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DOI: 10.3791/54244-v
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マクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)分化ヒト単球由来マクロファージの細胞培養のためのプロトコールが提示されます。このプロトコルは、単球の凍結保存とマクロファージへのバルク分化を組み合わせて利用します。その後、回収したマクロファージを、実験に必要な細胞密度の培養ウェルに播種することができます。
この手順の全体的な目標は、単球の利用可能性を改善し、MCSFがヒトの血液単球のマクロファージへの分化を誘導する際に得られる細胞密度の変動を最小限に抑えることです。この方法は、ヒトマクロファージの生物学に関する重要な質問に答えるのに役立ちます。この戦術の主な利点は、ヒト単球由来のマクロファージ培養物を、ドナーの利用可能性への依存度を抑えて容易に入手できることです。
さらに、所望のマクロファージ細胞密度および均質な培養物を一貫して達成することができる。この手順を開始するには、ヒトドナーから白血球アペレーシスによって単核細胞を取得し、次に単核細胞の連続的な向流遠心水簸によって単球を濃縮します。その後、血球計算盤を使用して細胞をカウントします。
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