Name: マウスにおける高次反復行動のための電位アッセイとして新規物体探査 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 28 s
Description: 学ぶ新規物体探査アッセイを用いたマウスの高次反復行動の評価法。事前訓練不要で不安を引き起こさず、自閉症モデルの検証に有用な神経科学行動解析手法を習得できます。

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著者らは、夏の学部研究プログラム、アカデミックテクノロジーユーザーグループ、デジタル学習センター、レッドランズ大学の科学センターを承認したいと思います。 著者らは、ルーYangoのメモリにこの論文を捧げたいです。

ここで説明するプロトコルは、レッドランズ大学の施設内動物管理使用委員会によって承認されました。 C58、C57、およびこれらの研究で使用されるFVBマウスは、もともとジャクソン研究所（バーハーバー、ME）から入手したストックから大学レッドランズのビバリウムで飼育しました。このビバリウムからセンチネルは、半年ごとにスクリーニングし、病原体の自由であることが判明しました。 1.機器・ルームセットアップ注：私たちは、新規オブジェクトのテストのために二つの異なるアリーナを使用：41センチメートルのベース直径を有する透明なプラスチック製の長方形のケージを（45センチメートルのx 24センチメートル×20センチ）または不透明な円形ケージ。しかしながら、任意のケージを使用することができます。ピアソンらは、そのアッセイにおいて小さい矩形ケージ（20 cmの×30 cmの×20センチ）を使用しました。この具​​体的な実験設計から詳細は下記含まれていますが、このアッセイの新規性を与えられて、説明変数のいずれかのための行動表現型のフィールド内には受け入れられた規格はありません。 <ol><li&gt;はトウモロコシ穂軸寝具の中で約1/2で試験領域を埋めます。 </li><li>四つの異なる新たなオブジェクトを選択します。洗浄を容易にし、形状と色の咀嚼互いに異なるに抵抗する高密度プラスチックで構成され、ほぼ同じ大きさの4つのオブジェクトを選択します。重要なのは、その試験マウスは、アッセイで実行されるまで、これらのオブジェクトにさらされないようにします。 注：たとえば、ピンクのおもちゃのレンガ、赤い猿、青の書き込みと白のタイルと標準白色ダイは、ここで使用しました。 </li><li>長方形の分野では、これらのオブジェクトのコーナーから約3cmを配置します。ラウンドアリーナでは、それらが等しい互いからの距離や側面から約10cmであるようにオブジェクトを配置します。別の番号、1-4（ 図1）のように、各オブジェクトの配置を記録します。オブジェクトは、テスト全体にランダムまたは相殺順に配置されていることを確認してください。 </li><li>テストの真上にカメラを置きます順化及び試験期間中にアリーナ全体を記録するアリーナ。 注意：潜在的にテスト中に活性レベルと探査に影響を与えることができるマウスと同じ部屋に捜査を持ちます。 </li></ol> 2.新規物体探査テスト<ol><li>約100ルクスでの蛍光灯で照明室内の光サイクルの開始時にテスト。照明はビデオ録画しながら外観を標準化するために試験領域全体に均一であることを確認してください。 </li><li>試験領域の底に既知の寸法のノートカードを置き、ビデオ録画を開始します。 </li><li>順応期間として機能するように10分間、空試験領域に試験マウスを転送します。動画の記録順応期間。 </li><li>順応期間の後、すぐにテストアリーナに4小説オブジェクトを追加し、さらに10分間のマウスの行動を記録し、アリーナでマウスを残します。 </li><li>完全な20分順化/テストPEいったんriodが経過した、そのホームケージ、徹底的にきれいに試験マウスを返し、無香皿の石鹸と水で、新規オブジェクトや試験領域を乾燥させます。 </li></ol> 3.ビデオ得点<ol><li>信頼性を容易にするためにビデオを使用して、すべての行動スコアリングを完了します。 注意：行動ロギングソフトウェアNoldusザ・オブザーバーは、ここで説明したようにステップ22を実行するために使用されたが、専門的なプログラムは必要ありません。 <ol><li>最初のビデオを採点する前に、新しいプロジェクトを作成したり、既存の、同様のプロジェクトを編集して行動ロギングソフトウェアでのプロジェクトの符号化方式を設定します。 <ol><li>プロジェクトセットアップボックス内にデータ収集を設定する」オフライン観測」。行動の中で「国家のイベント」として、ボックス、プログラム「スクラブル」をコーディング」掘り」、「飼育」、「グルーミング」と「スニフオブジェクト1、2、3、4」。 「ポイントイベント」などの番組「ジャンプ」。注：定義これらの行動のための他の場所11に詳細に記載されています。 注：ポイントイベントは、単にカウントデータを収集する一方、国家のイベントは、スタートを持っていると時間を停止します。各個別の行動のためのキーストロークは、ソフトウェアによって生成され、これらに対応するキーストロークは、二次キーボード（ステップ3.1.2）にプログラムされています。 </li><li> 、二次キーボードをプログラムするキーボードソフトウェアを開き、画面に表示された適切な二次キーボードボタンをクリックし、適切なキーの組み合わせを入力し、[OK]をクリックします。二次キーボードがプログラムされたら、コンピュータのバックグラウンドで実行するプログラムなどのソフトウェアを閉じます。 </li></ol></li><li>プロジェクトとが設定されると、数および後部の持続時間（両方の前足のように定義されたアリーナの壁に置かれている）を獲得するために行動ロギングソフトウェアを使用して、マウスがに穴を掘るの2前足のように定義された（掘りますmと定義されたアリーナの寝具）、自己新郎（自分自身の体および/またはその前足で顔のどの部分に触れるマウス）​​の任意の領域を舐め、そしてジャンプウーズ（マウスの飼育と定義され、すべての4つの足が同時に地面を離れているように、次に）ジャンプ。 <ol><li>ビデオを得点、[ファイル]&gt; [プロジェクトを開くと、その後観察する&gt;観測&gt;新規。プログラムは、ファイル名の入力を要求します。名前の後は、適切なビデオのメディアファイルを選択します。 </li><li>観測を開始]ボタンをクリックしてスコアリングを開始します。 注：マウスの​​反復的な行動をスコアリングすると、すべての状態イベントは、動作の開始に対応する第1および第2の行動の端部に対応する、2キーストロークが必要です。ポイントイベントは、唯一のキーストロークが必要です。 </li></ol></li><li>マウスが各オブジェクトを嗅い回数をスコア。スニフは、マウスがオブジェクトから0.5 cm以内にその鼻を移動させ、任意の時間として定義されています。 REPET同じように行動ロギングソフトウェアを使用して、スニフ期間を測定しますitive動作期間は（ステップ3.1.2）で測定しました。 <ol><li>マウスがオブジェクトを盗聴するたびに、10分の試験期間（ 例えば 1243421 ...）の終わりまでの数字の文字列につながる対 ​​応する位置の数を記録します。手動でこれらのデータを記録します。 注：動画を得点しながら、数字は常にオブジェクトを、指​​定された位置にない対応し、効率性と一貫性を容易にするために。 </li><li>マウスがオブジェクトを盗聴した場合、その倍の数をカウントし、再びオブジェクトを盗聴、離れて見えます。 </li><li>完全な10分の映像が得点した後、行動分析]&gt; [新規]&gt; [分析をクリックすることで、データを視覚化。