Name: マウス屈筋腱損傷および修復手術 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: 学ぶマウス屈筋腱損傷修復手術による瘢痕形成の細胞メカニズム。トランスジェニックマウスを用いて腱治癒過程の細胞集団を特定し、治療標的の探索に役立つ再生医療の手法です。

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この作品は、部分的に手パイロット賞、NIH / NIAMS 1K01AR068386-01（AEL）とNIAMS / NIH P30AR061307の手術のためのアメリカの社会によってサポートされていました。

ロチェスター大学の動物研究に関する大学委員会は、すべての動物実験を承認しました。十12週齢の雌のC57BL / 6Jマウスを使用しました。 屈筋腱の手術のための動物の調製（〜15分） <ol><li>オートクレーブ手術器具は、滅菌を通して滅菌手袋を着用し、無菌手術野を維持します。 </li><li>体重に応じケタミンの量（80mg / kg）およびキシラジン（10mg / kg）を腹腔内注射（IP）を介して、マウスを麻酔。つま先ピンチ反射の不在を経て鎮静の深さを確認してください。 </li><li>皮下注射を介して先制鎮痛（ブプレノルフィン、0.05から0.1ミリグラム/キログラム）を管理します。乾燥から目を防ぐために、眼軟膏を適用します。 </li><li>全体後肢に毛皮をクリッピングすることにより、手術部位を準備します。 70％エタノールに続いポビドンヨード、で連続的にスクラビングすることにより、皮膚を殺菌し、再度、ポビドンヨードと。 </li></ol><ol><li>ふくらはぎの内側面に表面的に見屈筋digitorumの長い（FDL）腱を検索します。メスを用いて、腱を露出させるためにマイクロはさみで皮膚の小さい0.5〜1センチメートル切開を行います。 </li><li>周囲の組織からFDLの腱を分離し、myotendinous接合にそれをトレースするために鉗子を使用してください。後脛骨動脈を避けるように注意しながら、それを解放するために春のはさみで、この接合部で腱をカットします。 </li><li> 5-0ナイロン縫合糸で皮膚を閉じます。 注：FDL離断および修理は（2.4ステップ）実体顕微鏡を使用して実行する必要があります。 </li><li>春のマイクロはさみを使用して、後肢の後外側面上に3mmの切開を行います。静かに組織の損傷を最小限に抑え、FDLの腱を識別することを確認しながら、ピンセットで周囲の軟組織と筋肉を撤回。 <ol><li>静かにFDLの腱を上げ、完全にマイルを使用してそれを横断しますCRO-はさみ。定期的に生理食塩水でそれを濡らすことにより、腱の乾燥を避け、8-0縫合糸で修正されたケスラーパターンで一緒にFDLの腱の両端を縫合。 </li><li>腱の上に軟組織と筋肉を交換し、その後、5-0ナイロン縫合糸で切開を閉じます。 </li></ol></li><li>麻酔から回復するまで、体温を維持するために、37°C​​にスライドウォーマーセットにマウスを置きます。 </li><li>術後増加発声やフリルの毛皮などの障害または感染の徴候のためのマウスを監視します。マウスは、もは​​や痛みや苦痛の徴候を示すまで12時間ごとに鎮痛剤としてブプレノルフィン（50μL/マウス）を注入していません。 </li><li>マウスは、次のステップに進む前に10日、手術後の期間のために治癒することができます。 注：細胞は、任意の時点手術後に収穫することができます。ここでは、10日は、この時点で組織の比較的高い細胞充実性を与えられたこれらの代表的な実験のために選択されます。 </li></ol> 3. Labeliサイクリング細胞のngの（〜10分） <ol><li> EDU（5-エチニル2&#39;deoxyuridine）溶液を調製し（滅菌リン酸緩衝生理食塩水中の10mg / mlで[PBS]は+ 1％ジメチルスルホキシド[DMSO]溶解度を増加させます）。 </li><li>屠殺前24時間腹腔内注射を介して、100μlのEDU（50mg / kg）をマウスに注入します。 </li></ol>細胞診遠心分離4.