Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

Reiko T. Roppongi; Kevin P. Champagne-Jorgensen; Tabrez J. Siddiqui

doi:10.3791/55000

JoVE Journal
Neuroscience
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JoVE Journal Neuroscience

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

低密度初代海馬ニューロンの文化

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17:46 min

April 18, 2017

DOI: 10.3791/55000-v

Reiko T. Roppongi*^1,2, Kevin P. Champagne-Jorgensen*^1,2, Tabrez J. Siddiqui^1,2

¹Department of Physiology and Pathophysiology,University of Manitoba, ²Kleysen Institute for Advanced Medicine,Health Sciences Centre

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

この記事では、グリア単層の上に反転したカバーガラス上で成長する低密度初代海馬神経細胞を培養するためのプロトコルを記述しています。ニューロンとグリアの層は、パラフィンワックスビーズで分離されています。この方法によって成長させた神経細胞は、高分解能光学イメージングおよび機能アッセイに適しています。

このプロトコルは、もともとGary Bunker博士と彼の同僚によって発表され、ニューロンをグリアフィッター層上に懸濁することにより、胚性負荷海馬ニューロンの長い密度と高純度の培養を可能にします。この結果は、他の海馬の重要な結果よりも危険にさらされています。なぜなら、ニューロンを低密度で増殖させ、グリア細胞をほとんど汚染しないからです。したがって、この結果は、ハイリゾリューションイメージングと、培養中のタイポグラフィと成熟ニューロンの機能する資産に理想的です。

このプロトコルの成熟後は、手順中に説明するのが難しいいくつかの重要な状態があるため、新しい生命による適応を促進するはずです。このプロトコルは、高品質の初代ニューロンの培養に必要な3つの独立した集団で構成されています。これらのプロセスには、グリア細胞の培養、カバースリップの作成とコーティング、海馬神経細胞の調製が含まれます。

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