いったんデータをエクスポート、画面に表示されるか、コピーして、別々のスプレッドシートに貼り付けます。 </li></ol></li><li>マウスは試験中にアリーナ内の総走行距離を記録します。 注：試験マウスを追跡し、センチメートルで移動する合計距離を記録するために較正されたビデオ追跡ソフトウェアは、使用されましたこのステップを実行します。ビデオトラッキングソフトウェアによってスコアのすべてのビデオは、ビデオの開始時にアリーナに配置された既知の寸法のノートカードを持っていました。 <ol><li>ノートカードのそれぞれの端に沿って検量線を設定し、ソフトウェアのキャリブレーション画面内の適切な長さを入力することにより、ソフトウェア内の各ビデオを較正するためにノートカードを使用してください。線が描かれると、入力既知の長さと、各行に対応し​​てノートカードの幅。 </li><li>アリーナの設定の中で、アリーナ全体を選択します。 注： 例えばのために、対中心を通る壁に沿ってマウスの動きに関心があった場合は競技場の別々の領域がソフトウェアで区別することができます。 </li><li>試用コントロール設定の中で、10分の持続時間を選択します。検出設定では、明るい背景に暗い被写体を選択します。 注：アルビノマウスが使用された場合は背景が暗い影であった場合、これを変更する必要があります。 </li><li>設定一回動画をスコア、プログラムされています。買収&gt;開く取得]をクリックします。取得コントロールボックスで、新しい試みをクリックしてから試用を開始。 10分が経過した後、プログラムは停止し、データを視覚化することができます。 </li><li> &gt;計算統計の分析]をクリックします。いったんデータをエクスポート、画面に表示されるか、コピーして、別々のスプレッドシートに貼り付けます。 </li></ol></li></ol></li></ol> 4.統計分析、シーケンシング<ol><li>各マウスによって生成された調査をオブジェクトに対応する数字の文字列の中で、繰り返し番号なしすべての可能な3桁の組み合わせ（ 例えば 121、123、124ではなく112または122）の合計数を識別します。 注：Pythonプログラミング言語で書かれたプログラムは、それぞれの可能な配列は、数字の文字列に出現する回数を識別するために使用されました。外部プログラムを使用する必要がなく、このステップは、多くの異なる方法を完了することができる（ 例えば、使用しますMicrosoft WordやExcelの検索機能）。 </li><li>各シーケンスが発生する回数を記録し、各マウスのための3つの最も頻繁に繰り返し配列を同定します。 注：個々の配列は、マウスによって異なりますし、実際の配列は、配列が繰り返された回数よりも少ない金利（ すなわちパターンとの密着性がパターンそのものよりも重要である）です。 </li><li>シーケンスの総数は、マウスの反復は活動レベルに積極的に相関するので、それぞれの個々のマウスのためのパターンの総数で最も頻度の高いパターンの量を分割することにより、これらの値を修正します。これは、全体的な活動とは独立した反復配列のインデックスが得られます。 </li><li>各マウスは、適切なANOVA、（ 例えばためのダネット検定）多重比較手順を使用して、グループや事後テスト間（活動レベルについて補正）その最も一般的なシーケンスを繰り返す回数を比較してください。 </li></ol><ol><li> （ステップ3.1.3.1）上に生成された番号の同じ文字列を使用して、1秒の合計数をカウントして、各オブジェクトを調べた、すなわち合計回数をカウントすることにより各マウスの新規オブジェクトの嗜好を特定し、2秒、3秒、およびデータの文字列に4秒。活動レベルのため、上記のようにANOVAを経由して比較正しい（4.3から4.4ステップ）。 注：これらのメソッドは、私たちの研究室22から発行され、説明ここピアソンらに大きく基づいている17。 </li></ol>