収穫細胞（2.5時間、約30分のハンズオンタイム） <ol><li> PBSで3 mg / mlでコラゲナーゼIを準備します。 </li><li>せいぜい3 L /分の流量で二酸化炭素窒息を介してマウスを安楽死させる、および二次指標として頸椎脱臼を行います。 </li><li>上記のステップ2.4​​を使用して修復腱を見つけて、マイクロはさみで損傷部位の両側に約2mmを切断することにより腱組織を分離します。 <ol><li> 3 mg / mlでコラゲナーゼの1ミリリットルとペトリ皿の中メスでミンチ組織は、その後、組織を破壊するために18 G針を通して数回混合物を渡します。 1.5ミリリットル遠心管に混合物を収集します。 </li&gt; <li>振盪しながら37℃で1時間腱組織を消化します。 </li><li>スピン組織ダウン（5分間300×gで）、吸引コラゲナーゼは、その後、数回ピペッティングによりPBS中500μlの3％ウシ血清アルブミン（BSA）を用いて細胞/組織を再懸濁します。 </li><li> 70μmのセルストレーナーを介してフィルタ細胞懸濁液破片や腱の大部分を削除し、37℃のインキュベーターに確保しておきます。 </li><li>別の1.5ミリリットル遠心管に腱組織を配置し、ピペッティング、1ミリリットルコラゲナーゼ溶液でリフレッシュしてミックスダウンします。 </li><li>振盪しながら37℃で組織をさらに1時間インキュベートします。 </li><li>ピペッティングにより、数回上下PBS中500μlの3％BSAに再懸濁し、その後、消化された腱組織（5分間、300×gで）をスピンダウン。 </li><li>その後、血球計数器を用いて細胞をカウントし、4.3.3で単離されたサスペンションと結合し、70μmのセルストレーナーを介して細胞懸濁液をフィルタリングします。 </li><li> PBS中3％BSAで一度より多くの細胞を洗浄し、その後、3-6に再懸濁X 10 4個 /100μlの。 </li></ol></li><li>正に荷電したスライドに細胞診漏斗を取り付け、スライドキャリアにロック。細胞診の遠心分離機に装置全体を挿入し、漏斗に100μlの細胞懸濁液を追加します。スライドの上で細胞を分散するために5分間、300×gで遠心分離します。 </li></ol> EDU（2時間、〜45分のハンズオンタイム）を検出するために5.免疫細胞化学注：すべてのインキュベーション工程は、フルオロフォアの光退色を制限するために、暗闇の中で行われるべきです。 <ol><li>手順を以下に必要なソリューションを最小限に抑えるために、疎水性バリアペンでサークル細胞は、その後すぐに室温（RT）でPBS 15分で150μlの3％パラホルムアルデヒドで固定します。 <ol><li> PBS中150μlの3％BSAで5分間二回洗浄します。 </li><li>室温でPBSで20分間0.5％トリトンX-100で透過処理細胞。 </li><li> 5.1.1のように繰り返し洗浄ステップ。 </li></ol></li><li> EDU反応cocktを準備します使用前に30分以上ないキットの指示に従ってAIL。 <ol><li> RTで30分間インキュベート、各スライドに150μlのカクテルを追加します。 </li><li> 5.1.1のように繰り返し洗浄ステップ。 </li></ol></li><li>室温でPBS 30分に2000：Hoechst33342が1に希釈した150μlの核の対比でインキュベートします。 <ol><li> 150μlの1×PBSで5分間二回洗浄します。 </li></ol></li><li>追加1-2は、気泡を防止するために、ゆっくりと下カバースリップその後、細胞への抗フェードマウンティング培地を廃棄します。 <ol><li>室温で暗所で一晩硬化させるためにメディアをマウントできるようにします。 </li><li>スライドにカバースリップをシールするために明確なマニキュアを使用してください。 </li></ol></li><li> DAPI（Hoeschst33342）を検出することが可能な励起/発光フィルターを備えた蛍光顕微鏡を用いて40倍の倍率での画像スライド、及びテキサスレッド（アレクサフルオロ594）。 </li></ol>

