Name: マウス左前方降順（LAD）冠動脈結紮：心筋梗塞のための改善と簡略化されたモデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 39 s
Description: 学ぶマウス左前方降順冠動脈結紮法による心筋梗塞誘導モデル。侵襲性を低減し合併症を最小限に抑えた手法で、心血管研究における遺伝子発現と心臓回復メカニズムの解明に活用できます。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

このモデルは、国立総合医科学研究所(NIGMS)/国立衛生研究所(NIH)の助成金1P20GM103652(プロジェクト#3)(MRAへ)および米国心臓協会(AHA)の助成金14GRNT20460291(MRAへ)、ブラジル政府のCAPES助成金(KRおよびFRへ)、およびブラウン大学LINK賞(IMへ)の支援を受けて開発されました。また、獣医師や動物施設のスタッフからの優れた技術サポートも評価しています。

この動物プロトコルを見直し、ロードアイランド病院の施設内動物管理使用委員会（IACUC）によって承認されています。 1.麻酔および挿管<ol><li>術後の鎮痛薬の投与量を計算するために、マウスを計量。 </li><li>誘導チャンバ内にマウスを置き、9 4％イソフルランを送達 - を通して動物を監視、10分。装置は、約250℃に予熱することができるようにホットビーズ滅菌器の電源をオンにします。 20分 - 予熱が15になります。 </li><li>マウスは麻酔の深い面に達すると、約32呼吸/分の呼吸速度と、発泡スチロール板上にマウス仰向けに配置し、開口を保持するために上部切歯下固定弾性バンドを使用します。つま先のピンチを実行することによって、鎮静を確認します。咽頭を可視化することができるように、マウスの上に高強度の照明を置き。 </li><li>顎別のペアを開くために、湾曲したピンセットを使用し邪魔に舌を持ち上げるために鉗子の。マウスの本体とで、またはわずかアイレベルの下に位置しながら、挿管してください。手術用ルーペの使用が推奨されます。 </li><li>声帯の開閉を可視化します。オープン時、鈍い先端の針の導入と20ゲージ、1で静脈内（IV）カテーテルを挿入します。気管開口部にカテーテルを導くために、針を使用しますが、気管に針を挿入することは避けてください。正しい配置の検証は、プラスチック製のトランスファーピペットを使用して行うことができます。 </li><li>加熱装置を備えた操作面への挿管マウスを転送します。 150μL/ストロークのストローク量および/分130ストロークのストローク速度に設定小さなげっ歯類ベンチレーターにマウスを接続します。 </li><li> 2.5％イソフルランを提供します。二国間の胸の上昇を確認することで挿管を確認してください。つま先のピンチを実行することにより、麻酔を確認してください。完全に麻酔をかけになるために、人工呼吸器に10分 - マウスは、5が必要な場合があります。 </li></ol><ol><li>人工呼吸器およびIVカテーテルとの連結現場で挿管チューブダウンテープ。四肢ダウンテープ。目に無菌潤滑滴を置きます。 </li><li>電気かみそりで胸部の腹左側をトリム。乾いたワイプで坊主毛皮をオフにほこりや滅菌綿棒を使用して脱毛クリームの薄い層を適用します。 45秒 - クリームは、約30のための毛包と接触したままにしてください。 </li><li>クリームプロセスながら、浸漬するベタジンで満たされた3 1.5 mLチューブ三本の滅菌綿棒を配置します。蒸留水で湿らせたワイプを使用して、そっとクリームや毛皮を乾いた布で拭き取ってください。 </li><li>中心部から周辺部に移動する円を描くように洗浄、ベタジンおよび滅菌70％イソプロパノールプレップパッドを交互に、手術野を3回洗浄してください。マウスの手術野の上四分の一サイズの孔を滅菌ドレープを配置します。 </li><li>覚書の周囲を清掃してください70％エタノールでE。つま先のピンチでもう一度麻酔を確認してください。 </li></ol> 3. LADライゲーション<ol><li>約20秒間250℃に予熱したホットビーズ滅菌器でオートクレーブ処理手術器具を置きます。滅菌オートクレーブ滅菌外科用ドレープの滅菌器を置きます。ドン手術用手袋。 </li><li>優しく著名な剣状軟骨の左にある時点で約5mmの皮膚を持ち上げるために先の細いピンセットを使用してください。