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</ol>

著者らは開示するものは何もない。

ここで、我々は、ヒトにおける反復行動高次のための表面的妥当性を持つマウスの行動を定量化するために有用である可能性が最近開発されたアッセイを提示します。バーンズまたはT迷路のようなより確立されたアッセイとは異なり、この新規物体探索アッセイは、任意のマウスの訓練を必要とせず、また挑発特に不安です。さらに、新規物体探索は、関心、のCFM.rrbの行動に、より焦点を可能にし、結果を歪める交絡変数の可能性を減少させること、食べ物や社会的刺激を必要としません。さらに、異なるマウス株は株はまた、新規オブジェクト探査アッセイ17,22で上昇し、パターニング探査とオブジェクトの好みを示す上昇下位のCFM.rrbを実証して、このアッセイでは、差動動作を示しません。このように、このアッセイは、ヒトでのCFM.rrbに優れた顔の有効性を有すると思われます。アッセイは、将来の研究者によって変更された場合、そのままに有益であろう上記の利点、すなわち必要な訓練の欠如と不安を誘発する刺激の最小化に留意。アッセイで使用される新規オブジェクト（セクション1.2）の選択が極めて重要です。オブジェクトは、清掃が容易であるが、外観ははっきりと同じサイズであ...

社会的障害、困難言語を介して通信して、その繰り返しのパターン化された行動1：自閉症スペクトラム障害（ASD）は、3つの中核症状からなる神経発達障害です。 2000年以来、ASDと診断された個体の数は、10年2のスパンで68で1に150に1から増加しています。疾患の有病率は増加し続けているが、障害の原因は、まだ知られていません。これらのモデルは、ASDの根本的な症状や原因の増加の理解につながる可能性として、ASDのコアとそれに関連する症状に応じて適切なマウスモデルを識別するための努力の上昇がありました。反復行動3を含むASDの中核症状のための表面的妥当性と行動を表示するように表示される複数の近交系マウス系統があります。 制限付き、反復行動（のCFM.rrb）は、ASDのようないくつかの精神疾患の中核症状です。CFM.rrbは、障害4の重症度に高めることができ、かつ大幅に影響を受けた個人のライフスタイルを混乱させることができます。 CFM.rrbは一般に二つのカテゴリー、ヒトでは、このようなロッキングと手羽ばたきなどのアクションで構成され、下位反復行動、中に配置されています。ルーチンと抵抗に厳守で構成されて高次反復行動は、5-8を変更します。 下位反復行動は広く、彼らは簡単に9を設定し 、実験室で観察することができるモータ常、として現れるげっ歯類で研究されてきました。これらの行動は、ヒトでのCFM.rrbのための良好な表面的妥当性、および潜在的に強力な構成概念妥当性だけでなく10を有するように見えます。下位のCFM.rrbの存在のためのテストは、これらのモータ常11の発作と期間を研究するためにマウスの活動の映像監視を経て完成することができます。高次反復行動は、基本的な生物医学再ための課題を提起しますこれらのCFM.rrbとして簡単な観察で識別されていないとして、げっ歯類を用いて検索します。これらの行動を特定することが困難に、より高次の反復的な行動のための少数の確立されたアッセイが存在します。伝統的には、高次のCFM.rrbは、試験動物が逃げるに能力に到達するように訓練された迷路のパラダイムを用いてげっ歯類において測定されました。逃げ場所が次に切り替えられ、逃げ場所を再学習するのに必要な試験の数が12に記録されています。これらのアッセイは、彼らが長い訓練期間を必要とする、多くの場合、不安を誘発し、非常に可変な結果をもたらすことが理想的ではありません。ホールボード探査も高次のCFM.rrb 13,14を定量化するために使用されてきました。このアプローチは、拡張されたトレーニングセッションを必要としませんが、食品のモチベーションおよび/または嗅覚差別に依存していません。不安惹起されないか、訓練を必要とする高次のCFM.rrbについてのアッセイは、正孔ボードの既存のレパートリーに素晴らしい補完するだろうexploratio<html>現在使用中のnと迷路に基づくアッセイ。 C58 / J（C58）近交系マウス系統が強くASD、すなわち繰り返し、目的のないモータ常と自己グルーミング3,11のレベルの上昇に関連した常同行動の高いレベルを例示しています。さらに、C58マウスは、バックフリップと11,14,16を scrabbling、飼育の高いレベルを介してのCFM.rrbを表示します。この株は早期新生児期にこれらの動作を示す始まり、成人期を通して、それらを表示し続けます。この株だけでなく、他のマウス系統に存在する十分に立証された下位のCFM.rrbを補完するために上昇し、高次のCFM.rrbの存在をテストすることができることが理想的です。新規物体探索アッセイは、ここで説明し、それがパターン化された行動だけでなく、反復運動常を測定する能力を与えるように、研究者が同時に下位と上位のCFM.rrbを観察する機会を提供します。 高次反復行動のためのアッセイは、ピアソンらによって開発されたとして、新規物体探索を使用してe_content &quot;&gt; 17。この新しい評価では、4つの新たなオブジェクトの追加で十分に確立されたオープンフィールド試験18-21の延長でありますアリーナ。マウスは自由にこれらの不慣れなオブジェクトを調査させ、物体の調査の数及び順序を追跡した。目的の調査は、その後BTBRマウスは、オブジェクト間のパターン化された調査の高められた数値を表示して、パターンの存在について分析した。これを使用して不要な刺激を取り除くだけでなく、行動を学習する必要性を排除しながらアッセイは、マウスは、より高次の繰り返しやパターン化行動を表示することができます。新規オブジェクトの探査は、高次のCFM.rrbを誘導し、それはマウスがその自然の探査を通じてパターンやフォームのシーケンスを作成することができますようにこのアッセイを使用する研究者は、これらの高次のCFM.rrbの存在を定量化することができます。 ピアソンら 。このアッセイを開発し、興味深い結果17で、BTBR近交系マウス系統における潜在的な高次反復行動の存在をテストするためにそれを使用。我々は最近、C58、C57BL / 6J（C57）およびFVB / NJ（FVB）株の行動を見てフォローアップ調査、ならびに、このアッセイに存在する潜在的な交絡変数へのより詳細な調査、および可能性を発表していますデータを分析する統計的アプローチは、22を生成しました。

