Name: 微細と3D微小血管の組立 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 5 s
Description: 学ぶ インジェクション成型法による微小血管の作製技術。生理学的特性を持つ3D血管ネットワークを構築し、血流や細胞組成を制御して血管生物学と疾患メカニズムの研究に応用する。

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著者らは、幹細胞および再生医学だけでなく、ワシントン大学のワシントンナノファブリケーション施設のための研究所のリンとマイク・ガーベイイメージング研究所を承認したいと思います。彼らはまた、国立衛生研究所の財政支援は、（YZへ）DP2DK102258を付与し、訓練助成金（SSKとMARへ）T32EB001650とT32HL007312（MAR）は認めます。

<ol><li>Rubanyi, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+endothelium+in+cardiovascular+homeostasis+and+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cardiovasc.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The role of endothelium in cardiovascular homeostasis and diseases.</a> J. Cardiovasc. Pharmacol. 22, Suppl 4 37-44 (1993).</li>
<li>van Hinsbergh, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelium%3A+vascular+control+of+haemostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Obstet.+Gynecol.+Reprod.+Biol%22%5BJournal%5D)">The endothelium: vascular control of haemostasis.</a> Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 95 (2), 198-201 (2001).</li>
<li>Chiu, J. -J., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Disturbed+Flow+on+Vascular+Endothelium%3A+Pathophysiological+Basis+and+Clinical+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Effects of Disturbed Flow on Vascular Endothelium: Pathophysiological Basis and Clinical Perspectives.</a> Physiol. Rev. 91, 327-387 (2011).</li>
<li>Qi, Y., Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PDGF-BB+and+TGB-b1+on+cross-talk+between+endothelial+and+smooth+muscle+cells+in+vascular+remodeling+induced+by+low+shear+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">PDGF-BB and TGB-b1 on cross-talk between endothelial and smooth muscle cells in vascular remodeling induced by low shear stress.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 108, 1908-1913 (2011).</li>
<li>Sozzani, S., Del Prete, A., Bonecchi, R., Locati, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines+as+effector+and+target+molecules+in+vascular+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Res%22%5BJournal%5D)">Chemokines as effector and target molecules in vascular biology.</a> Cardiovasc. Res. 107 (3), 364-372 (2015).</li>
<li>Huh, D., Hamilton, G. A., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+3D+cell+culture+to+organs-on-chips%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">From 3D cell culture to organs-on-chips.</a> Trends Cell Biol. 21 (12), 745-754 (2011).</li>
<li>Staton, C. a, Reed, M. W. R., Brown, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+analysis+of+current+in+vitro+and+in+vivo+angiogenesis+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Exp.+Pathol%22%5BJournal%5D)">A critical analysis of current in vitro and in vivo angiogenesis assays.</a> Int. J. Exp. Pathol. 90, 195-221 (2009).</li>
<li>Greek, R., Menache, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+Reviews+of+Animal+Models%3A+Methodology+versus+Epistemology%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Systematic Reviews of Animal Models: Methodology versus Epistemology.</a> Int. J. Med. Sci. 10, 206-221 (2013).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+Animal+Models+of+Disease+Reliably+Inform+Human+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">Can Animal Models of Disease Reliably Inform Human Studies.</a> PLoS Med. van der Worp, H. B., Howells, D. W., et al. 7 (3), e1000245(2010).</li>
<li>Leong, X. -F., Ng, C. -Y., Jaarin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+in+Cardiovascular+Research%3A+Hypertension+and+Atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res.+Int%22%5BJournal%5D)">Animal Models in Cardiovascular Research: Hypertension and Atherosclerosis.</a> Biomed Res. Int. 2015, 528757(2015).</li>
<li>Pries, A. R., Secomb, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+Microvascular+Networks+Work%3A+Angiogenesis%2C+Remodeling%2C+and+Pruning%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Making Microvascular Networks Work: Angiogenesis, Remodeling, and Pruning.</a> Physiology. 29, 446-455 (2014).</li>
<li>D'Amore, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+Of+Angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms Of Angiogenesis.</a> Annu. Rev. Physiol. 49, 453-464 (1987).</li>
<li>Geudens, I., Gerhardt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordinating+cell+behaviour+during+blood+vessel+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Coordinating cell behaviour during blood vessel formation.</a> Development. 138, 4569-4583 (2011).</li>
<li>Ribatti, D., Nico, B., Crivellato, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+the+vascular+system%3A+a+historical+overview%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">The development of the vascular system: a historical overview.</a> Methods Mol. Biol. 1214, 1-14 (2015).</li>
<li>Ribatti, D., Nico, B., Crivellato, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological+and+molecular+aspects+of+physiological+vascular+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Morphological and molecular aspects of physiological vascular morphogenesis.</a> Angiogenesis. 12 (2), 101-111 (2009).</li>
<li>Bautch, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-directed+blood+vessel+patterning%3A+From+cells+to+organism%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb.+Perspect.+Med%22%5BJournal%5D)">VEGF-directed blood vessel patterning: From cells to organism.</a> Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2 (9), 1-12 (2012).</li>
<li>Stratman, A. N., Schwindt, A. E., Malotte, K. M., Davis, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial-derived+PDGF-BB+and+HB-EGF+coordinately+regulate+pericyte+recruitment+during+vasculogenic+tube+assembly+and+stabilization%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial-derived PDGF-BB and HB-EGF coordinately regulate pericyte recruitment during vasculogenic tube assembly and stabilization.</a> Blood. 116, 4720-4730 (2010).</li>
<li>Bach, T. L., Barsigian, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VE-Cadherin+mediates+endothelial+cell+capillary+tube+formation+in+fibrin+and+collagen+gels%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">VE-Cadherin mediates endothelial cell capillary tube formation in fibrin and collagen gels.</a> Exp. Cell Res. 238 (238), 324-334 (1998).</li>
<li>Kubow, K. E., Conrad, S. K., Horwitz, aR. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+microarchitecture+and+myosin+II+determine+adhesion+in+3D+matrices%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Matrix microarchitecture and myosin II determine adhesion in 3D matrices.</a> Curr. Biol. 23 (17), 1607-1619 (2013).</li>
<li>Potapova, I. A., Gaudette, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+Stem+Cells+Support+Migration%2C+Extracellular+Matrix+Invasion%2C+Proliferation%2C+and+Survival+of+Endothelial+Cells+In+Vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal Stem Cells Support Migration, Extracellular Matrix Invasion, Proliferation, and Survival of Endothelial Cells In Vitro.</a> Stem Cells. 25 (7), 1761-1768 (2007).</li>
<li>Bayless, K. J., Davis, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphingosine-1-phosphate+markedly+induces+matrix+metalloproteinase+and+integrin-dependent+human+endothelial+cell+invasion+and+lumen+formation+in+three-dimensional+collagen+and+fibrin+matrices%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Commun%22%5BJournal%5D)">Sphingosine-1-phosphate markedly induces matrix metalloproteinase and integrin-dependent human endothelial cell invasion and lumen formation in three-dimensional collagen and fibrin matrices.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 312 (4), 903-913 (2003).</li>
