Name: 犬と猫における腫瘍の治療のための電気化学の操作手順 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: 学ぶ電気化学療法による犬と猫の皮膚・皮下腫瘍治療法。電気パルスと抗腫瘍薬の併用により薬物取り込みを増強し、低用量で全身副作用を最小限に抑えながら優れた治療効果を実現する。

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著者らは、スロベニアの研究機関が国家予算から受けた財政的支援を認めています（プログラム番号P3-0003、プロジェクト番号J3-6796）。この研究は、EBAM欧州関連研究所(LEA)の範囲で行われました。この原稿は、COST Action TD1104のネットワーキング努力の結果です。Alenka Seliskar氏、Mojca Juvan氏(Clinic for Surgery and Small Animals、獣医学部)、Jakob Konda氏(Institute of Oncology、リュブリャナ、リュブリャナ、スロベニア)の貴重なご協力に感謝いたします。

このプロトコルは、農林食品省の倫理委員会によって承認され、そのガイドラインに従いました。プロトコルは、80以上の犬や猫20で検証しました。 注：ECT治療は、シスプラチンまたはブレオマイシン及び電気パルスに腫瘍結節の暴露の投与からなります。 1.患者の選択注：患者の選択は、医師は、患者がこの治療の恩恵を受けるのに適しているか否かを判断することができます。 <ol><li>患者の病歴（再発の年齢、品種、性別および任意の同時疾患の存在、腫瘍の種類、時間とともに腫瘍の進展、以前の治療とその結果、再発と速度に関する一般的なデータを評価し、のsuccessfulnessについて所有者の期待療法）。 </li><li>患者の身体検査を行います<ol><li>メートルために詳細には腫瘍を評価します潜在的に侵襲性の腫瘍が提示される場合、広いマージンが（サイズについて決定を下す治療：AKE可能臨床鑑別診断とは、治療領域を決定するために、組織学的評価のために細胞学評価及び可能な組織生検用の細針吸引を行います、1cmのマージンが扱われるべき腫瘍、 例えば 、≤1センチメートル2R肥満細胞腫瘍の同じタイプのための任意の他の治療のための勧告に従って処理マージン; R -半径）。 </li><li>治療アプローチを調製するために結節の数と大きさを評価します。 </li></ol></li><li>一般的な検査<ol><li>疾患の病期分類を行い、確認するために完全な一般的な検査を実装します。 <ol><li>患者が血液学的またはcoagulatを変える可能性の慢性感染症の歴史（特定の地域で疫学に従って）または免疫媒介性疾患を持っている場合は、治療を妨げる可能性があり、他の同時疾患が存在しない場合イオンの変化（特定のテストを実行する）、動物は、患者がシスプラチンに対する感受性を持っている場合、深いsedationsおよび/または全身麻酔の一連に耐えることができる場合（標準用量は、60〜70ミリグラム/ m 2体表面積/ 21でありますD）またはブレオマイシンまたはすでに400.000 IU / m 2とを超えるブレオマイシンの累積線量を受けています。 </li></ol></li><li>腫瘍の種類に応じて任意の可能な転移を確認するために、画像診断技術（腹部の胸部や超音波検査のX線撮影）を使用します。 </li></ol></li></ol> 2.研究所の分析<ol><li>血液検査<ol><li>血中尿素窒素（BUN）の生化学パネル、クレアチニン、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）、アルカリホスファターゼ（AF）とを決定するために、高度な慢性腎臓および肝臓疾患および可能な最も頻繁な腫瘍随伴症候群を除外するカルシウムと分析完了血液を行いますEFを有していてもよい臨床病期予後にfect。 </li><li>追加の特定の血液分析を行います。 <ol><li>患者が潜在的に凝固能の変化を変更する可能性のある薬を与えられた場合、凝固プロフィールをチェックしてください。 </li><li>侵襲的治療（針電極）を使用している場合、血小板数を確認してください。血小板の数は&gt; 100であるべきかの場合には、&lt;100、凝固プロファイル（PT、APTT、フィブリノゲン、Dダイマー）が正常であるべきです。 </li><li>特定の場合では、腫瘍性疾患及び患者の臨床状態に応じて、総タンパク質、アルブミン、蛍光体、ナトリウム（Na）、カリウム（K）をチェックし、塩化物（CL）およびリパーゼ濃度。 </li></ol></li></ol></li><li>腫瘍（単数または複数）の組織学的分析<ol><li>細胞学的診断は、以前に実行された場合、組織学分析は不要です。組織学的グレードが重要な予後因子である特定の腫瘍タイプ（ 例えば、肥満細胞腫瘍）の場合には、ヘマトキシリンおよびエオシン駅を行いますining 16。 注：生検（切開または「パンチ」）は、同じ訪問中にECTの前に行うことができます。いずれの場合においては、腫瘍型を診断するための優れた臨床診療です。 注：ケースを完全に評価された後、動物の所有者との徹底的な議論と明確化が必要です。臨床結果の面でECTから期待できるものECTとは何か、所有者に説明してください。全身麻酔や深い鎮静、治療の全期間、治療費、再発の可能性下ECTセッションの数：所有者と治療経過について話し合います。患者が実際に資格がある場合は、ECTの臨床試験中の患者を含める場合には、所有者の書面による同意を得ます。 </li></ol></li></ol>治療モダリティの3選択肢注：犬はシスプラチンおよびブレオマイシンを使用ECTのために。シスプラチンは、猫には禁忌であるようネコにおけるECTのために、唯一のブレオマイシンを使用します。 <ol><li&gt;個別に各腫瘍を扱います。場所と各結節の大きさと治療プロトコルの概要を説明するための結節の数を決定します。 </li><li>式V =ab²π/ 6（ &quot;&quot;より大きな腫瘍結節の直径と「B」「A」に対して垂直に腫瘍結節の直径である）、またはV =abcπ/ 6（ &quot;を使用して腫瘍結節の体積を計算しますA」、「B」および「C」）は、腫瘍結節の三垂直直径です。 </li></ol>営業モダリティの4選択肢<ol><li>電極の選択 注：電極構成は、組織内の電場分布に影響を与えるように最適な電極の種類を選択することが重要です。電極の2つのタイプが使用されています。プレートと針電極を。プレート電極は、並列ステンレス板を持っている：電極間の内側の距離は、腫瘍の大きさや電気パルスの発電機の容量に依存します。通常、距離があること電極をトゥイーン6〜8ミリメートルです。針電極は、行（平行配列）または六角形の幾何学形状に配置することができます。六角形の電極は、円形アレイ内の中央針と6針を持っています。パルスは、円形配列で、それらと中央1間に電極間に印加されています。パルスは、電極の各対の間の両方向に適用されます。腫瘍結節の深さに応じて電極の種類を選択して、全体の目的の治療部位に適切なエレクトロポレーションを提供します。特定の標的組織に応じて電極を選択してください。一般に、電極の両方のタイプは、治療に使用することができます。 </li><li>シスプラチンまたはブレオマイシンの選択と準備 注：ECTは、シスプラチンまたはブレオマイシンまたはブレオマイシン及び電気パルスに腫瘍結節の暴露の静脈内投与の腫瘍内投与からなります。 <ol><li>適切な細胞増殖抑制性およびその投与経路を選択します。 </li><li> CIを溶かします1mg / mlの濃度で蒸留水に粉末として得られた場合splatin（シス - ジアミンジクロロ白金II）、（そうでなければ薬学的に調製した溶液を使用することができます）。腫瘍内シスプラチンを与えます。 </li><li> 3mg / mlの濃度で生理食塩水中のブレオマイシンを溶解し、腫瘍内または静脈内に与えます。 </li></ol></li><li>麻酔 注：オペレーティング・モダリティに依存した （ 表1）深い鎮静状態または全身麻酔を使用することができます。 <ol><li>米国麻酔学会」（ASA）のための可能な腫瘍随伴症候群の腫瘍の種類に応じて物理的な状態の分類とに応じて患者を評価します。 </li></ol></li><li>ディープ鎮静<ol><li>犬に酒石酸ブトルファノール（0.1ミリグラム/ kg）でメデトミジン（0.08ミリグラム/ kg）または二重の組み合わせメデトミジン（0.025ミリグラム/キログラム）を使用するか、特定の病院で深い鎮静のための標準的な手順に従ってください。 </li></ol></li><li>全身麻酔<ol> &lt;LI&gt;アセプロマジン（0.02ミリグラム/キログラム）とメタドン（2ミリグラム/キログラム）でPremedicate。 </li><li>三十分後チオペンタール（5ミリグラム/ kg）またはプロポフォール（1ミリグラム/ kg）で全身麻酔を誘導します。 </li><li>気管内チューブを配置し、Tピース麻酔回路を介して配信酸素にイソフルランで麻酔を維持します。 </li><li>麻酔中に非ステロイド鎮痛薬（ 例えば、カルプロフェン2-4ミリグラム/キログラム）の単回投与で10ml / kg /時間および鎮痛の割合でハルトマンの溶液と流体支援処理を使用しています。 </li><li>麻酔下ながら乾燥を防ぐために、眼軟膏を使用してください。それは胸骨横臥位に十分な意識を取り戻すまで処理した後、患者を監督。約2〜4時間のための診療所で患者をしてください。 注：特定の病院で全身麻酔のための標準手順も続くことができます。 </li></ol></li><li>動作環境 注：オペレーティング人事は、訓練を受けたECT演算子（DVM）、麻酔科医とアシスタントです。 <ol><li&gt; ECTが深い鎮静下で実行される任意の救急室や全身麻酔が許可されている任意の外科手術用の部屋を使用してください。 </li><li>麻酔のための手順に従って、鎮静および/または全身麻酔の使用のために必要なすべての機器。 </li><li> ECTの手順については物質一覧で必要なすべての資料を参照してください。 </li></ol></li><li>オペレータと周囲の人員保護 注：抗腫瘍薬に対する皮膚の液滴露出はほとんど深刻な問題を引き起こしません。シスプラチンおよびブレオマイシンは、無傷の皮膚から吸収されていません。シスプラチンは唯一の刺激を引き起こすことがあります。会社結節または腫瘍を注入する際シスプラチンおよびブレオマイシン漏れが発生する可能性があります。針刺し損傷の場合には、水の豊富で洗浄し、標準的な医療行為に従って傷の世話をします。 <ol><li>マスクと手袋とオペレータと周囲のアシスタントを保護します。シスプラチンまたはブレオマイシン溶液への皮膚暴露の場合には、すぐに水でかつ豊富にすすぎます。 </li&gt; <li>もしあれば、抗がん剤の使用状況に関する現地の規制を遵守品質保険プログラムに従ってバイオセーフティ対策を設定します。 </li></ol></li><li>電気パルスの発生 注：電気パルスの適用は、電気パルスの発生器で行うことができます。一般的に、装置は、統合されたソフトウェアと事前設計された電気パルスを選択するためのタッチスクリーンインターフェースを有する方形波パルス発生器です。これは、コードによって発電機に取り付けられたパルス活性化ボタンで手持ち電極ホルダーが装備されています。電気パルスの送達は、フットスイッチによって制御することができます。電気パルスの発生装置は、欧州連合（EU）の基準を満たさなければならない：2006/95 / CE電磁適合性および準拠すべきであるに関する2004年12月15日から特定の電圧限度内で使用される電子材料に関する2006年12月12日、2004/108 / CEからFDAの規制。 </li><li>電気パルスの印加手順 注：番目電気パルスの電子アプリケーションは、シスプラチンまたはブレオマイシンの腫瘍内投与、またはブレオマイシンの静脈内投与の後に続きます。腫瘍内の細胞増殖抑制投与する場合漏れを防ぐためにゆっくりと適用されるべきです。静脈内の管理細胞増殖抑制剤は、約30秒を持続ボーラスに適用されるべきです。水ベースのゲルは、皮膚と電極のいずれかのプレートまたは針との間の良好な接触を達成するために、より少ない不均質な電界分布を達成するために使用されます。ゲルの導電率は、0.5〜1 S /メートル17,18の間であるべきです。使用されるゲルの導電率は0.5 S / mでした。プレート電極は、腫瘍は、それらの間に含まれるように配置されるべきです。また、電界のより良好な分布を達成するために、電気パルスの印加は、垂直方向に2回実施されるべきです。腫瘍は、電極間の距離よりも大きい場合、電極の適用スターべき（安全マージンを含む）は、腫瘍の縁からtと腫瘍の中心に向かって進行。針電極の場合には、注意がすべての針が、電場の適切な分布を達成するために組織内に挿入されていることを注意すべきです。ゲルの適用が必要とされません。そうでなければ、手順は、板状電極の場合と同様です。 <ol><li>電気パルスの適用領域で皮膚を脱毛します</li><li>シスプラチンまたはブレオマイシンを管理します。細胞増殖抑制剤を投与された場合に、静脈内に8分間待ち、電気パルスの送達のための時間間隔は20分です。細胞増殖抑制が腫瘍内に投与された場合は、直ちに電気パルスのアプリケーションで始まる（注射後1分以内）。 </li><li>電気パルスを印加する前に脱毛皮膚に水ベースのゲルを適用します。 </li><li> 1300 V /距離比率を電極にパルス持続時間100μ秒、振幅：プレート電極は、これらのパルスパラメータを使用するためcmで、周波数1 Hzまたは5 kHzの。 2垂直方向に、1秒間隔で、4つのパルスの2系列で8単極性電気パルスの各実行を提供します。 </li><li>パルス持続時間100μ秒、距離比千V / cmで、周波数1または5キロヘルツを電極に振幅：行のための針電極は、パルスパラメータを使用します。単極性電気パルスの各実行は、8つのパルスで構成されています。 </li><li>針電極の場合は、六角形の設定と使用パルスパラメータにアレンジ：パルス持続時間100μ秒。 （電極間の距離は7mmであれば、1040 V / cm）の六角形電極730 Vの定電圧を有し、5キロヘルツの周波数とパルス数と針の数に依存します。 7針の場合には24パルスが印加されます</li></ol></li><li>汚染物質の処分。 <ol><li>焼却のために意図されたコンテナ内のすべての汚染物質（注射器、針、バイアル、ガーゼ、手袋）を処分。 </li></ol></li></ol>注：各来院時に、腫瘍結節は、ノギスや撮影で測定されています。これらの訪問も可能で局所および全身性の副作用を評価するために役立ちます。完全寛解（CR）などの治療への応答&quot;固形腫瘍における応答評価基準」の基準に基づいて、4週間後に採点さを（RECIST）19 -結節の消失、パーシャルレスポンス（PR） -少なくとも30％参照として、ベースライン合計直径を取って、標的病変の直径の合計の減少、進行性疾患（PD） - 標的病変の直径の合計における少なくとも20％の増加を基準として最小を取ります合計で検討し、安定な疾患（SD） - PRのために修飾するために十分な収縮、も参照最小合計直径としたPDのために修飾するための十分な増加、どちらも。すべての応答の定義については、最低4週間の期間はquのために必要とされます応答の各タイプをalifying。観測時間は、最初の処置の日付と患者の最後の検査の日付の間の間隔として計算されます。各フォローアップ検査時20 -可能性のある副作用は、獣医共同腫瘍学グループの毒性尺度（CTCAE VCOG）に応じて決定されます。 <ol><li>治療後の予定1週間のスケジュールを設定します。 2週間の治療後に予定をスケジュールします。 4週間の治療後に予定をスケジュールします。 4週間後、月に一度の予定をスケジュールします。 </li></ol>

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著者らは開示するものは何もない。

電気化学は、犬や猫で異なる原発腫瘍または転移に対して非常に有効であることが判明しています。電気化学は、孤独や複数の皮膚または皮下腫瘍結節のためまたは手術への補助治療として根治目的で使用することができます。マスト細胞腫瘍を含むイヌのいくつかの腫瘍の選択の標準的な治療は、腫瘍の外科的切除です。イヌにおいて肥満細胞腫瘍の治療にECTの標準治療として手術を比較した研究では、手術はECT手術と同等の治療で完全な応答11実証の50％をもたらしたECTでの処理が完了した応答の70％をもたらしたことを示しました。 ECT 2つの条件の顕著な抗腫瘍効果についてはプロトコル内の重要なステップである、満たされなければなりません。最初のものは、細胞増殖抑制剤の投与です。標的組織における薬物の存在は、ECTの効率を決定します薬剤は、それらを殺すために細胞内に存在する必要があります。腫瘍内に薬剤を注入すると、良好な組織保持の符号は、組織ホワイトニングです。また、投与後の溶液のいくつかの漏れは、腫瘍内またはさらにECTセッション中に組織を壊死に針によって生成貫通孔を発生する可能性があります。したがって、1ミリグラム/ cm 3の（シスプラチン）または3,000 UI / cm 3以下に達する（ブレオマイシン）の濃度は、それらの場合には、純粋に理論的な可能性が、しかし、目標は、標的組織にできるだけ溶液を保持しようとすることです。さらに、電気パルスは、溶液の保持に寄与する血管収縮効果を得るために可能な限り迅速に適用されるべきです。 2つの異なる投与経路はECTで使用することができます：腫瘍内および静脈内。腫瘍内シスプラチンまたはブレオマイシンでまたは静脈内ブレオマイシンとECTの抗腫瘍効果は、ELEのに対し、21と同等ですシスプラチンの静脈内適用とctrochemotherapyは、したがって、シスプラチンのみ腫瘍内投与に使用されている22あまり効果的です。シスプラチンの薬の別の重要な特徴は、シスプラチン猫23で非常に有毒であることが示されているように、ネコでの使用が禁忌であるということです。患者は、1つまたはごく少数の結節を有している場合には、腫瘍内ルートが推奨されます。結節の数は〜5結節を超えると、静脈内経路が推奨されます。ブレオマイシンは、その高い親水性の性質のために、そうではないシスプラチンの腫瘍内注射は、あっても、電気パルスを印加することなく、いくつかの抗腫瘍効果を持っています。