<table><tbody><tr><td>標準的なポリカーボネート製げっ歯類ケージ(45 cm x 24 cm x 20 cm)</td><td></td><td></td><td>複数のマウスのテストを容易にするためには、複数のケージが望ましいです。</td></tr><tr><td>プラスチック不透明円形テストアリーナ(ベース直径41cm)</td><td>United States Plastic Corp.</td><td>13931</td><td>複数のマウスのテストを容易にするためには、複数のアリーナが望ましい&nbsp;</td></tr><tr><td>標準的なトウモロコシの穂軸げっ歯類の寝具</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>の小説オブジェクト - 赤い猿</td>ハズブロ、<td>猿のバレルから</td><td>ポータケットRI</td><td></td></tr><tr><td>小説オブジェクト - 長方形の2 x 4 LEGO</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>小説オブジェクト - タイル</td>Thinkfun Inc.、<td>トゥートとオットーの</td>ア<td>レクサンドリアVA</td><td></td></tr>の<tr><td>小説オブジェクト - 標準的な白いダイ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ビデオカメラ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>行動ログソフトウェア - オブザーバー</td><td>ノルダス、ワーヘニンゲン、オランダ</td><td>他のプログラムは、</td><td></td></tr><tr><td>ビデオ追跡ソフトウェア - EthoVision</td><td>ノルダス、ワーヘニンゲン、オランダ</td><td>他のプログラムは、</td>Xキー入力キーボード P.I.エンジニアリング、ウィリアムズタウンMI 829484 MacroWorksのIIのPIエンジニアリングを使用することができます<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>ウィリアムズタウン、ミシガン州</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

マウスにおける高次反復行動のための電位アッセイとして新規物体探査

Novel Object Exploration as a Potential Assay for Higher Order Repetitive Behaviors in Mice

