沈殿物によって混合物の分離

1. CaCO₃の沈殿物

1. 1 M CaCl₂の 5 mL を準備します。
2. 5 mL 1 M Na₂CO₃を準備します。
3. 小型遠心分離機管 (1.5 mL)、CaCl₂の 750 μ L と Na₂CO₃750 μ L を追加します。
4. 2 分が発生する反応を待ちます。ソリューションは、曇りにする必要があります。
5. 5 分 10,000 × g で混合物を遠心分離機します。
6. 上清をデカントします。
7. ペレットに冷たい水の 1 mL を追加します。
8. 10 の渦のミキサーで混合することによって、ペレットを再懸濁します s。
9. 5 分 10,000 × g で混合物を遠心分離機します。
10. 上清をデカントします。

2. ミルク蛋白質の沈殿物

1. ビーカーにミルクを注ぐと攪拌棒します。
2. 攪拌ホット プレートで 40 ° C まで軽く温めた牛乳。40 ° C 以上に加熱しないでください。
3. 7.5 mL の酢酸を混合し、50 mL に達するに十分な水で希釈することによって酢酸の 15% (v/v) を準備します。
4. 温めた牛乳に pH メーターの電極を浸し、pH を監視します。
5. 酢酸はミルクに 4.6 の pH に達するまで drop-wise 追加します。
6. ミルクのろ過
   1. フィルターの紙の部分をフルートし、目標到達プロセスにそれを置きます。
   2. フラスコ、漏斗を置き、漏斗に酸性化したミルクの溶液を注ぐ。
   3. ソリューションが注がれている、フィルター紙が詰まる可能性があります。攪拌棒を使用すると、ソリューションとフィルターの詰まりを取るために時々 紙を揺り動かしなさい。ソリューションの通路を改善しない場合は、ろ紙を変更します。
   4. 新しいフィルター ペーパーを固体ベンチ上部とウェットの転送の新しいフィルター ペーパーを配置します。これは固体からより多くの水を吸収する必要があります。
   5. 新しいフィルター ペーパーを濡らしても場合、は、フィルター紙の湿りの最小限の量になるまでそれを変更していきます。多くの水を吸収するために必要な場合に軽く押し込みます。
   6. 乾燥した固体を取り、約 70% で再停止エタノール。もう一度手順 2.6.1 に 2.6.5 固体をフィルター処理します。
7. (ろ過に代わる) としてミルクの遠心分離
   1. 50 mL 遠沈管に混合物の 50 mL の部分を転送します。
   2. 4,500 × g 10 分間遠心し、上清をデカントします。
   3. 50 mL 70% エタノールをペレットに追加します。
   4. 攪拌棒を使用して、エタノールでペレットを再懸濁します。
   5. 次のステップ 2.7.2 この懸濁液を遠心します。
8. そうでなければ 4 ° C で保存しておき、SDS-PAGE などさらなる分析用のバッファーでペレットを再懸濁します

3. KCl の再結晶

1. エルレンマイヤー フラスコ、KCl の 50 g の重量を量るし、100 mL の水を追加
2. 水が沸騰するまで混合物を加熱します。すべての KCl の粉が溶けていることを確認します。いくつかの不純物が水には溶けません。
3. 熱混合物と一緒に別の (空の) 三角フラスコと非常に暖かい保つこと。
4. 暖かく、空のフラスコに濾紙と漏斗を配置します。
5. 不溶の不純物を取り除くフィルター ペーパーを通して溶液を注ぐ。受信側のフラスコは原油の沈殿物を形成するが、それ以外の場合濾過中に温度変化が発生しないように暖かくしておいた。その場合、すべての沈殿物が溶けるまで再加熱混合物。
6. ソリューションとフラスコを暑さから削除します。
7. 部屋の涼しい場所に保管して、それはまたはそれはもはや触ると暖かくなるまで、約 30 分間ゆっくりとクールダウンできます。
8. 部屋の温度に冷却、一度温度を下げるを氷浴にフラスコを配置します。また、1 つは冷蔵庫または 4 ° C で温度管理された部屋の中のフラスコを残すことができます。
9. 手順 3.4-3.5 のようにフィルタ リングが結晶を収穫 (フラスコを使用し、室温で漏斗)。