A Simple Flow Cytometric Method to Measure Glucose Uptake and Glucose Transporter Expression for Monocyte Subpopulations in Whole Blood

Clovis S. Palmer; Joshua J. Anzinger; Tiffany R. Butterfield; Joseph M. McCune; Suzanne M. Crowe

doi:10.3791/54255

シンプルなフローサイトメトリー法は、全血における単球亜集団のためのグルコース取り込みおよびグルコ...

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Immunology and Infection

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A Simple Flow Cytometric Method to Measure Glucose Uptake and Glucose Transporter Expression for Monocyte Subpopulations in Whole Blood

シンプルなフローサイトメトリー法は、全血における単球亜集団のためのグルコース取り込みおよびグルコーストランスポーターの発現を測定するために

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06:28 min

August 12, 2016

DOI: 10.3791/54255-v

Clovis S. Palmer^1,2,3, Joshua J. Anzinger⁴, Tiffany R. Butterfield⁴, Joseph M. McCune⁵, Suzanne M. Crowe^1,2,6

¹Centre for Biomedical Research,Macfarlane Burnet Institute for Medical Research and Public Health, ²Department of Infectious Diseases,Monash University, ³Department of Microbiology and Immunology,University of Melbourne, ⁴Department of Microbiology,The University of the West Indies, ⁵Division of Experimental Medicine, Department of Medicine,University of California, San Francisco, ⁶Department of Medicine,Monash University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

単球は、活性化時に解糖代謝に依存する人間の自然免疫系の不可欠な構成要素です。新鮮な全血中の全単球および単球亜集団によるグルコーストランスポーターの発現とグルコース取り込みを測定するためのフローサイトメトリープロトコルについて説明します。

この方法論の全体的な目標は、さまざまな単球亜集団でのグルコースとそのトランスポーターの取り込みを測定することです。この方法は、疾患転帰における免疫細胞代謝の重要性は何かなど、免疫学分野の重要な質問に答えるために使用できます。これらの技術の主な利点は、迅速で実行が容易で、反応性材料を必要とせず、少量の血液しか必要としないことです。

血液サンプルを収集してから1時間以内に、クエン酸ACD-B抗凝固チューブで、サンプルを生物学的安全キャビネットに入れます。次に、各サンプルから100マイクロリットルの血液を個々のポリプロピレンチューブに加え、氷上で2ミリリットルの1X溶解溶液で細胞を処理し、ピペッティングで穏やかに混合します。15分後、細胞を遠心分離し、これに続いて洗浄バッファーでさらに2回スピンします。

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