制限された反復行動(RRB)は、自閉症スペクトラム障害(ASD)の中核的な特徴であり、影響を受けた人々の生活を混乱させます。 RRBは一般的に低次成分と高次成分に分けられ、低次RRBは運動ステレオタイプで構成され、高次RRBは固執行動とシーケンシング行動で構成されます。 高次RRBは、マウスでモデル化するのが困難です。 マウスにおけるRRBの現在のアッセイは、主に低次成分に焦点を当てているため、高次RRBの潜在的な治療や介入に関する基本的な生物医学研究は困難になっています。 ここでは、新しいアッセイ、新しい物体探索について説明します。 このアッセイでは、4つの新しいオブジェクトが周囲に配置された基本的なオープンフィールドアリーナを使用します。 テストマウスはアリーナを自由に探索することができ、マウスが新しいオブジェクトを調査する順序が記録されます。 これらのデータから、パターン化された探索のシーケンスを同定することができ、各マウスに最も好ましい物体を特定することができます。ここで共有した代表的なデータと、新規オブジェクト探索アッセイを用いた過去の結果は、近交系マウス系統がこのアッセイで異なる挙動を示し、低次RRBが上昇した系統もパターン化された挙動を示すことを示しています。 このように、新規オブジェクト探索アッセイは、ヒトの高次RRBに対して良好な顔の有効性を持っているように思われ、ASDの新規治療法を調査する将来の研究にとって貴重なアッセイになる可能性があります。

メスC58 / Jマウスではなく、長方形の舞台で、ラウンドアリーナで他の株よりも配列決定されたパターン（ 図2、パネルA）の高い数を表示された代表データ22を示した （ 図2、パネルC）。男性3株のいずれも、互いに（ 図2、パネルBおよびD）とは異なっていません。代表的なデータは、男性と女性の両方のC58 / Jマウスがラウンドアリーナ（ 図3、パネルAおよびC）での最も訪問されたオブジェクト（およびその後、その少なくとも訪問したオブジェクトのためのより低い優先順位）のための強い好みを表示することを示しているではなく、長方形のアリーナ（ 図3、パネルBおよびD）です。 <img alt="図1" src="/files/ftp_u...

高次の制限された反復行動(RRB)は、影響を受けた人々の生活を混乱させます。 これらの行動はげっ歯類でモデル化するのが難しく、RRBの潜在的な治療法や介入に関する基本的な生物医学的研究を困難にしています。 ここでは、マウスの高次RRBの潜在的なアッセイとして、新規オブジェクトの探索について説明します。

Restricted, repetitive behaviors (RRBs) are a core feature of autism spectrum disorder (ASD) and disrupt the lives of affected individuals.  RRBs are ...