<li>Hellström, M., Gerhardt, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+pericytes+leads+to+endothelial+hyperplasia+and+abnormal+vascular+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Lack of pericytes leads to endothelial hyperplasia and abnormal vascular morphogenesis.</a> J. Cell Biol. 152 (3), 543-553 (2001).</li>
<li>Tulloch, N. L., Muskheli, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+of+Engineered+Human+Myocardium+With+Mechanical+Loading+and+Vascular+Coculture%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Growth of Engineered Human Myocardium With Mechanical Loading and Vascular Coculture.</a> Circ. Res. 109, 47-59 (2011).</li>
<li>Davis, G. E., Saunders, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+balance+of+capillary+tube+formation+versus+regression+in+wound+repair%3A+role+of+matrix+metalloproteinases+and+their+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Investig.+dermatology+Symp%22%5BJournal%5D)">Molecular balance of capillary tube formation versus regression in wound repair: role of matrix metalloproteinases and their inhibitors.</a> J. Investig. dermatology Symp. 11 (1), 44-56 (2006).</li>
<li>Kannan, R. Y., Salacinski, H. J., Butler, P. E., Hamilton, G., Seifalian, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+of+prosthetic+bypass+grafts%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Mater.+Res.+B.+Appl.+Biomater%22%5BJournal%5D)">Current status of prosthetic bypass grafts: a review.</a> J. Biomed. Mater. Res. B. Appl. Biomater. 74, 570-581 (2005).</li>
<li>Nerem, R. M., Seliktar, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+Tissue+Engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Vascular Tissue Engineering.</a> Annu. Rev. Biomed. Eng. 3 (1), 225-243 (2001).</li>
<li>Melchiorri, A. J., Hibino, N., Fisher, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+and+techniques+to+enhance+the+in+situ+endothelialization+of+small-diameter+biodegradable+polymeric+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+B.+Rev%22%5BJournal%5D)">Strategies and techniques to enhance the in situ endothelialization of small-diameter biodegradable polymeric vascular grafts.</a> Tissue Eng. Part B. Rev. 19 (4), 292-307 (2013).</li>
<li>Abbott, W. M., Callow, A., Moore, W., Rutherford, R., Veith, F., Weinberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+and+performance+standards+for+arterial+prostheses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Evaluation and performance standards for arterial prostheses.</a> J. Vasc. Surg. 17 (4), 746-756 (1993).</li>
<li>Niklason, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+Arteries+Grown+in+Vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Functional Arteries Grown in Vitro.</a> Science. 284 (5413), 489-493 (1999).</li>
<li>Niklason, L., Counter, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+vessels+engineered+from+human+cells+-+Authors%27+reply%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Blood vessels engineered from human cells - Authors' reply.</a> Lancet. 366 (9489), 892-893 (2005).</li>
<li>Zheng, Y., Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+microvessels+for+the+study+of+angiogenesis+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">In vitro microvessels for the study of angiogenesis and thrombosis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 109, 9342-9347 (2012).</li>
<li>Zheng, Y., Chen, J., Lòpez, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow-driven+assembly+of+VWF+fibres+and+webs+in+in+vitro+microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Flow-driven assembly of VWF fibres and webs in in vitro microvessels.</a> Nat. Commun. 6, 7858(2015).</li>
<li>Ligresti, G., Nagao, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Three-Dimensional+Human+Peritubular+Microvascular+System%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">A Novel Three-Dimensional Human Peritubular Microvascular System.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 27, (2015).</li>
<li>Roberts, M. A., Tran, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stromal+cells+in+dense+collagen+promote+cardiomyocyte+and+microvascular+patterning+in+engineered+human+heart+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Stromal cells in dense collagen promote cardiomyocyte and microvascular patterning in engineered human heart tissue.</a> Tissue Eng. Part A. , (2016).</li>
<li>Qin, D., Xia, Y., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soft+lithography+for+micro-+and+nanoscale+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Soft lithography for micro- and nanoscale patterning.</a> Nat. Protoc. 5 (3), 491-502 (2010).</li>
<li>Alpha-Step 200 Manual. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Tencor+Instruments%22">Tencor Instruments</a>. , (1989).</li>
<li>Rajan, N., Habermehl, J., Coté, M. -F., Doillon, C. J., Mantovani, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+ready-to-use%2C+storable+and+reconstituted+type+I+collagen+from+rat+tail+tendon+for+tissue+engineering+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Preparation of ready-to-use, storable and reconstituted type I collagen from rat tail tendon for tissue engineering applications.</a> Nat. Protoc. 1 (6), 2753-2758 (2006).</li>
<li>Baudin, B., Bruneel, A., Bosselut, N., Vaubourdolle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+protocol+for+isolation+and+culture+of+human+umbilical+vein+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">A protocol for isolation and culture of human umbilical vein endothelial cells.</a> Nat. Protoc. 2 (3), 481-485 (2007).</li>
<li>Leung, A. D., Wong, K. H. K., Tien, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+expanders+stabilize+human+microvessels+in+microfluidic+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Mater.+Res.+-+Part+A%22%5BJournal%5D)">Plasma expanders stabilize human microvessels in microfluidic scaffolds.</a> J. Biomed. Mater. Res. - Part A. 100 (7), 1815-1822 (2012).</li>
<li>Tousimis SAMDRI-780 Critical Point Drying Apparatus. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Tousimis+Research+Corporation%22">Tousimis Research Corporation</a>. , (1987).</li>
<li>Palpant, N. J., Pabon, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+%CE%B2-catenin+signaling+respecifies+anterior-like+endothelium+into+beating+human+cardiomyocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Inhibition of β-catenin signaling respecifies anterior-like endothelium into beating human cardiomyocytes.</a> Development. 142 (18), 3198-3209 (2015).</li>
<li>Gimbrone, M. a, Topper, J. N., Nagel, T., Anderson, K. R., Garcia-Cardena, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Dysfunction%2C+Hemodynamic+Forces%2C+and+Atherogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb.+Haemost%22%5BJournal%5D)">Endothelial Dysfunction, Hemodynamic Forces, and Atherogenesis.</a> Thromb. Haemost. 82, 722-726 (1999).</li>
<li>Wu, M. H., Ustinova, E., Granger, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin+binding+to+fibronectin+and+vitronectin+maintains+the+barrier+function+of+isolated+porcine+coronary+venules%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Integrin binding to fibronectin and vitronectin maintains the barrier function of isolated porcine coronary venules.</a> J. Physiol. 532 (3), 785-791 (2001).</li>
<li>Ribatti, D., Nico, B., Vacca, A., Roncali, L., Dammacco, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+cell+heterogeneity+and+organ+specificity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hematother.+Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Endothelial cell heterogeneity and organ specificity.</a> J. Hematother. Stem Cell Res. 11, 81-90 (2002).</li>
<li>Shanks, N., Greek, R., Greek, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+animal+models+predictive+for+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Philos.+Ethics.+Humanit.+Med%22%5BJournal%5D)">Are animal models predictive for humans.</a> Philos. Ethics. Humanit. Med. 4, 2(2009).</li>
</ol>