胸骨柄のレベルまで、上方この点から、皮膚に垂直切開部を作成するために、10番ブレードを用いて外科用メスを使用します。 </li><li>優しく皮膚や筋肉層を分離するために、湾曲鉗子を使用してください。皮膚切開以下、筋層を開きます。 、筋層を介して2本の5-0ポリプロピレン縫合糸を挿入し、切開部の両側に、筋層のオープンを保持するためのクランプで一時的に縫合糸を固定します。 </li><li>以下、第三肋間の切開を特定して作ります胸郭の自然な角度。マウスの左末端からテープを取り外し、テープでその右後足にその左リアの足を確保します。テープの長い部分をカットし、少し高い位置に操作面にその左前足を固定します。 70％エタノールで手袋を清掃してください。 </li><li>穏やかに3 番目と4 番目の肋骨を広げ開創器を使用。約1×½に、滅菌ガーゼの小さな部分を切断し、滅菌0.9％生理食塩水の中に浸し。余分な生理食塩水を絞り出し、ゆっくりと手続きの際に偶発肺の損傷を防ぐために、左肺に対してガーゼを挿入するために鉗子を使用しています。 </li><li>静かにピンセットで薄い心膜を削除します。 </li><li>滅菌綿棒オフ綿の少量を引き裂く、小さなボールにそれをロールバックします。滅菌0.9％生理食塩水の中に、この綿球を浸し、軽く動脈を鑑賞する心臓の表面上の綿棒。そっと上向きに左心耳を押すと下の冠状動脈を見つけますニースの。 </li><li> LADを識別し、LAD下で8-0ナイロン縫合糸を通過させます。 2つの完全なライゲーションを確保するためにスローされます。リガチャー意志湯通しから連結が成功した場合、左心室遠位。 </li><li>鉗子を使用して、以前に挿入されたガーゼを除去し、そして次に穏やか開創器を取り外します。開胸開口を通して胸腔内に25ゲージ針に取り付けられた6で、25ゲージ可撓性チューブを挿入します。左肺の上の空間にチューブの2 - 約1進みます。仰臥位にマウスを戻し、70％エタノールで手袋をきれいに。 </li><li>場所に胸腔チューブを保ち、胸郭を閉じるために、単純な、中断パターンで5-0ポリプロピレン縫合糸を使用してください。オープン筋層を保持している2本の縫合糸を外します。再び場所に胸腔チューブを保ち、筋層を閉じるには、単純な連続パターンに5-0ポリプロピレン縫合糸を使用してください。 </li><li>胸管に25ゲージ針を1 mLシリンジを取り付けます。ゆっくりプランジに上向きに引っ張りますR同時に徐々に鉗子で胸腔から胸管を抽出します。このステップは、そうでない場合は気胸で胸腔と結果の中に閉じ込めなる過剰空気と血液を、削除して、ゆっくりとチューブを抽出します。 </li><li>注射器がいっぱいになると、針から注射器を取り外し、廃棄物のビーカーや流しに廃棄物を処分します。胸の管が完全に抽出されるまで、このプロセスを続行します。胸が密閉されていることを確認してください。 </li><li> 1.5％のイソフルランを減らします。シンプル中断したパターンで4-0ポリプロピレン縫合糸で皮膚を閉じます。オフイソフルラン気化器の電源を入れます。 </li><li>腹腔内（IP）注射により、0.9％生理食塩水に0.1mg / mlのブプレノルフィンを投与します。局所的切開に0.9％生理食塩水中の2mg / mLのブピバカインとの2mg / mLのリドカインを適用します。マウスの体重に生理食塩水の量をスケーリング、皮下注射を介して、0.9％の生理食塩水500μL - 200の間に投与します。 </li><li> admini後5分を待って挿管チューブからマウスを削除するために鎮痛薬をstering。これは、人工呼吸器オフ遷移を助けます。 <ol><li>マウスが人工呼吸器をオフに一度、二国間の胸の上昇を持っていない場合は、針の解凍を行います。それは抵抗の急激な減少によって示される、胸腔に入るまでこれを行うには、3 番目と4 番目のリブの間に25ゲージの滅菌針および1 mLの注射器を導入します。過剰の空気を除去するために、プランジャーをゆっくりと引き上げます。 </li></ol></li><li>マウスは、適切な二国間の呼吸数と深さを実証し、つま先のピンチに応答すると、加熱ランプの下でクリーンな回復ケージにマウスを置きます。 20分 - 15のための層流フード内で監視、湿った食物および水ボトルでマウスを提供します。誇張された呼吸努力、過度の出血、または他の潜在的に生命を脅かす合併症のために監視します。 </li><li>次の3日間でIPを介して、0.1mg / mlのブプレノルフィンの鎮痛薬を投与しますjection一日二回。毎日マウスを監視します。 </li></ol>