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</ol>

著者らは、競合する金銭的利益はないと宣言している

完全離断および長趾屈筋腱の修復のマウスモデルのための外科的処置は、本研究で提示されています。また細胞診遠心機で小細胞集団を濃縮する新たなアプリケーションは、屈筋腱の治癒中の細胞環境の定量的免疫細胞化学分析を可能にする、実証されています。屈筋腱修復のこのモデルは、ノックアウトモデルを用いて、治癒過程の変化または薬理学的介入を評価するために使用することができる再現可能な治癒応答を実証します。手術後、炎症反応は、細胞が損傷部位と線維組織のカルス形成され始めるに動員されている間に、24時間以内に開始されます。増殖期は14から21日の間の接着の形成につながる、大幅に増加細胞性および修復部位での無秩序な細胞外マトリックスの豊富な沈着を伴う4日目、およそで続きます。組織リモデリングのコンティnues 35日目を通して、その時点で継続性と屈筋腱の組織が ​​復元され、細胞性は18に削減されます。 現在、ここに提示されている1つに加えて、屈筋腱修復のいくつかのマウスモデルがあります。 Tsubone ら、屈筋腱の治癒19のin v...

屈筋前腕の筋肉やデジタル鞘と協調して手作業では屈筋腱は、数字の屈曲と手の把握機能を有効にします。屈筋腱は手の掌側面に沿って実行します。この比較的表面的な場所は、多くの場合、手の外傷の間に屈筋腱の損傷につながります。腱は瘢痕組織の応答ではなく、正常な腱組織1の再生を通じて癒します。この瘢痕組織は、腱への連続性を提供するが、機能は劇的に健康な腱に比べて減少します。腱-瘢痕組織の複合材料は、破裂する可能性が高く、修復腱をレンダリングする、損なわれた機械的性質1を特徴とします。また、瘢痕組織は、腱のサイズおよびバルクの増加をもたらす、天然の腱のコラーゲン線維構造の組織化を欠いています。腱鞘部の解剖学的制約、腱サイズであっても適度な増加を考えることができます大幅に赤滑走腱の機能、動作および手の機能の、したがって数字範囲をUCE。 屈筋腱に1960年の怪我、手のゾーンIIで特に以前には、日常的に起因するこれらの修理2で発生した治癒における重篤な合併症に修復されませんでした。手のこの領域は、「だれの土地3 &#39;と呼ばれていました。しかし、外科技術、縫合糸パターンと物理療法リハビリテーションプロトコールの改善は劇的に屈筋腱の修理2の成果を改善しています。これらの進歩にもかかわらず、修理の40％までは手の機能4を阻害するために十分な接着形成をもたらします。したがって、生物学的アプローチは、治癒を改善するために必要とされます。残念ながら、非常に少ないが、細胞および分子レベルでの腱の治癒過程について知られています。したがって、目標は、基本understandinを改善するために使用することができるマウスモデルを開発することでした治癒を改善するために新規な治療標的を同定するための手段としての屈筋腱の治癒および瘢痕形成の処置の細胞および分子成分のgでした。 より大きな動物モデルは、屈筋腱の治癒過程の理解を促進に尽力してきました。犬とウサギの研究は屈筋腱5,6の内因性および外因性の治癒能力、固定化7に癒着形成の相対を最小限に抑えることで、早期に制御受動運動の重要性だけでなく、治癒過程8上の異なる縫合パターンの両方の効果を実証しています、9。また、イヌのモデルは、治癒10を改善するために翻訳組織工学的ア ​​プローチをテストする際に有用でした。しかし、相対的なコスト、マウス特異的試薬の利用可能性、およびグローバルKNOCの生成を容易にするなどの大型動物モデルにマウスモデルの相対的なを使用していくつかの重要な利点は、ありますK-アウトまたは組織特異的欠失/過剰発現コンストラクト。また、屈筋腱11に対して人間とマウスとの間の機能的類似性はマウスモデルの開発に潜在的有用性を示しています。 屈筋腱の切断と修復を模倣豊富な瘢痕組織および減損の機械的特性の形成を含む臨床治癒の多くの側面のマウスモデルの開発。ここで説明したモデルは、修復部位を保護するためにmyotendinous接合部におけるFDLの切断に起因する臨床実践の真の要約ではありません。修理が発生した腱の中間部分を覆う全く滑膜シースがないのでさらに、このモデルは、治癒反応に滑膜鞘細胞の寄与を考慮していません。これらの制限にもかかわらず、このモデルは、よりクロことをマウスモデルにおいて実証されるように、まだ持っている、運動制限癒着の発生範囲の利点を有していますエリーの臨床シナリオに近似しています。このモデルは、ノックアウトマウスモデル12,13を評価するため、および治癒14-17を改善するための別の薬理学的ア ​​プローチを試験するために使用されてきました。組織学的、免疫組織化学を使用して、このモデルの解析およびin situハイブリダイゼーションでは、治癒の間に重要な遺伝子やタンパク質の局在化に重要な洞察を提供することができます。しかし、組織学のみ断面空間分析を提供し、組織全体を通じて定量化を許可しません。フローサイトメトリー、より定量的なアプローチであるが、細胞のごく限られた数のマウスモデルにおける治癒腱組織から単離することができ、その数はさらに固定、透過処理、および洗浄工程中に減少します。アカウントにこれを取って、フローサイトメトリーをすることは、必要とされる動物の数に実現不可能なアプローチになります。別の方法は、順番にこの小細胞集団の大部分を維持することが必要ですさらに癒しの環境を特徴づけます。ここに示され、これを達成するために使用される方法は、免疫細胞化学、続いてスライドガラス上に細胞学遠心分離によって単離された細胞の濃度を含みます。本研究EDU（5-エチニル2&#39;deoxyuridine、チミジンアナログ）に取り込みおよびその後の標識化は、治癒部位での細胞の相対的な増殖状態を決定するために使用しました。このアプローチは、細胞増殖、遺伝子ノックアウトまたは過剰発現の薬理学的治療の有効性を試験するために、または異なる細胞集団を同定し、定量化するために適用することができます。