著者らは、開示することは何もありません。

操作された微小血管は、管腔の幾何学、流体力学的な力、および多細胞相互作用などの生理的特徴が存在して調整可能でin vitroモデルです。プラットフォームのこのタイプは、それがモデル化し、in vitroでの培養条件は、問題の微小環境のそれに一致させることができる様々な状況下で内皮挙動を研究する能力を提供することで強力です。例えば、このような血管新生などの内皮のプロセスを、駆動機構は、異なる器官で、そのような健康と病気44など、さまざまな病理学的状態、で異なって発生することが知られています。このため、平面内皮細胞培養物は、一貫して6不十分であり、そのようなフィールドは、コストと時間がかかる動物モデルに大きく依存しているように。 動物モデルは、生物学的研究の進展のために有益で不可欠ながら、常に診療所にうまく変換されません。これは主に、特に9,45を刺激するそれらの応答について、マウスおよびヒトの生物学との間の差に起因しています。動物モデルから収集された情報を補完する追加のヒト特異的デー...

各器官における微小血管系は、組織微小環境を定義する組織の恒常性を維持し、炎症、透過性、血栓症、および線維素溶解1,2を制御するのに役立ちます。 5 -微小血管内皮細胞は、特に、従って血流と周辺組織との間の界面は、流体力及び循環サイトカインおよびホルモン3などの刺激に応答した血管および臓器機能の調節において重要な役割を果たしています。内皮、血液、および周囲の組織の微小環境との間の詳細な相互作用を理解することは、血管生物学と疾患の進行の研究のために重要です。しかし、これらの相互作用を研究の進展は、 生体内微小血管構造に再現し、6,7を機能しない試験管ツールに制限することによって妨げられてきました。その結果、フィールドと治療の進歩は、高価で、時間に大きく依存してきました10 -しばしば人間8の成功に変換することができない動物モデルを消費します。 in vivoモデルは、病気のメカニズムと血管機能の研究に貴重であるが、それらは複雑であり、多くの場合、携帯個々の生化学的、および生物物理学的手がかりの正確な制御を欠いています。 体全体の血管系は、同時に11を最適化灌流および栄養素の輸送を提供し、広大な毛細血管床と一緒に成熟した階層構造を有しています。最初は、初期の開発12,13の間に階層的に分枝状のネットワークに再編成し、プリミティブ叢などの血管系が形成されます。これらのプロセスに関与するシグナルの多くはウェル14に理解されていますが- 16を 、そのような血管のパターニングは15どのように決定されるかとらえどころのないままになります。ターンでは、組織化血管ネットワークを設計するためにインビトロでこのプロセスを反復することは蜂を持っていますnは難しい。多くの既存のin vitroでのプラットフォームは、このような2次元の内皮細胞培養物として、このような多細胞近接、3次元管腔ジオメトリ、流れ、および細胞外マトリックスのような重要な特性を欠いている、血管系をモデル化します。 3Dハイドロゲル（コラーゲンまたはフィブリン）における管形成アッセイ17から19または浸潤アッセイ20,21は、他の血管17,22または組織細胞型23と3Dとの相互作用における内皮機能を研究するために使用されてきました。しかし、これらのアッセイにおいてルーメン相互接続性、血行動態の流れ、および適切な灌流を欠いて組み立てました。さらに、これらのチューブ形成アッセイ24における血管退行の傾向を行うことができる機能的研究の程度を制限する長期培養および成熟を ​​妨げます。このように、適切にモデル化することができる微小血管ネットワーク専用のin vitroでのプラットフォームを設計する急成長が必要です特性をdothelialし、長期培養が可能です。 血管工学技術の様々な血管疾患を有する患者で交換する医療用途やバイパス影響を受けた船舶のために年間で浮上しています。ポリエチレンテレフタレート（PET）、およびポリテトラフルオロエチレン（ePTFE）などの合成材料から作製された大径の容器は、長期開存性（平均95％開通5年以上）25と、かなりの治療成功を収めています。小径合成移植片（&lt;6ミリメートル）は、典型的には、内膜過形成および血小板新生26などの合併症に直面するが- 28を 、生物学的材料で作られた組織工学小径移植片は大きな進展29,30を行っています。この種の進歩にもかかわらず、マイクロスケールに設計された血管は、チャレンジを続けています。適切微小血管系をモデル化するために、SUFで複雑なネットワークパターンを生成する必要がありますficient機械的強度が開通し、実質細胞および細胞リモデリングのための両方の栄養浸透を可能にするマトリックス組成物を維持します。 34 -このプロトコルは、調整可能かつ制御可能な微小環境31に設定し、in vivoでのネイティブを模倣小説人工灌流血管ネットワークを提供します。記載されている方法は、100ミクロンのオーダーの直径を有する操作された微小血管を生成します。操作された微小血管は、私は、ヒドロゲルコラーゲンソフトタイプ内に埋め込まれたマイクロ流体チャネルを介して内皮細胞を灌流することによって作製されます。このシステムは、開いた管腔構造のパターニングされたネットワークを生成する多細胞相互作用を複製する細胞外マトリックス組成物を調節する、および生理学的に関連する血行力学的力を適用する能力を有します。