この行動解析の全体的な目的は、マウスにおける高次の反復行動の有無を特定することです。この解析は、同系 C 58 J マウス系統などの、潜在的なマウスモデルおよび自閉症様行動の検証に役立ちます。本手法の主な利点は、マウスへのトレーニングを必要とせず、特に不安を誘発しにくい点にあります。まず、試験アリーナを準備します。底に約1.27 cmのコーンコブ寝床を敷いた、透明なプラスチック製の長方形ケージを使用します。形状と色が異なる4つの未知の物体を選択してください。例えば、ピンクの玩具用ブロック、赤い猿のぬいぐるみ、青い文字が書かれた白いタイル、および標準的な白いサイコロなどを用います。これらの物体は、ほぼ同じサイズであり、洗浄しやすく、また噛み砕かれても耐えられるよう、高密度のプラスチック製であることを確認してください。長方形のアリーナにおいて、これらの物体を各コーナーから3 cm離れた位置に、試験期間を通じてランダムかつカウンターバランスをとった順序で配置します。各物体の配置を1から4までの異なる数字で記録します。最後に、順化期間および休息期間中にアリーナ全体が記録されるよう、テストアリーナの直上にカメラを設置します。約100 luxの蛍光灯で照らされた室内で、明期開始時にテストを開始します。ビデオ録画時に外観を標準化するため、テストアリーナ全体の照明が均一であることを確認します。次に、後のキャリブレーション標準として使用するため、既知の寸法のノートカードをテストアリーナの底に配置します。そして、ビデオカメラの録画ボタンを押します。次に、順化期間として、テストマウスを空のテストアリーナに10分間入れて記録を続けます。順化期間の後、マウスをアリーナに残したまま、4つの新しい物体を迅速にアリーナに配置します。このテスト期間中、さらに10分間マウスの行動を記録します。最後に、試験期間が終了した後、試験マウスをホームケージに戻します。新規物体および試験アリーナを、無香料の食器用洗剤と水で洗浄し、乾燥させます。まず、行動記録ソフトウェアでプロジェクトのコーディングスキームを設定します。プロジェクト設定ボックス内で、データ収集を「オフライン、オフライン観察」に設定します。行動コーディングボックス内で、scrabble、digging、rearing、grooming、およびsniff object one、two、three、fourを状態イベントとしてプログラムします。jumpingをポイントイベントとしてプログラムします。サブキーボードをプログラミングするには、キーボードソフトウェアを開き、画面に表示されるサブキーボードボタンをクリックし、適切なキーストロークの組み合わせを入力して「OK」をクリックします。サブキーボードのプログラミングが完了したら、ソフトウェアを閉じ、コンピュータのバックグラウンドでプログラムを実行させます。ソフトウェアでのプロジェクト設定完了後、以下に示す各反復行動の回数と持続時間をスコアリングする準備をしてください。後肢での立ち上がり、掘削、セルフグルーミング、およびジャンプ。ビデオのスコアリングを行うには、[file]、[open project]、[observe]、[observation]、[new]の順にクリックします。新しいファイル名を入力し、スコアリング対象のビデオメディアファイルを選択してください。「観察開始」ボタンをクリックして、反復行動のスコアリングを開始してください。すべての状態イベントにおいて、2回のキーストロークを使用します。1回は行動の開始を、もう1回は行動の終了を意味します。また、ポイントイベントには1回のキーストロークのみを使用してください。次に、ソフトウェアを使用して、マウスが各物体を嗅いだ回数と持続時間をスコア付けします。ここで「嗅いだ」とは、マウスが物体の0.5 centimeters以内に鼻を近づけたときと定義します。マウスが物体を嗅ぐたびに、対応する物体の位置番号を記録し、10分間の試験期間が終了するまで、位置番号の列を手動で記録してください。マウスが物体を嗅ぎ、視線を外した後、再びその物体を嗅いだ場合は、その位置を2回カウントしてください。10分間のテスト動画の嗅ぎ動作のスコアリングが完了したら、「analyze（分析）」、「behavior analysis（行動分析）」、「new（新規）」の順にクリックしてデータを可視化します。その後、データが画面に表示されたら、別のスプレッドシートにエクスポートしてください。次に、試験中にマウスがアリーナ内を移動した総距離を記録します。そのためには、ノートカードを使用して各ビデオのキャリブレーションを行い、ノートカードの両端に沿ってキャリブレーション線を設定し、ソフトウェアのキャリブレーション画面で適切な長さを入力します。線を描いた後、各線に対応するノートカードの既知の長さと幅を入力してください。次に、「arena settings」でアリーナ全体を選択します。「trail control settings」では、時間を10分に設定してください。そして、「detection settings」で、明るい背景上の暗いオブジェクトを選択します。これらの設定をプログラムした後、「acquisition」をクリックして「open acquisition」を選択し、ビデオのスコア付けを行います。アクイジション・コントロール・ボックス内で「new trial」をクリックし、「start trials」を開始します。10分が経過した後、プログラムを停止してデータを観察します。最後に、[analyze]をクリックして統計を算出します。データが画面に表示されたら、別のスプレッドシートにエクスポートしてください。3つの異なる近交系マウスにおいて、最も頻度の高い3つの3パターン配列が繰り返された回数の割合を観察した。C 58の雌マウスは、円形のアリーナでは好みのパターンに強く固執したが、矩形のアリーナではそうではなかった。一方、雄マウスはどちらのアリーナにおいても個体間に差は見られなかった。さらに、円形アリーナにおけるC 58系統の雄および雌のマウスは、他の2系統よりも最も好む物体に対してより強い嗜好性を示しました。一方で、長方形アリーナでは物体嗜好性に差は見られませんでした。この手法に習熟すれば、データ収集に15分、行動スコアリングに20分を要し、1時間以内に完了させることができます。この手順を実施する際は、マウスが周囲の環境変化に非常に敏感であることを忘れないことが重要です。実験を通じてテスト環境が一定に保たれるようにしてください。本手順の後、バーンズ迷路やチーム迷路などの他の手法を用いて、高次反復行動の存在をさらに検証することができます。このビデオを視聴することで、マウスにおける高次反復行動の存在を特定するために、新規物体探索をどのように活用するかについて深く理解することができます。