<ol><li>Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+directions+for+protecting+the+heart+against+ischaemia-reperfusion+injury%3A+targeting+the+Reperfusion+Injury+Salvage+Kinase+%28RISK%29-pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury: targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase (RISK)-pathway.</a> Cardiovasc Res. 61 (3), 448-460 (2004).</li>
<li>Roffi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2015+ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+coronary+syndromes+in+patients+presenting+without+persistent+ST-segment+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">2015 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation.</a> Eur Heart J. 37 (3), 267-315 (2015).</li>
<li>Kumar, A., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Coronary+Syndromes%3A+Diagnosis+and+Management%2C+Part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Mayo+Clin+Proc%22%5BJournal%5D)">Acute Coronary Syndromes: Diagnosis and Management, Part I.</a> Mayo Clin Proc. 84 (10), 917-938 (2009).</li>
<li>Eitan, A., Nikolsky, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antithrombotic+therapy+in+patients+with+acute+coronary+syndromes%3A+how+to+make+the+right+choice%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Med%22%5BJournal%5D)">Antithrombotic therapy in patients with acute coronary syndromes: how to make the right choice.</a> Minerva Med. 104 (4), 357-381 (2013).</li>
<li>Abbate, A., Bussani, R., Amin, M. S., Vetrovec, G. W., Baldi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+and+heart+failure%3A+role+of+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction and heart failure: role of apoptosis.</a> Int J Biochem Cell Biol. 38 (11), 1834-1840 (2006).</li>
<li>Zheng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nebivolol+protects+against+myocardial+infarction+injury+via+stimulation+of+beta+3-adrenergic+receptors+and+nitric+oxide+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Nebivolol protects against myocardial infarction injury via stimulation of beta 3-adrenergic receptors and nitric oxide signaling.</a> PLOS ONE. 9 (5), 98179(2014).</li>
<li>Tarnavski, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).</li>
<li>Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+Efficacy+of+Various+Combinations+of+Injectable+Anesthetics+in+BALB%2Fc+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Safety and Efficacy of Various Combinations of Injectable Anesthetics in BALB/c Mice.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 47 (1), 11-17 (2008).</li>
<li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LAD-Ligation%3A+A+Murine+Model+of+Myocardial+Infarction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction.</a> J Vis Exp. (32), e1438(2009).</li>
<li>Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. H., McConnell, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction in rats.</a> Journal of visualized experiments : J Vis Exp. (48), (2011).</li>
<li>Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One+hour+reperfusion+is+enough+to+assess+function+and+infarct+size+with+TTC+staining+in+Langendorff+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Drugs+Ther%22%5BJournal%5D)">One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in Langendorff rat model.</a> Cardiovasc Drugs Ther. 23 (4), 327-331 (2009).</li>
<li>Zeng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+5-ethynyl-2%27-deoxyuridine+staining+as+a+sensitive+and+reliable+method+for+studying+cell+proliferation+in+the+adult+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine staining as a sensitive and reliable method for studying cell proliferation in the adult nervous system.</a> Brain Res. 1319, 21-32 (2010).</li>
</ol>