<table><tbody><tr><td>Surgical preparation</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6Jマウス&nbsp;</td><td>ジャクソン研究所</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>ケタミン</td><td>ホスピーラ</td><td>NDC#0409-2051-05</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>ロイド株式会社</td><td>NDC#61311-482-10</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Par Pharmaceutical Inc.</td><td>NDC# 42023-179-10</td><td></td></tr><tr><td>0.9% 塩化ナトリウム灌漑</td><td>Hospira</td><td>NDC# 0409-6138-03</td><td>ケタミン/キシラジンおよびブプレノルフィン溶液の調製用</td></tr><tr><td>1 ml シリンジ</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>30 G 針</td><td>BD</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>ポビドン - ヨウ素溶液</td><td>Aplicare</td><td>82-226</td><td></td></tr><tr><td>70% エタノール</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Puralube獣医光学軟膏</td><td>Dechra獣医製品</td><td>NDC#17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>名前</td><td>会社</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>Surgical tools</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Portableバランス200 g</td><td>Ohaus</td><td>SP202</td><td></td></tr><tr><td>スプリングはさみ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>15124-12</td><td></td></tr>デュ<tr><td>モン#5鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>11251-30</td><td></td></tr><tr><td>針ホルダー</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>91201-13</td><td></td></tr><tr><td>マイクロスプリングはさみ</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>15003-08</td><td></td></tr><tr><td>マイクロニードルホルダー</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>12061-02</td><td></td></tr><tr><td>5-0ナイロン縫合糸</td><td>Ethicon</td><td>668G</td><td></td></tr><tr><td>8-0マイクロサージェリーナイロン縫合糸</td><td>Ethicon</td><td>2808G</td><td></td></tr><tr><td>Lab-Line 組織学スライドウォーマー</td><td>バーンステッドインターナショナル</td><td>26025</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>Cytospin法</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>コラゲナーゼI型、凍結乾燥</td>ライフサイエンス<td>テクノロジーズ&nbsp;</td><td>1700-017</td><td></td></tr><tr><td>ウシ血清アルブミン</td><td>細胞シグナル伝達技術</td><td>9998S</td><td></td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>サーモフィッシャー</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>細胞学漏斗</td><td>フィッシャー</td>ヘルスケア <td>10-354</td><td></td></tr><tr><td>HistoBond+ 顕微鏡スライド</td><td>VWR</td><td>16005-110</td><td></td></tr><tr><td>サイトスピン 2 遠心分離機</td><td>シャンドン</td><td>SH-CYTO2</td><td></td></tr><tr><td>名</td><td>会社</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>Immunocytochemistry</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Slide staining tray with black lid</td><td>IHC World</td><td>M920-2</td><td></td></tr><tr><td>Click-iT Plus EdU Imaging Kit</td><td>Life Technologies&nbsp;</td><td>C10639</td><td>にはEdUと&nbsp;Hoeschst 33342</td></tr><tr><td>Immedge疎水性バリアペン</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>ProLong ダイヤモンド マウント メディウム</td><td>サーモフィッシャー</td><td>P36970</td><td></td></tr><tr><td>ガラス カバースリップ 24 x 50 mm #1.5</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>クリア マニキュア</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