したがって、シスプラチンは、腫瘍内のアプリケーションは犬で可能である場合、選択した最初の薬です。これは、ECTの効果的な抗腫瘍作用のために満たされなければならない第二の条件で重要であり、それが十分に高い電界に全腫瘍の報道です。細胞の増加を得るために、膜透過性は、組織内の誘導電界は、一定のしきい値を超えなければなりません。組織内の電界分布は、したがって、使用されている電極の種類が重要であり、電極に依存します。プレートまたは並列アレイ電極を安全に小さな表在性腫瘍24のために使用することができます。腫瘍が厚く大きい場合には、六角形の電極が適しています。重要な事実は、電気パルスの印加は、全腫瘍領域は、安全マージンを含む、被覆されているように、繰り返すことができることです。電気パルスは、血管ロックを引き起こすので、それらのアプリケーションは、その中心に向かって、腫瘍の端から開始する必要があります。 現在、技術の限界は根深い腫瘍の治療を防ぎ、電極の可用性です。しかし、電極の構成が急速に発展し、今の電極の異なるセットをfを使用している技術的特徴であります脳腫瘍8または特定行政長い針肝臓25における結腸直腸腫瘍の転移のための単一の電極、骨転移7、軟部組織肉腫26、大腸用の管腔内の電極、胃と食道の腫瘍27および拡張可能な&#39;&#39;傘&#39;&#39;型電極。 ECTは、一回の治療として有効であり得るが、障害または部分腫瘍応答の場合には、改善された有効性を数回繰り返すことができます。 ECTは、地元のアブレーション治療法です。そのローカルの有効性は、ローカル腫瘍制御の80％までが、治療の別の制限である遠隔転移7、上の顕著な効果なしです。したがって、全身的応答を達成するために、ECTは、他の治療と組み合わせることができます。最近、我々は、 すなわち 、エレクトロポレーションの別の生物医学アプリケーションと免疫調節molecの遺伝子エレクトロをECTを組み合わせた提案しましたULEインターロイキン12（IL-12）、その抗腫瘍活性のために知られています。 IL-12とECT及び遺伝子エレクトロの組み合わせはすでにまた遠隔転移の再発を防止し、高い完全寛解率28と副作用なしと良好な局所腫瘍を有する安全な併用療法であることが示されています。 結論として、電気化学の利点は、その単純さ、治療セッションの短期間、低細胞増殖抑制用量と些細な副作用があります。また、それは外来で行われ、したがって、患者が病院に滞在する必要はありません。 今日では、市場での電気パルスの異なる発電機の可用性は、信頼性を失うことなく発電機の価格の低下と、それによって電気化学をさらに手頃な価格にもつながる、増加しています。これらはすべて、獣医学において、この治療法の普及につながるはず。

ECTは、異なる組織型の腫瘍の治療のための局所切除の技術です。薬剤の腫瘍内または静脈内注射後の腫瘍の周りの皮膚に電気パルスの直接送達によって誘発される変更された細胞膜の透過性に起因する細胞内で増加した薬物の蓄積の結果である薬剤誘発される細胞死からのアブレーション結果。 ECTの主な機構は、細胞膜electropermeabilization（エレクトロポレーション）1,2により、増加した細胞内薬剤蓄積による細胞増殖抑制剤の有効性を増強することです。ブレオマイシンおよびシスプラチン、貧弱な膜透過性を有する親水性薬剤である：エレクトロポレーションは、2細胞増殖抑制剤の増加した薬物の取り込みを引き起こします。電気パルスの適用部位におけるブレオマイシン及びシスプラチンの増加細胞毒性に、低い薬物投与量は、良好な抗腫瘍効果のために必要とされ、その結果、薬物のない、または最小限の全身的な副作用はobservません編3。 ECTの別の特徴は、血管ロックで、まず、その結果、腫瘍の抗血管効果、 すなわちである。内皮細胞の、 すなわち 、アクションを中断する血管に第二に、その中に血液腫瘍内の流れ、および細胞増殖抑制剤の結果として保持を減少し、直接の殺害小血管の二次腫瘍細胞死4-6につながります。 ECTは、腫瘍の周囲に流し腫瘍抗原による免疫応答を誘発するようECTの抗腫瘍効果の第3の機構は、免疫系の活性化です。免疫系の関与は、腫瘍7の完全な根絶のために重要です。 ECTは、それが客観的反応3の80％までを呈するようECTはすでに皮膚と皮下腫瘍のための標準治療として使用されるヒト腫瘍学、に大きな可能性を示しています。また、ECTは、脳における腫瘍転移を治療するいくつかの臨床試験で使用され<s&gt; 8、骨9と肝臓10アップ。獣医学腫瘍学における臨床研究はすでに犬11、12、ネコ13馬14の皮膚と皮下腫瘍を治療する場合、最大80％ECT処理結果が目的の応答を長時間持続することが実証されました。