<table><tbody><tr><td>Wafer Fabrication</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>AutoGlow プラズマシステム</td><td>AutoGlow</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Headway Spin Coater</td><td>Headway Research, Inc.&nbsp;</td><td>PWM32 スピンコーター&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>ABM コンタクト アライナー</td><td>AB-M</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alpha ステップ形状測定機</td><td>Tencor</td><td>Alpha Step 200</td><td></td></tr><tr><td>SU-8 Developer</td><td>Microchem</td><td>Y020100</td><td></td></tr><tr><td>SU-8 レジスト</td><td>Microchem</td><td>SU-8 2000</td><td></td></tr><tr><td>8" シリコンウェーハ</td><td>Wafer World Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>卓上マイクロパターンジェネレータ</td><td>ハイデルベルグインスツルメンツ</td><td>&mu;PG 101</td><td>フォトマスクの生成用</td></tr><tr><td>ホットプレート</td><td>VWR</td><td>97042-646</td><td></td></tr><tr><td>イスプロピルアルコール</td><td>アバンター パフォーマンス マテリアル</td><td>ズ 9088</td><td></td></tr><tr><td>ペトリ皿 (120 x 120 mm、正方形)</td> <td>シグマ・アルドリッチ</td><td>Z617679</td><td></td></tr><tr><td>トリクロロ (3,3,3-トリフルオロプロピル) シラン</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>MKBG3805V</td><td></td></tr><tr><td>ポリジメチルシロキサン (PDMS) エラストマーベース硬化剤</td><td>ダウコーニング</td><td>シルガード184110</td><td>:1(w / w)</td></tr><tr><td>真空デシケーター</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>Z119024-1EA</td><td></td></tr><tr><td>オーブン</td><td>VWR</td><td>9120976</td><td></td></tr><tr><td>デバイス製造と培養</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>poly(メチルメタクリレート)(PMMA)</td><td>プレキシガラス</td><td></td><td></td></tr><tr><td>コロナトリーター</td><td>エレクトロテクニックプロダクツ株式会社</td><td>BD-20</td><td>PMMA装置・PDMS金型のプラズマ処理用ハンディタイプ</td></tr><tr><td>はんだごて</td><td>ウェラー&nbsp;</td><td>WTCPS</td><td></td></tr><tr><td>ステンレス鋼トラスヘッド長付き小ねじ</td><td>McMaster-Carr&nbsp;</td><td>91785A096</td><td></td></tr><tr><td>ステンレス鋼ダウエルピン</td><td>McMaster-Carr&nbsp;</td><td>93600A060</td><td></td></tr>ピン<tr><td>セット&nbsp;</td><td>ミルテックス</td><td>24-572</td>任意の<td>同様のピンセットを使用することができます</td></tr><tr><td>へら(マイクロスプーン)</td><td>電子顕微鏡サービス</td><td>62410-01</td><td></td></tr><tr><td>ドライバー</td><td></td><td></td><td>任意のマイナスドライバーを使用することができます、オートクレーブ</td></tr><tr><td>ガラスカバースリップ(22 x 22 mm)</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>12-542B</td><td></td></tr><tr><td>漂白剤</td><td>クロロックス</td><td>4460030966</td><td></td></tr><tr><td>ペトリ皿(150 x25 mm)</td><td>Corning</td><td>430599</td><td></td></tr><tr><td>ペトリ皿 (100 x 20 mm)</td><td>Corning</td><td>2909</td><td></td></tr><tr><td>コットン、1 cm x 3 cm ピース</td><td></td><td></td>にカット <td>オートクレーブ処理ポリエチレン</td></tr><tr><td>イミン (PEI)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3143</td><td>細胞培養グレードの水で 1% に希釈</td></tr><tr><td>グルタルアルデヒド</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td>細胞培養グレードの水</td></tr><tr><td>で 0.1% に希釈滅菌済み H2O</td><td></td><td></td><td>オートクレーブ DI H2O</td></tr><tr><td>I型コラーゲン、0.1% 酢酸</td><td></td><td></td>に溶解 <td>Rajan et. al. 2006 (ref #37)1</td></tr> <tr><td>ml シリンジ</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>10 ml シリンジ</td><td>BD</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>15 ml コニカルチューブ</td><td>Corning</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>30 mlコニカルチューブCorning</td><td></td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>M199 10xメディア&nbsp;</td><td>Life Technologies</td><td>11825-015</td><td></td></tr><tr><td>1 N NaOH (滅菌)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>415413</td><td>細胞培養グレードの水で 1 N に希釈</td></tr><tr><td>HUVECs</td><td>ロンザ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>内皮増殖培地</td><td>ロンザ</td><td>CC-3124</td><td></td></tr><tr><td>トリプシン</td><td>コーニング</td><td>25-052-CI</td><td></td></tr><tr><td>ウシ胎児血清 (FBS)</td><td>サーモフィッシャー サイエンティフィック</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Leuconostoc属のデキストラン(70&nbsp;kDa)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>31390</td><td></td></tr><tr><td>リン酸緩衝生理食塩水 (PBS)</td><td>Corning</td><td>21-031-CV</td><td></td></tr><tr><td>血球計算盤</td><td>Hausser Scientific Co.</td><td>3200</td><td></td></tr><tr><td>ゲルローディングチップ</td><td>VWR</td><td>37001-152</td><td></td></tr><tr><td>18 Gブラントフィルニードル</td><td>BD&nbsp;</td><td>305180</td><td></td></tr><tr><td>20 Gステンレス鋼の分配の針</td><td>McMaster-Carr</td><td>75165A123</td><td></td></tr><tr><td>タイゴン1/32 "ID、3/32 "ODシリコンチューブ</td><td>コールパー</td><td>マーEW-95702-00</td><td></td></tr><tr><td>1/16 "チューブ間カップリング</td><td>McMaster-Carr</td><td>5116K165</td><td></td></tr><tr><td>90&deg;エルボーコネクター、チューブ間</td><td>McMaster-Carr</td><td>5121K901</td><td></td></tr><tr><td>ルアーロックカップリング(メス、1/16インチ内径)</td><td>McMaster-Carr</td><td>51525K211</td><td></td></tr><tr><td>プラスチック鉗子、ジョーグリップ付き</td><td>電子顕微鏡サービス</td><td>72971</td><td></td></tr><tr><td>デュアルシリンジポンプ</td><td>ハーバード装置</td><td>70-4505</td><td></td></tr><tr><td>5 ml ポリスチレン丸底チューブ</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>14-959-2A</td><td></td></tr><tr><td>Device Analysis</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ホルムアルデヒド</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F8775</td><td></td></tr><tr><td>ウシ血清アルブミン</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8806-5G</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T-9284</td><td></td></tr><tr><td>Rabbit anti-hCD31</td><td>Abcam</td><td>ab32457</td><td>1:25 作業希釈</td></tr><tr><td>FITC 結合抗フォンWillebrand 因子抗体</td><td>Abcam</td><td>ab8822</td><td>1:100 作業希釈液</td></tr><tr><td>ヤギ抗ウサギ 568 二次抗体</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A-11011</td><td>1:100 作業希釈液</td></tr><tr><td>Hoescht</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>H1399</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>カコジル酸ナトリウムに再</td>懸濁&nbsp;<td>Sigma-Aldrich</td><td>C0250</td><td>0.2 Mカコジル酸緩衝液を作るには</td></tr><tr><td>エタノール</td><td>VWRインターナショナル</td><td>BDH1164-4LP</td><td></td></tr><tr><td>40 kDa FITC標識デキストラン</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>FD40S&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td><ストロング>追加の培養試薬&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CHIR-99021</td><td>Selleck Chem</td><td>S2924</td><td>低分子GSK-3阻害剤</td></tr><tr><td>ヒト組換えVEGF</td><td>Peprotech</td><td>100-20</td><td></td></tr><tr><td>ヒト組換えbFGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-18B</td><td></td></tr></tbody></table>