マウス屈筋腱損傷および修復手術

Murine Flexor Tendon Injury and Repair Surgery

腱は、ほぼ全身の動きを促進する、骨格筋と骨をつなぎます。手には、屈筋腱（FTS）は、指や一般的な手の機能の屈曲を可能にします。 FTへの傷害は一般的であり、十分な治癒は、多くの場合、過剰な瘢痕組織と腱と周囲の組織との間の癒着に損なわれています。しかし、少しはFT修復の分子と細胞成分について知られています。そのために、運動の障害範囲を含む、ヒトにおける治癒の多くの側面を再現すると、機械的特性を低下FT修復のマウスモデルを開発し、以前に記載されています。ここでは、この外科手術手順の詳細なデモが離断およびマウス後足における屈筋digitorumの長い（FDL）腱のその後の修復を含む、提供されます。この技術は、遺伝子の獲得または機能喪失の効果を評価し、EFFIをテストするために、異なる細胞型の系統解析を実施するために使用することができ治癒過程における薬理学的介入のcacy。 ⅰ）離断し、修復が発生し、マウスの後足の中間部におけるFDLの腱は、滑膜シースに囲まれていません。しかし、このモデルには2つの主要な制限があります。したがって、このモデルは、瘢痕形成プロセスへのシースの潜在的寄与を考慮していません。 ⅱ）修復部位の完全性を保護するために、FTは、おそらく増加した瘢痕形成に寄与し、腱の機械的な力を減少させること、myotendinous接合部で放出されます。フローサイトメトリー分析のために治癒過程中FTの肉芽組織から十分な細胞の単離は困難なことが証明されています。これらの細胞を濃縮するための細胞学遠心分離が使用される代替方法であり、免疫蛍光標識を行うことができるの細胞調製物の生成を可能にします。この方法では、FT治癒の間、細胞又は対象のタンパク質の定量化が可能となります。

ふくらはぎに位置屈筋digitorumの長い（FDL）筋肉は、myotendinousから近位に実行屈筋腱（ 図1Aに青色で概説され、 図2Aに組織学的に示される）を介して、マウスの後足の数字を曲げるように作用します接合部および遠位指節で終了。後足の桁（赤い矢印、 図1A）に分岐し、近位の屈筋腱の治癒のこのモデルでは、FDLの腱が離断され、半ば足で修理します。実験的な分析を妨げる修理、の破裂を防ぐために、腱（及び隣接する筋肉）がmyotendinous接合（ 図1B、 図1Cに示されているリリースの黄色の矢印）で、カット、または解放されます。このステップは、臨床シナリオの代表ではありませんが、損傷部位に負担を減少させることによって修復を保護することが重要である。 図2D図2Cに示す修復が成功に比べ、破裂屈筋腱修復の組織学的一例です。後者で...

手に屈筋腱は、一般的に損なわれた手の機能につながる、負傷しています。しかし、瘢痕組織の治癒反応は十分に特徴付けされていません。屈筋腱の治癒のマウスモデルは、ここに示されています。このモデルは、治癒過程の全体的な理解を高め、治癒を改善するための治療法を評価することができます。

Tendon connects skeletal muscle and bone, facilitating movement of nearly the entire body. In the hand, flexor tendons (FTs) enable flexion of the fingers ...