抗腫瘍効果は、腫瘍の大きさに依存し、より大きな腫瘍15よりも小さい2cmより3応答より良い腫瘍が。 また、イヌにおいて肥満細胞腫瘍の治療にECTで手術を比較した研究は、手術が完了応答の50％ECTは、手術に相当する処理である11実証をもたらしたECTでの処理が完了した応答の70％をもたらしたことを示しました。さらに、ECTは、所有者が手術に同意しない、または腫瘍が自分に主に起因する明確なマージンと消費税が困難な場合する場合、特にそのような場合には、外科的治療に固形腫瘍を治療するための代替方法を表し場所（ 例えば 、主要な血管を浸潤し、頭部や脚の腫瘍、肛門領域内など ）。本稿の目的は、安全かつ適切に犬や猫に皮膚および皮下腫瘍を治療するために、電気パルスのアプリケーションと組み合わせて、シスプラチンおよびブレオマイシンの使用のための指示を与えるECTの操作手順を定義することです。

<table><tbody><tr><td>Cisplatin Kobi</td><td>Fresenius Kobi Oncology、ハンプシャー、イギリス</td><td></td><td>細胞増殖抑制剤</td></tr><tr><td>Bleomycin PCH</td><td>Pharmachemie B.V.、ハールレム、オランダ</td><td></td><td>細胞増殖抑制剤</td></tr><tr><td>AquaUltra Basic</td><td>Ultragel、ブダペスト、ハンガリー</td><td></td><td>水性ゲル&nbsp;</td></tr><tr><td>電気パルセータ ELECTROvetS13&nbsp;</td><td>Leroy biotech、トゥールーズ、フランス</td><td></td><td>方形波パルス発生器</td></tr></tbody></table>

犬と猫における腫瘍の治療のための電気化学の操作手順

Operating Procedures of the Electrochemotherapy for Treatment of Tumor in Dogs and Cats

電気化学（ECT）は、異なる組織型の固形腫瘍を治療するために使用される局所的なアプローチです。そのメカニズムは、「エレクトロポレーション」によって、細胞膜透過性に基づいています。細胞の「エレクトロポレーション」を達成するために、電気パルスが発生器によって生成された電極を用いて標的組織に送達されます。エレクトロポレーションは、細胞増殖抑制剤のような、それ自体で細胞膜を通過することができなかった細胞に分子を導入するために使用される物理的な方法です。電気化学では、現在、シスプラチンおよびブレオマイシンは、臨床的に使用されています。電気化学の抗腫瘍効果は、イヌ肥満細胞の100％完全な応答までの例えば小さい2cmより3が達成された腫瘍が、高いです。さらに、電気化学は、手術不能の腫瘍の治療に用いることができます。電気化学の重要な特徴の一つは、それが一回の治療として有効であることですのみ。しかし、障害または部分的腫瘍応答の場合には、同等または改善された有効性を数回繰り返すことができます。電気化学は、すでにヒトおよび動物腫瘍学における様々な組織像の皮膚と皮下腫瘍のための標準的な治療法です。また、根深い腫瘍のための電気化学を利用するいくつかの臨床研究が-に行くです。

場合は、犬のまぶたに位置肥満細胞腫瘍を提示します。患者は、腫瘍内注射シスプラチンと平板電極を用いた8電気パルスの適用で処理しました。 腫瘍の大きさは5mmでした。 、腫瘍の位置、全身麻酔の敏感な部分に使用されました。シスプラチンの腫瘍0.5ミリリットル（0.5ミリグラム）の大きさに応じて腫瘍内に注射しました。 1分間注入した後に電気パルスを8mmプレート電極を用いて塗布しました。電気パルスのいずれか一方のみの実行を適用しました。それは十分な意識を取り戻しまで治療後患者が監修しました。患者は2時間後に釈放されました。 1週間後、患者は定期的にチェックアップのために来ました。腫瘍潰瘍や腫瘍周辺は少し腫れていました。腫瘍はノギスや撮影によって測定しました。一ヶ月treatmen後トン腫瘍のさらなる証拠は認められませんでした。傷を閉じ、脱毛症で瘢痕は、治療部位で見られました。犬は痛みの兆候を示さなかった処理の後、まぶたの機能は、全体の治癒期間中に保存されていると、治療後の化粧品の効果が優れています。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/54760/54760fig1.jpg" /> 図1の 電気化学処理。処理（A）、一週間（B）、一ヶ月（C）と3ヶ月の処置（D）の後の前に犬を示す図。 （A）下眼瞼上のマスト細胞腫瘍。