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Research

JoVE Journal

Behavior

行動

病気、頭部外傷、遺伝子組み換え、および薬物によるマウスの治療は、行動に大きな影響を与える可能性があります。大理石の埋設や雛の細断など、十分に特徴付けられ検証されたアプローチを利用することで、強迫性行動をヒトの強迫性障害や自閉症スペクトラム障害のモデルとしてマウスで正確に文書化することができます。...

マウスにおける反復、強迫様行動の試験などのガラス玉覆い隠しとNestletシュレッダー

ここでは、βアミロイドーシスおよびタウオパチーのトランスジェニックマウスモデルにおける認知および機能的運動行動に対するインビボでの有効性を示す化合物をスクリーニングするために用いることができる、段階的な行動スクリーニングアプローチを記載する。これらの方法は、短期および作業記憶課題における活性について化合物をスクリーニングするために最適化される。...

アミロイド-βおよびタウのトランスジェニックマウスモデルにおける自発的交互作用の評価、新規対象の認識および肢の把握Neuropathology

オブジェクト認識テスト (ORT)...

マウスの記憶・学習の調査のための新規オブジェクト認識テスト

このプロトコルを記述するバーンズ迷路テストに基づいて、行動分析、空間環境の知識によって変更される操作方法本能的な防衛を研究します。...

マウスで本能的な防衛中に空間記憶の役割を調査するため行動分析

このプロトコルは、バーンズ迷路を使用して記憶・学習能を測定します。新たな乙女の苦痛パラダイムは、自発運動量とマウスにおける向社会的行動を評価するために使用されます。...

空間的な学習とバーンズ迷路と乙女の苦痛のパラダイムを用いたマウスの向社会的行動の分析

ここでデザイン、コスト、必要な設備の建設などマウス...

新規オブジェクト認識と行動の予算上のマウスでテスト オブジェクトの場所

運動能力の包括的な行動テスト...

運動能力、気分およびマウスにおける認知の繰り返しの評価のための行動テスト バッテリー

神経精神疾患の病因における最近発見された疾患関連遺伝子の役割は依然として不明瞭である。子宮エレクトロポレーション技術における修飾された両側性は、ニューロンの大規模集団における遺伝子導入と、社会的行動に対する遺伝子発現変化の原因の影響の検討を可能にする。...

子宮内電散法における両側性を用いたパイプラインによるげっ歯類の行動に対する遺伝的影響の調査

げっ歯類モデルは、自閉症スペクトラム障害(ASD)に関連する主要な行動を研究するための貴重なツールです。この記事では、マウスのASDの主要な特徴をモデル化するための2つの行動テスト、つまり反復行動を評価するセルフグルーミングと、社会的障害を文書化する3チャンバーの社会的相互作用テストについて詳しく説明します。...

マウスの自閉症様行動を評価するための戦略

現在の研究では、機械学習を使用して、TgF344-ADラットを含むげっ歯類モデルの運動障害を調べるための細かい運動行動テストについて説明しています。...

神経変性疾患の前臨床モデルにおける関節運動学を研究するための微細運動課題

学ぶ新規物体探査アッセイを用いたマウスの高次反復行動の評価法。事前訓練不要で不安を引き起こさず、自閉症モデルの検証に有用な神経科学行動解析手法を習得できます。

マウスにおける高次反復行動のための電位アッセイとして新規物体探査

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