微細と3d微小血管の組立

Micropatterning and Assembly of 3D Microvessels 

インビトロプラットフォームでは 、内皮細胞および血管生物学の大部分は、2D内皮細胞培養物に限定されている研究するポリマー又はガラスベースの基板、及びヒドロゲルベース管形成アッセイを用いてチャンバを流れます。これらのアッセイは、有益ながら、血管機能の調節に重要な役割を果たしルーメンジオメトリ、適切な細胞外マトリックス、および多細胞近接性を、再現しません。この原稿は、100ミクロンのオーダーの直径を有する操作された血管を生成するための射出成形方法を説明します。微小血管は、私は、ヒドロゲルコラーゲンネイティブ型内に埋め込まれたマイクロ流体チャネルに内皮細胞を播種することによって作製されます。形成チャネルの前に、コラーゲンマトリックス中で実質細胞を組み込むことによって、特定の組織の微小環境をモデル化し、研究することができます。流体力学的特性および培地組成の追加の変調は、所望の微小環境内での複雑な血管機能の制御を可能にします。このプラットフォームは、血管周囲細胞動員、血液 - 内皮相互作用、フロー応答、および組織微小血管相互作用の研究を可能にします。操作された微小血管は、血管ニッチの個々の成分の影響を単離する能力を提供し、正確に健康と病気の両方に血管生物学を研究するために、その化学的、機械的、および生物学的特性を制御します。

操作された容器プラットフォームは、私はマトリックスの天然型コラーゲンの中に埋め込 ​​まれた機能的な微小血管系を作成し、in vitroで 、細胞の生物物理学的および生化学的環境の厳密な制御を可能にします。操作された微小血管を作製するために、ヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）を、それらが特許ルーメンとコンフルエント内皮を形成する添付コラーゲン包埋マイクロ流体ネットワークを介して灌流します。 図1A-Cに示すように、容器の幾何学的形状は、具体的には、とりわけ、流量、ねじれ、および角度を分岐、に関する質問に答えるように設計することができます。微小血管を通る流量を調節することは、内皮細胞のせん断応力応答への洞察を提供します。以前に、製造の焦点は、主に100ミクロンのサイズ範囲の血管に、しかし500ミクロンまでの微小血管されているか、ある場合には、直径が50μmだけ小さくSUCCされていますessfully製培養しました。長期開存の例としては、重力駆動流（ 図2A）と連続印加された流れ（ <st...

この原稿は、内皮の生理学的特性を再現微小血管を設計するための射出成形方法を提供します。マイクロ流体ベースのプロセスは、このような流れ、細胞組成、幾何学、および生化学的勾配などの調整可能な条件、との特許の3D血管ネットワークを作成します。製造プロセスと潜在的な用途の例について説明します。

微細と3D微小血管の組立

In vitro platforms to study endothelial cells and vascular biology are largely limited to 2D endothelial cell culture, flow chambers with polymer or glass ...