著者らは、競合する金銭的利益はないと宣言している。

実験室におけるMIモデルの使用が増加して、記載された手順は、その手術後の痛みや不快感を最小限に抑えながらマウスの効率および生存率を高めることを目的とします。このプロトコルは、LAD結紮法のさまざまな側面に多くの改良を行うことで、死亡率を最小限にするよう努めています。いくつかの区別があります。麻酔の彼らの長い期間の利益のために、誘導のためのイソフルランと一緒にケタミンとキシラジンを利用いくつかのマウス挿管研究では、死亡率の増加8を示しています。私たちの方法は大幅に薬物関連の合併症の可能性を低減、誘導のためだけイソフルランを使用しています。他の同様のLAD結紮プロトコルは、長期の回復時間と正確なトレーニング9のための増加の必要性を生産、気管切開を含んでいます。私たちはここで説明する手順は、LOで、その結果、気管内挿管の非侵襲的な方法を利用して死亡率と結果の高い再現性をWER。また、むしろのみ電気かみそりを使用するよりも、私たちの手順は、1分未満で滅菌野の完全明確な可視化を提供し、毛皮の除去のための脱毛クリームを使...

冠動脈疾患、またはACSは、最も一般的な心血管イベントであり、2020年1で、世界中の罹患率と死亡率の主要な原因とみなされます。 ACSの原因は、心臓組織2への血流を減少させ、ブロックまたは冠動脈アテローム性動脈硬化性プラークの破裂による心筋の血栓症の存在です。したがって、例えば心筋梗塞（MI）3、4のような急性心筋虚血の存在と一致する臨床徴候があります。 MIは、心筋細胞の質量の損失および心室機能不全と心不全5、6につながる可能病的な心室リモデリング、への進行につながります。 IHDを研究するための最も効果的な方法の1つは、動物モデルにおいて、ヒト心筋梗塞を模倣することでした。これは、LAD内を閉塞することによって達成されますマウス。このモデルを使用して、我々は、心臓がIHDに起因する損傷から保護することができる方法を研究しています。 過去10年間、研究者はマウスにラットからのシフトを含め、より小さな動物に大きな動物モデルを使用してからシフトしています。小さなマウスモデルは、その小さなサイズ、大きなリターサイズ、維持するために、低コスト、及び短い妊娠期間、ならびにトランスジェニックマウスおよび遺伝子ノックアウトモデル7の拡張可用性を含む多くの理由で好ましいことが開始されます。マウスのサイズが小さいですが、特に彼らのために設計された新しい手術器具は、この開発に支援しています。私たちの方法は、これらの新しい手術器具を利用しています。 いくつかの方法は侵襲的気管切開を実施している間、私たちは、気管内挿管の侵襲性の低い方法を使用します。中咽頭のオーバーヘッド照明を使用して、我々はトンのためのより安全でより少ない外傷体験を提供する、任意の切開を作成せずに挿管彼は動物。マウスは、その後、人工呼吸器の上に置き、全体の手順の間、イソフルランで維持されます。それが廃止されると、動物は麻酔から回復するために起因する薬剤によって生成麻酔の短い期間に、それはほんの数分かかります。私たちの外科的モデルは、最小侵襲的胸腔穿刺を含んでいます。緊張性気胸：元の開胸切開を通して胸腔穿刺を用いて胸腔から血液及び過剰空気を注意深く除去は、LAD結紮の一般的な術後合併症に対処しています。他の方法ワン胸腔穿刺-た得少ない術後合併症の気管切開のために、別で使用される2つの追加の切開が不要になり、大幅に死亡率が減少しているこの方法。