治療の前に5ミリメートルの腫瘍の大きさと2.5歳のドイツのボクサー犬。 （B）治療後に腫瘍が潰瘍化し始め、エレクトロポレーション領域を囲む組織が少し腫れになりました。二つの我々EKS治療後の地殻は、腫瘍部位に形成され、（図示せず）から落ちました。 （C）一ヶ月電気化学後の腫瘍の証拠は認められなかったと脱毛との瘢痕は、腫瘍部位で見られました。 （D）電気化学総再上皮後3ヶ月は、腫瘍の部位で発生した。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54760/54760fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td colspan="2">オペレーティング・モダリティ（OM） </td></tr><tr><td>腫瘍結節の数、体積及び場所</td><td> A </td><td> B </td></tr><tr><td> 1から3結節&lt;皮膚および口腔腫瘍cm³1 </td><td> √ </td><td></td></tr><tr><td> &gt; 3結節、任意のボリューム皮膚や口腔腫瘍ヘッド</td><td></td><td> √ </tD&gt; </tr><tr><td>任意の数、皮膚および口腔腫瘍ヘッドの任意のボリューム</td><td></td><td> √ </td></tr></tbody></table> 営業モダリティの表1の選択は、腫瘍結節の数とサイズに基づいているディープ鎮静= OM A。;全身麻酔= OM B. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>腫瘍の化学療法薬/サイズ</td><td>腫瘍内のアプリケーション</td><td>静脈内適用</td></tr><tr><td>シスプラチンの用量（1 mg / mlで）&lt;1 cm 3で</td><td>腫瘍の1ミリリットル（1 mg）を/ cm 3の</td><td></td></tr><tr><td>シスプラチンの用量（1 mg / mlで）&gt; 1 cm 3で</td><td>腫瘍の0.5から1ミリリットル（0.5〜1ミリグラム）/ cm 3の</td><td></td></tr><tr><td>ブレオマイシン投与（3,000 IU / ml）の&lt;1 cm 3で</td><td> tumoの0.5ミリリットル（1500 IU）/ cm 3のR </td><td> 300 IU / kgの</td></tr><tr><td>ブレオマイシン投与（3,000 IU / ml）の&gt; 1のcm 3で</td><td> 0.5〜1ミリリットル（1,500〜3,000 IU）/腫瘍のcm 3の</td><td> 300 IU / kgの</td></tr></tbody></table> 表2イヌの投与経路および腫瘍の大きさに応じて細胞増殖抑制剤の適切な注入量。 <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>腫瘍の化学療法薬/サイズ</td><td>腫瘍内のアプリケーション</td><td>静脈内適用</td></tr><tr><td>ブレオマイシン投与（3,000 IU / ml）の&lt;1 cm 3で</td><td>腫瘍の0.5ミリリットル（1500 IU）/ cm 3の</td><td> 300 IU / kgの</td></tr><tr><td>ブレオマイシン投与（3,000 IU / ml）の&gt; 1のcm 3で</td><td> 0.5〜1ミリリットル（1500 - 3000 IU）は、腫瘍の/ cm 3の</td><td> 300 IU / kgの</td></tr></tbody></table>ネコの腫瘍の大きさに応じてキープtogether.withinページ= &quot;1&quot;&gt; 表3の細胞増殖抑制剤の適切な注入量 ：FOお尻= &quot;jove_content&quot;。

電気化学療法は、固形腫瘍の局所治療です。主なメカニズムは、エレクトロポレーションを介した腫瘍細胞膜の透過化であり、ブレオマイシンやシスプラチンなどの細胞増殖抑制剤の内在化を促進します。したがって、抗腫瘍効果は、腫瘍への電気パルスの印加部位で増強されます。

Electrochemotherapy (ECT) is a local approach which is used for treating solid tumors of different histologies. Its mechanism is based on cell membrane ...