人工的に作製した微小血管を用いる全体の目的は、生体内の血管の構造と機能を再現し、正常および疾患状態における血管生理学を研究することです。この手法は、異なる血管細胞が血流にどのように反応するか、それらが組織機能にどのように影響するか、そして血管疾患がどのようにして発生し、時間の経過とともに進行するかといった、血管生物学分野における重要な疑問を解決するのに役立ちます。この技術の主な利点は、さまざまな器官系や疾患状態を模倣するように容易に修正できる点にあります。これは、細胞種、マトリックスおよび培地組成、その他の変数を変更することで実施可能です。一般的に、この手法に不慣れな方は、容器の品質低下を招く一般的なミスに気づくまで苦労することがあります。射出成形および組み立てのステップにおいて、作製を成功させるためのいくつかのコツがあるため、本手法を視覚的に提示することは極めて重要です。本手順に先立ち、平面およびマイクロパターン形成済みのPDMSモールドと、PMMAハウジング部品を準備しておきます。これらの部品の作製方法については、テキストプロトコルに記載されています。PDMSモールドを、ネジ、ピン、ピンセット、スパチュラと共にオートクレーブで滅菌します。PMMA片をオートクレーブで滅菌しないでください。これらはフード内で漂白剤を用いて滅菌する必要があります。PMMA片を漂白剤に少なくとも1時間浸した後、オートクレーブ滅菌水で漂白剤を2回洗い流してください。次に、各パーツを滅菌ディッシュに入れます。余分な水を吸引し、自然乾燥させます。すべての洗浄が完了したら、ハンドヘルドプラズマ処理装置を用いて、上下両方のPMMAパーツの内側ウェルを約1分間処理し、プロトコルを開始します。プラズマ処理のカバー範囲を確認しやすくするため、消灯します。次に、内側のウェルに1% PEIを添加します。PEIが均一に広がらない場合は、プラズマ処理時間を延長してください。PEIを10分間反応させた後、溶液を除去し、デバイスを滅菌水で洗浄して自然乾燥させます。乾燥後、処理した表面に0.1%グルタルアルデヒドを塗布し、30分間反応させます。その後、各パーツを滅菌水で2回洗浄し、自然乾燥させます。次に、あらかじめ割り当てられたストックコラーゲンの量に、培地と水酸化ナトリウムを含む中和溶液を合わせて、血管作製用の新鮮な0.75%中和コラーゲンを調製します。溶液が均一になり、オレンジ色になるまで、スパチュラでゆっくりと慎重に混ぜ合わせます。その後、必要に応じて所定の濃度の細胞を加え、細胞が均一に分散するまで攪拌を続けます。アセンブリ工程の準備として、マイクロパターニングを施したPDMSモールドを100×20 mmのディッシュに配置し、1分間プラズマ処理を行います。次に、正方形のリザーバーが入口および出口のリザーバーと一致するように、上部のPMMAピースをPDMS上に合わせます。その後、コラーゲン注入後も開口状態を維持するため、入口および出口のリザーバー穴にステンレス製ダボピンを挿入します。次に、気泡が入らないように、コラーゲン細胞混合液を1 mLシリンジに充填します。その後、ピンセットを使用して上部のPMMAピースをゆっくりと押し下げてPDMSモールドに固定し、約0.5 mLのコラーゲン細胞混合液を注入ポートからゆっくりと注入します。コラーゲンはパターン上の20 by 20 mmの領域を満たす必要があり、漏れがあってはいけません。次に、ダウエルピンを動かさないように注意してディッシュを閉じます。続いて、底面のPMMAピースの内側ウェルに22 square millimeterのガラスカバースリップを配置します。その後、約0.25 millilitersのコラーゲンをガラス上に均等に分注します。平坦なPDMSをコラーゲンの中にゆっくりと沈め、PMMAに対して気泡が入らないように密着させて下半分を完成させます。次に、デバイスの両半分を慎重に37度 Celsiusのインキュベーターに入れ、次の工程に進む前にコラーゲン溶液を30分間ゲル化させます。ゲル化後、下側のパーツのPDMSの周囲を覆うのに十分な量のPBSを加えます。次に、ピンセットを使用して端にある余分なコラーゲンを取り除き、PBSでコラーゲンの水和状態を維持しながら、平らなPDMS片をゆっくりと剥がします。上部のパーツを準備するために、ピンセットでPMMAとPDMSの組み立て体を持ち上げて反転させます。その後、内側にPBSを数滴加え、上部のPMMA片からPDMSモールドを素早くしっかりと剥がして取り除きます。次に、2組目のピンセットを用いて、PMMAハウジングの反対側からピンを慎重に取り除きます。ピンを抜く前に上下に動かし、入口と出口に過剰なコラーゲンが残っていないことを確認してください。ピンが自然に脱落した場合は、別の滅菌済みダウエルピンを使用して、入口と出口が塞がっていないことを確認してください。