この外科的手技の全般的な目的は、屈筋腱の治癒過程における瘢痕および癒着形成の細胞的・分子的なプロセスへの理解を深めることです。この手法は、どのような細胞種が瘢痕形成や修復に寄与しているかなど、屈筋腱の治癒過程に関する重要な疑問を解決するのに役立ちます。本技術の主な利点は、トランスジェニックマウスやノックアウトマウスを用いることで、治癒プロセスをより詳細に理解できる点にあります。この手法は、瘢痕形成に寄与するこれらの不十分な設計の細胞集団の調査を容易にするため、屈筋腱治癒の結果を改善するための潜在的な生物学的標的を特定できる可能性があります。つま先へのピンチ刺激に対する反応がないことを確認した後、動物の目に眼科用軟膏を塗布し、後肢全体の被毛を刈り取ります。手術部位をポビドンヨウ素と70% ethanolで順次洗浄して滅菌し、下腿の内側にある長趾屈筋（FDL腱）を特定します。次に、腱を露出させるため、皮膚に0.5〜1 cmの切開を加えます。鉗子を用いてFDL腱を周囲の組織から分離し、筋腱移行部まで腱を追います。スプリングシザーを使用して、後脛骨動脈を傷つけないように注意しながら、移行部で腱を切り離します。その後、5-0ナイロン縫合糸で皮膚を閉鎖します。次に、マウスを実体顕微鏡下に移動させ、スプリングマイクロシザーを用いて後肢のPosterolateral aspect（後外側）に3 mmの切開を加えます。ピンセットを使用して、周囲の軟部組織と筋肉を慎重に牽引し、組織へのダメージを最小限に抑えながら、FDL腱を同定します。次に、腱をそっと持ち上げ、マイクロ scissors を用いて組織を完全に切断します。変法 Kessler 法を用い、8.0 縫合糸で FDL 腱の両端を結紮します。必要に応じて、手順全体を通して生理食塩水で腱に定期的に水分を補給してください。端を縫合した後、軟部組織と筋肉を腱の上に被せ、5.0ナイロン縫合糸を用いて切開部を閉鎖します。その後、マウスを37 °Cのスライドウォーマーに置き、完全に回復するまで観察します。実験終点24時間前に、マウスに100 µLのEDUを注射します。翌日、先ほど示した方法で修復された腱の位置を特定し、切断された組織を採取します。治癒中の腱を取り囲む肉芽組織を単離することは、最終的なアミノサイトケミカル分析を行うために極めて重要な工程です。また、周辺組織が混入しないよう細心の注意を払う必要があります。腱を1 mLのコラゲナーゼを含むペトリ皿に入れます。次に、メスで組織を細かく刻み、18Gの針を用いて破砕物を数回トリチュレーションします。この懸濁液を1.5 mL遠心チューブに移し、37°Cで振盪しながら1時間、腱片を消化させます。消化後、組織懸濁液を遠心分離し、ペレットを3% BSA含有PBS 500 µLで再懸濁しま

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出典: Dalkin, W., et al.腓骨神経損傷法 神経筋接合部を修復する因子を同定し、試験するための信頼できるアッセイJ. Vis. 経験。(2016年)このビデオは、神経筋接合部 (NMJ) の再生を研究するためにマウスに腓骨神経損傷を誘発する外科的処置を示しています。この手順には、腓骨神経を露出させ、制御された圧力を加えて損傷を誘発し、軸索の再生をサポートするために神経外皮が無傷のままであることを確認することが含まれます。時間が経つにつれて、マクロファージは軸索の破片を除去し、神経修復と NMJ...

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ここでは、ラットモデルにおける膝関節固定化のための最小限に侵襲的な技術を説明するプロトコルを提示する。この再現可能なプロトコルは、筋肉ギャップ分離様式およびミニ切開スキルに基づいて、獲得された関節収縮の基礎となる分子機構の研究に適している。...

ラットの固定化誘発膝屈曲収縮を研究するための小型侵襲的内部固定技術

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ラット脊髄損傷後の急性および慢性の触覚官能検査

学ぶマウス屈筋腱損傷修復手術による瘢痕形成の細胞メカニズム。トランスジェニックマウスを用いて腱治癒過程の細胞集団を特定し、治療標的の探索に役立つ再生医療の手法です。

マウス屈筋腱損傷および修復手術

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