本手順の全体的な目的は、細胞静止薬と電気パルスの適用を組み合わせて、犬および猫の皮膚および皮下腫瘍を治療することです。電気化学療法は、異なる組織型の固形腫瘍の治療に用いられる局所的なアプローチです。そのメカニズムは、エレクトロポレーションによる細胞膜の透過性亢進に基づいています。電気化学療法（electrochemotherapy）の主なメカニズムは、電気穿孔法（electropermeabilization）によって細胞内への薬剤蓄積を増加させ、化学療法剤の有効性を高めることです。エレクトロポレーションは、膜透過性の低い親水性薬剤であるブレオマイシンとシスプラチンの2種類の化学療法剤の細胞内取り込みを促進します。本症例では、下眼瞼に肥満細胞腫と診断されたジャーマン・ボクサー犬への治療手順について示します。電気化学療法では、腫瘍内投与と静脈内投与という2種類の異なる投与経路を用いることができます。シスプラチンは腫瘍内に投与可能であり、ブレオマイシンは腫瘍内または静脈内のいずれでも投与可能です。薬剤の濃度は低いため、全身性の副作用は認められません。電気パルスの適用は、適切な振幅、持続時間、および十分な周波数を持つ矩形波電気パルスを生成できる電気パルスジェネレーターであれば、どのような装置でも実施可能です。本ビデオの作成に使用したジェネレーターには、事前設計された電気パルスを選択するための統合ソフトウェアとタッチスクリーンインターフェースが搭載されています。また、コードでジェネレーターに接続された、パルス作動ボタン付きの手持ち式電極ホルダーが備わっています。電気パルスはフットスイッチによってトリガーされます。薬剤を腫瘍内に注入する際、組織が白くなることが良好な組織保持の兆候となります。腫瘍内注入中に起こり得る薬剤の漏出に注意してください。血管収縮効果を得るために、電気パルスは可能な限り速やかに印加する必要があります。この効果により、注入された薬剤溶液の保持が促進されます。電極と皮膚の良好な接触が極めて重要であり、プレート電極を使用する場合は、除毛および水溶性ゲルの塗布によってこれを確実にすることができます。電気パルスは、さまざまな構成が可能な電極を介して供給されます。プレート電極または針電極を使用できます。どちらを選択するかは、腫瘍の位置、大きさ、および厚さに依存します。本事例では、電極間距離が7 mmの非侵襲的なステンレス製プレート電極を使用しました。タッチスクリーンで矩形波電気パルスのパラメータを設定します。エレクトロケモセラピーのもう一つの特徴は、血管ロック、すなわち腫瘍内の血流減少を誘導することであり、その結果として化学療法剤が腫瘍内に保持されます。これは軽度かつ短時間の虚血として捉えることができます。したがって、この血管破壊効果により、治療した腫瘍からの出血の可能性が抑制されます。局所的および全身的な副作用の可能性を評価するため、1週間後に最初の検査を行うことが推奨されます。1週間後、腫瘍に潰瘍が生じ、腫瘍周囲に軽度の腫脹が認められました。1ヶ月後のフォローアップ診察は、治療反応の評価として行われます。治療反応は腫瘍体積の差に依存します。そのため、ノギスを用いて腫瘍結節を測定し、写真撮影を行います。4週間後、腫瘍の証拠は認められませんでした。傷口は閉鎖し、治療部位に脱毛を伴う瘢痕が認められた。治療後、犬に疼痛は見られず、治癒期間を通じて眼瞼機能は維持され、治療後の美容的効果は極めて良好であった。電気化学療法は、根治目的または手術の補助治療として、単発または多発性の皮膚または皮下腫瘍結節に適用することが可能である。電気化学療法は、一度の治療でも効果的ですが、治療に失敗した場合や腫瘍の反応が不十分な場合には、数回繰り返すことで効果を高めることが可能です。結論として、電気化学療法の利点は、簡便であること、治療時間が短いこと、化学療法の投与量が少ないこと、そして副作用が軽微であることです。さらに、本療法は外来ベースで実施されます。したがって、患者が入院する必要はありません。

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