次に、マイクロパターン化されたコラーゲンの上にさらにPBSを滴下し、部品を裏返して、4隅の穴にネジを挿入します。次に、ネジを穴に合わせて、上の部品を下の部品の上にそっと置きます。この際、2つの部品が互いに擦れないようにしてください。次に、スパチュラを用いて、締め付けすぎないよう注意しながら、各パーツをゆっくりとねじ合わせて固定します。組み立ての際は、慎重かつ正確に行うことが極めて重要です。PBSを十分に使用することで、内面同士の摩擦を軽減させることができます。ネジを締める際は、ゆっくりと進め、抵抗が感じられたらすぐに停止してください。次に、PMMA表面の周囲にあるPBSを吸引し、デバイスの端の一方に小さな綿片を配置します。その後、リザーバー内のPBSをすべて吸引してください。次に、リザーバーに細胞培養培地を補充し、ゲル化させるためにデバイスを1時間以上インキュベートします。デバイスの組み立てが完了したら、10 million cells/mLの血管内皮細胞懸濁液を用いてデバイスに細胞を播種します。入口および出口リザーバー内の培地を除去し、ゲルロード用チップを装着した20 µLピペットを使用して、細胞懸濁液10 µLを入口リザーバーの中央に添加します。細胞は即座にネットワーク内に流入し、表面を覆います。細胞がネットワークを満たし、流れが平衡状態に達したら、両方のリザーバーに150 µLの培地を加えます。その後、細胞が伸展し接着するように、デバイスを1時間以上インキュベートします。長期培養の場合、12時間ごとに培地を除去し、入口リザーバーに150 µL、出口リザーバーに50 µLの新鮮な培地を補充します。培養開始から24時間後、シリンジポンプを使用して連続流条件を確立させることができます。材料をバイオフード内に移した後、オートクレーブ袋からチューブを取り出し、ディッシュに配置します。次に、側面の穴を溶かしてチューブを通し、滅菌済みのフローディッシュを準備します。3.5% Dextranを含む培地を入れた10 mLシリンジを用意します。続いて、充填したシリンジを入口チューブ末端のルアーロックに取り付けます。次に、シリンジをポンプに固定し、チューブ内の気泡がすべて排出されるまで培地を流します。チューブ内が培地で満たされ、気泡がなくなったことを確認したら、デバイスを新しいディッシュに移し、インレットコネクタジョイントをハウジングのインレットに挿入します。その後、シリンジポンプを目的の流速に設定し、灌流を開始します。18ゲージの針と1 mLシリンジを用いて、チューブに細胞培養培地を満たし、アウトレットを準備します。クランプで固定し、針を抜きます。次に、はんだごてを用いて、アウトレット回収チューブのキャップに穴を開けます。その後、回収チューブに培地を加え、チューブを挿入し、コネクタジョイントをハウジングの出口に取り付けます。この工程の間、クランプを使用してチューブ内に培地を保持します。完了後、セットアップ全体をインキュベーターに移します。実験条件によっては、24〜36時間後にシリンジを補充する必要がある場合があります。シリンジを交換する際は、チューブ内に気泡が混入しないように注意してください。ヒト臍帯静脈内皮細胞をコラーゲン埋込マイクロ流体ネットワークに灌流させ、開存した内腔と合流した内皮層を形成させました。異なる流れ条件を確立するために、いくつかの異なる容器形状が用いられました。内皮細胞に一定のせん断応力を加えるために、連続流培養条件が使用されました。重力駆動流条件下で培養されたデバイスにおいても、長期的な生存能と開通性が維持されました。これらの微小血管の重要な特徴は、炎症刺激に反応できる能力にあります。これは、微小血管に全血を灌流させることで検証されました。刺激を受けていない微小血管には、非活性化状態の内皮が存在し、静止状態を維持していました。刺激された微小血管が活性化し、その反応によって血栓形成が開始されました。このシステムのもう一つの興味深い応用例は、異なる血管内皮細胞集団から形成された血管系における表現型の変化を研究することです。例えば、特有の幹細胞集団から形成された微小血管は、異なる血管新生出芽能を示しました。このビデオを視聴することで、微小血管を作製し、それを用いて血管生物学の研究や複雑なモデル臓器システムの構築を行う方法について、十分な理解を得ることができます。この手順を試みる際は、練習を重ねることで血管形成の成功率が向上し、より一貫した結果が得られるようになることを忘れないでください。習得すれば、3〜4時間で複数のデバイスを作製することが可能です。この手順に従った後、全血灌流、デキストラン投与、または薬剤投与などの他の手法を実施し、内皮細胞の静止状態、透過性、薬剤反応性、および細胞と血管の全般的な形態を評価することができます。

