膜に均一に光が照射されるよう、動物の目がボウルの開口部と一致していることを確認します。その後、外部ノイズを低減するためにファラデーケージを閉じます。上記のプロトコルを用いて、さまざまな刺激に対するERG波形のスタックを記録でき、最も暗いフラッシュが下部に、最も明るいフラッシュが上部に表示されます。非常に低い光レベルでは、暗所閾値反応を記録できます。刺激の輝度が増すにつれて、波形はB波が支配的になり、その後、最も明るい刺激において陰性のA波が出現します。桿体光受容体機能は、P3を用いてA波をモデル化することで評価できます。この図は、刺激エネルギーの増加に伴いP2振幅が増大することを示しています。桿体双極細胞機能は、桿体P2の強度応答理論をNaka-Rushton関数でモデル化することで評価できます。網膜神経節細胞の機能は、低い光エネルギーで測定し、pSTRのピーク振幅とタイミングによって定量化します。錐体双極細胞の機能は、ペアフラッシュ・パラダイムを用いて誘発し、錐体P2のピーク振幅とタイミングによって定量化します。VEPの振幅解析では、ピークからtroughまで、およびtroughからピークまでの振幅を測定することで、これらの応答のタイミングを算出します。刺激エネルギーが増加するにつれて、VEP波形の振幅は増大します。習熟すれば、電極の準備、電極の配置、および暗順応にかかる時間を除き、この手法は約30分から45分で完了できます。この手順を行う際は、電極をいかに正確に配置するか、および暗順応に十分な時間をかけることに特に注意することが重要です。本手順に続いて、特定の疑問を解決するために、疾患モデルの作成や治療などの他の処置を行うことができます。このビデオを視聴することで、電極の準備と配置方法、およびERGとVEPの波形の記録・解析方法について十分に理解できるはずです。

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JoVE Journal

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神経科学

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げっ歯類の外科的緑内障に対する辺縁血管神経叢の全周焼灼

学ぶ 麻酔ラットにおける電図および視覚誘発電位の同時記録法。網膜機能と視覚皮質処理を包括的に評価し、加齢や疾患による視覚経路への影響を解明する神経科学研究に有用です。

麻酔ラットにおける電図および視覚誘発電位の同時記録

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