<table><tbody><tr><td>高輝度光源</td><td>ハーバード製装置</td><td>72-0215</td><td></td></tr><tr><td>SurgiSuite 操作プラットフォーム</td><td>ケント・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td>SurgiSuite</td><td>充電式の電池式遠赤外線加温パッドを使用しています。手術前に一晩充電してください。&nbsp;</td></tr><tr><td>SurgiSuite LED照明キット</td><td>ケントサイエンティフィックコーポレーション</td><td>SURGI-5003</td><td></td></tr><tr><td>ホットビーズ滅菌器</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>18000-45</td><td>予熱には15〜20分かかります。</td></tr><tr><td>小型げっ歯類麻酔システム</td><td>VetEquip Inc.</td><td>901810</td><td></td></tr><tr><td>Isofluorane</td><td>Piramal Enterprises</td><td>66794-017-10</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>ロードアイランド病院薬局</td><td>NDC 12496-0757-1、12496-0757-5</td><td></td></tr><tr><td>外科用ルーペ</td><td>Roboz</td><td>RS-6687</td><td></td></tr><tr><td>小型げっ歯類人工呼吸器</td><td>ハーバード装置</td><td>73-0043</td><td></td></tr><tr><td>潤滑液滴</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>19-898-350</td><td></td></tr><tr><td>電気かみそ</td>り <td>ケント・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td>CL 9990-1201</td><td></td></tr><tr><td>脱毛クリーム</td><td>ナイア</td><td></td><td></td></tr><tr><td>・メディカル・テープ</td><td>サーモ・フィッシャー・サイエンティフィ</td>ック <td>18-999-380</td><td></td></tr><tr><td>ベタジン</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>19-027136</td><td></td></tr><tr><td>70% イソプロパノール・ワイプ</td><td>サーモ・フィッシャー・サイエンティフィ</td>ック <td>22-363-750</td><td></td></tr><tr><td>外科用ドレープ</td><td>Braintree</td><td>SP-TS</td><td></td></tr><tr><td>手術用手袋</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>18999102D</td><td></td></tr><tr><td>5-0 ポリプロピレン縫合糸&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>8630G</td><td></td></tr><tr><td>8-0 ナイロン縫合糸</td><td>ファイン サイエンス ツール</td><td>12051-08</td><td></td></tr><tr><td>プラチナ硬化チューブ</td><td>ハーバード デバイス</td><td>72-1042&nbsp;</td><td>内径0.3mm×外径0.6mm</td></tr><tr><td>0.9% 生理食塩水</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>19-310-207</td><td></td></tr><tr><td>4-0 ポリプロピレン縫合糸</td><td>Ethicon</td><td>8631G</td><td></td></tr><tr><td>1 CC シリンジ 25 ゲージ針付き&nbsp;</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>14-826-100</td><td></td></tr><tr><td>はさみケン</td><td>トサイエンティフィックコーポレーション</td><td>INSS600225</td><td></td></tr><tr><td>鉗子ケン</td><td>トサイエンティフィックコーポレーション</td><td>INS700100</td><td></td></tr><tr><td>綿棒</td>サー<td>モフィッシャーサイエンティフィック</td><td>23-400-118IV</td><td></td></tr><tr><td>カテーテル、20ゲージ</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>&nbsp;</td><td></td>NC9892181</tr><tr><td>Retractor</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 750369</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>解剖鉗子, Straight</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 700101</td><td></td></tr><tr><td>解剖鉗子, Curved</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 700103</td><td></td></tr><tr><td>止血鉗子, Straight</td><td>Kentサイエンティフィック・コーポレーション</td><td>INS 750451</td><td></td></tr><tr><td>止血鉗子、湾曲</td><td>ケント・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td>INS 750452</td><td></td></tr><tr><td>組織鉗子</td><td>ケント・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td>INS 700131</td><td></td></tr><tr><td>ニードルホルダー</td><td>ケント・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td>INS 600109</td><td></td></tr><tr><td>ハサミ&nbsp;</td><td>ケント・サイエンティフィック・コーポレーション</td><td>INS 600225</td><td></td></tr></tbody></table>

マウス左前方降順（lad）冠動脈結紮：心筋梗塞のための改善と簡略化されたモデル

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

虚血性心疾患（IHD）、または急性冠症候群（ACS）は、米国における主要な死亡原因の一つです。 IHDは、酸素の損失および心筋のその後の壊死をもたらす、心臓への血液供給の減少によって特徴付けられます。 MIモデルは、短期虚血再灌流モデルと長期永久結紮モデルとしての使用のために人気を博しています。以下では、LADの永久的な連結のために信頼性の高い方法を説明します。マウス遺伝子工学技術により、より高度になってきて、そして品質ネズミ手術器具の増加可用性と、マウスがMIの手術のための人気モデルとなっています。私たちの外科的モデルは、マウスの急速な回復のために容易に可逆麻酔薬の使用を組み込みました。気管切開を伴うことなく、低侵襲性の気管内挿管。胸部内の追加の切開を作成せずに、元の開胸サイトから胸腔穿刺は、そのまま効果的に胸腔から過剰な血液および空気を除去するために、いくつかの他の方法で行います。この方法は、比較的劇的に外科的および術後合併症及び死亡率を低減し、再現性を向上させる他の方法、より低侵襲性です。