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

バイオエンジニアリング（生体工学）

我々は、細胞の捕獲と文化を可能にすることができるマイクロ流体デバイスの作製のためのプロトコルについて説明します。このアプローチではこのようなマイクロ流体チャネル内の溝のようなパターン化された微細構造は、セルがドッキングすることができる内に低せん断応力領域を作成するために使用されています。...

細胞挙動を研究するための溝パターンを用いたマイクロ流体デバイス

我々は、三次元細胞培養用多孔性ポリマーチップの微細加工のための2つのプロセスを提示する。最初のものは、溶剤蒸気の溶接プロセスと組み合わせて熱エンボス加工です。もう一つは製造の大幅な簡素化につながるイオン飛跡技術と組み合わせた最近開発microthermoformingプロセスを使用しています。...

三次元細胞培養用チップサイズの足場の微細加工

犠牲成分（VASC）工程の気化を微小構造を作製するために使用される。この手順では、レーザーマイクロマシンガイドプレートが提供する正確な3D幾何学的なポジショニングと中空マイクロチャネルを形成するために犠牲（乳酸）、ポリ乳酸繊維を使用しています。...

犠牲成分の蒸発を用いた三次元微細構造を作る過程

サポートされている脂質二重層と天然膜粒子は、細胞膜の特性を近似することができると分析種々の戦略に組み込むことが好都合システムである。ここでは、サポートされている脂質二分子膜でコーティングされたSiO 2ビーズ、リン脂質小胞または天然の膜粒子からなるマイクロアレイを調製するための方法を実証する。...

スキージベースアセンブリ法による生体膜マイクロアレイの形成

液滴界面の脂質二重層に対するマイクロ流体噴射は、膜の非対称性、膜貫通タンパク質の取り込み、および材料のカプセル化を制御して小胞を生成するための信頼できる方法を提供します。この技術は、区画化された生体分子が所望される生体系の様々な研究に適用することができる。...

マイクロ流体ジェッティングを使用して、脂質二重層小胞の生成

ここでは、キャピラリーベースの遠心マイクロ流体デバイスを使用して、サイズ制御可能な単分散油中水型(W /...

単分散微小液滴のサイズ制御可能な形成のためのキャピラリーベースの遠心マイクロ流体デバイス

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血管由来のマイクロ流体ネットワークの画像誘導、レーザーベースの試作

このレポートは、低圧真空を使用して、生物学的研究のための細胞と基質でマイクロ流体チャネルを充填するためのシンプルで実行しやすい技術について説明しています。...

パターニングタンパク質および細胞の多彩な方法

ここで示すプロトコルは、哺乳類細胞内の細胞骨格構造を研究するために細胞形状を標準化するマイクロパターンの自動製作を可能にする。このユーザーフレンドリーな技術は市販のイメージ投射システムと設定することができ、標準的な細胞生物学の実験室にアクセスできない専門の装置を要求しない。...

赤外線レーザー支援マイクロパターンによる細胞形状の制御

マイクロ流体プラットフォーム内の毛細管現象支援アセンブリを用いて、細菌やコロイドなどの液体中に浮遊するマイクロサイズの物体をポリジメチルシロキサン基板上の所定のアレイにパターニングする技術を提示する。...

シーケンシャルキャピラリティーアシストアセンブリによる微生物と微粒子のパターニング

三次元細胞培養基材のUVフォトパターニングによるマルチキュー細胞微小環境の生成

学ぶ インジェクション成型法による微小血管の作製技術。生理学的特性を持つ3D血管ネットワークを構築し、血流や細胞組成を制御して血管生物学と疾患メカニズムの研究に応用する。

微細と3D微小血管の組立

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