マウスは28日、手術後安楽死させ、心臓を回収し、検討されています。 75ミリグラム/ kgのケタミン及び5 - - 10mg / kgのキシラジンマウスを50で麻酔します。動物が適切麻酔下にある場合、胸腔を開き、23ゲージ針を使用して、コールド塩化カリウム（KCL、30mMの）は、心臓の後方基底領域に注入されます。心臓は拡張期で逮捕されました。ライゲーションのさらなる検証のために、心臓を動物から除去され、4％パラホルムアルデヒド及び1％エバンスブルー色素を注射します。 図1は、虚血性左心室におけるエバンスブルーの欠如を示しています。 図2は、適切な気管内挿管のセットアップを示しています。縫合筋層Cからの空気抽出前に管の周囲に閉じた状態で、図3は 、初期切開部位に胸腔穿刺のための胸腔チューブの配置を表示しますHEST空洞。トリクローム染色は、梗塞領域におけるコラーゲンの増加（ 図4）を示します。 <p class="jove...

マウスモデルにおける左前下行動脈(LAD)結紮のための信頼性の高い方法を提供します。この方法は、気管内挿管、左側開胸術、胸腔穿刺術など、他の方法に比べて侵襲性が低いです。この方法は、急性心筋梗塞と慢性心筋梗塞(MI)の両方のモデルとして使用できます。

マウス左前方降順（LAD）冠動脈結紮：心筋梗塞のための改善と簡略化されたモデル

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

本手順の全体的な目的は、左前下行冠動脈を結紮することにより、マウスに心筋梗塞を誘発することです。この手法は、特定の遺伝子の過剰発現またはノックアウトが心筋梗塞後の心機能回復に影響を与えるかなど、心血管領域における重要な課題を解明するのに役立ちます。この技術の主な利点は、他のさまざまな心筋梗塞模倣モデルよりも低侵襲であり、合併症が少なく、回復時間が短縮されることです。一般的に、この手法に不慣れな方は、気管内挿管および左前下降枝（LAD）の特定に熟練した指導員による練習が必要となるため、困難に直面します。この手法を視覚的に実演することは、LADを特定し評価する上で極めて重要であり、経験やトレーニングなしに習得することは困難です。動物を鎮静させる前に、ビーズステリライザーの加熱を開始し、250 °Cまで上げてください。これには最大20分かかります。マウスが十分に鎮静されているか確認します。呼吸数は1分間に約32回になります。その後、鎮静させたマウスを styrofoam ボード上に仰向けに置きます。中咽頭を視覚的に確認しやすくするため、マウスを目の高さに配置します。処置に進む前に、足指へのピンチ刺激で鎮静状態を確認してください。その後、弾性バンドを用いて、上の切歯を固定して口を開いたまま保持します。次に、マウスの口咽頭が透照されるように、高輝度照明をマウスの上に配置します。口咽頭の微細構造を観察するため、手術用ルーペを装着します。ここで、曲鉗子を用いて顎を開きます。別のピンセットで舌を避けて移動させ、声帯の開閉を観察します。開いたタイミングで、鈍針導入器付きの20ゲージ・1インチ静脈留置カテーテルを挿入します。針を使用してカテーテルを気管開口部まで誘導しますが、針を気管壁に刺さないように注意してください。次に、挿管したマウスを加熱装置を備えた手術台に移し、そこで小型げっ歯類用人工呼吸器に接続します。操作を進める前に、足趾を挟んでマウスの麻酔深度を確認してください。その後、人工呼吸器とIVカテーテルの接続部位で挿管チューブをテープで固定します。続いて、すべての四肢をテープで固定し、眼球に潤滑剤を塗布します。次に、胸部の腹側左側の被毛を刈り取ります。その後、露出した皮膚に除毛クリームを薄く塗り、30〜45秒間浸透させます。その間に、ベタジンを満たした3本の1.5 mLチューブに滅菌綿棒を浸しておきます。次に、蒸留水を用いてクリームと被毛を優しく拭き取ります。続いて、ベタジンと70%イソプロパノールを用いて、手術部位を3回洗浄します。次に、手術部位にクォーターコインほどの穴を開けたドレープでマウスを覆います。最初の切開を行う前に、オートクレーブ滅菌済みの手術器具を、250 °Cに予熱したホットビーズ滅菌器に約20秒間入れます。次に、先端の細いピンセットを使用して、顕著な

murine-left-anterior-descending-lad-coronary-artery-ligation-an

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

このビデオでは、心筋虚血のpathobiologicalと病態生理学的プロセスを研究するために高速で信頼性の高いモデルを使用する方法を示します。...

LAD -ライゲーション：心筋梗塞のマウスモデル

急性心筋梗塞（AMI）のラットモデルでは、心臓の病態生理学的および生理学的機能に関するMIの結果を研究するのに便利です。...

ラットにおける急性心筋梗塞

マウスにおける実験的心筋梗塞を誘発するために用いる外科手術は、心臓や肺の左前方の表面を可視化するために、3番目と4番目のリブの間に左開胸で始まります。左冠動脈を結紮され、胸が閉じているとマウスが自発的に回復させる。...

マウスにおける冠動脈結紮のために修飾されたテクニック

我々は、再現性を高めるために左前下行枝（LAD）に結紮の位置決めにおいてより明確にするために可能にするマウスモデルにおける心筋梗塞（MI）をシミュレートするための実験的虚血/再灌流（I / R）傷害を誘導するための外科的方法を紹介マウスでのMIの実験の。...

左前下の動脈の結紮を通して心筋虚血再灌流傷害のマウスモデル

心不全は入院の主な原因であり、主要な死亡原因です。マウスにおける左前下行冠動脈の永久結紮のモデルを適用して、心室リモデリングと心筋梗塞後の心機能障害を調査します。マウスにおける侵襲的血行動態測定の技術が提示されます。...

マウスの左前下冠動脈の動脈の常設ライゲーション：心筋梗塞後のリモデリングおよび心不全のモデル

本明細書では、マウスにおける左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを達成する方法を示す外科的処置について説明する。このモデルは、心筋梗塞の病態生理学とそれに付着した生物学的プロセスを調べるために高い関連性がある。...

左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを用いたマウス心筋梗塞モデル

ここでは、マイクロマニピュレーションによる左前下行冠動脈の精密結紮により、マウスの心筋梗塞または心筋虚血再灌流障害を誘発できる簡便で再現性のある方法について述べる。...

マウスにおける心筋梗塞および心筋虚血再灌流障害の誘発

本研究では、急性心筋虚血再灌流研究のためのラットにおける従来の手順を技術的に改変することにより、左前下行冠動脈結紮術の品質管理に焦点を当てたプロトコルを提示する。...

虚血再灌流研究のための左前下行冠動脈結紮術:技術改変と品質管理によるモデル改良

ここに提示されるのは、マウスの左冠状動脈の永久結紮のための外科的処置である。このモデルは、心筋梗塞後の病態生理学および関連する炎症反応を調査するために使用できます。...

左冠動脈結紮術:心筋梗塞の外科用マウスモデル

多数の遺伝子操作及び/または遺伝子、タンパク質、細胞、および/または生体物質の心筋内注射は、急性虚血/再灌流傷害およびマウスにおける慢性的リモデリングの研究に時間の次元に重ね合わされている。このビデオでは、虚血/再灌流、恒久的な冠動脈結紮、および心筋内注入の研究のための顕微手順を示しています。...

心筋梗塞のマウスモデルにおける冠動脈結紮および心筋内注入

学ぶマウス左前方降順冠動脈結紮法による心筋梗塞誘導モデル。侵襲性を低減し合併症を最小限に抑えた手法で、心血管研究における遺伝子発現と心臓回復メカニズムの解明に活用できます。

マウス左前方降順（LAD）冠動脈結紮：心筋梗塞のための改善と簡略化されたモデル

さらに動画を探す