Name: 非ジアテルミー法による腹部皮下脂肪の生検のためのテクニック (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: 学ぶ非ジアテルミー法による腹部皮下脂肪生検の標準化手法。局所麻酔下で安全に実施でき、術後合併症の発生率は2.61%と低く、組織学的分析に適した信頼性の高いサンプル採取が可能です。

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この作品は、欧州連合のホライゾン 2020 (グラント契約号 645710) と第 7 フレームワークから (グラント契約番号 612547 と 319010) のプログラムの資金を受信しました。著者生検の手順と支援の博士フォティーニ Sourli Chasioti を感謝したいです。著者らはまた、ビデオの準備で彼の貴重な助け氏 Yiorgos Paterakis を感謝します。

研究ヘルシンキ宣言によって設定された基準に適合し、運動科学部テッサリア大学 Βiοethics 委員会によって承認されました。
 1 です手術機器や消耗品の準備 <ol><li>4輪手術メイヨーのスタンドに消毒手術フィールドの位置。</li>。
	<li>4輪手術メイヨーのスタンドに以下の消耗品・手術用機器の位置: 
	ストレート営業はさみ (15 cm) の 1 つのペア 1 メス (11 号) 1 メス ハンドル 曲線はさみ (14 cm) の 1 つのペア 1 つモスキート鉗子 コッヘル ピンセット 1 組 1 つの外科ピンセット ポビドン ヨード (の生殖ガーゼ) One 縫合 (4.0) ストレートはさみ (11 cm) の 1 つのペア 1 つ針ホルダー (15 cm) 5 滅菌ガーゼ 1 つの接着剤滅菌ガーゼ 消毒された針を用いて 1 つの 10 mL シリンジ 2% キシロカイン (ないアドレナリン) 10 mL 1 つ消毒手術用手袋のペア</li> <li>別のベンチに以下の材料を位置: 2 つのマイクロ遠心チューブ用 10% ホルマリン 5 mL を含む 1 つの管 50-100 mL の-190 ° C で液体窒素を含んでいる 1 つの小さい容器</li></ol> 2。参加者の準備 <ol><li>参加者 15 生検の手順の前に 8 時間高速に従います</li>。
	<li>参加者を控える運動、過度のストレス、アルコール、およびアクティブおよび受動喫煙 72 h 前生検 16 , 17 を持っている</li>。
</ol> 3。皮下脂肪組織の生検を行う <ol><li>仰臥位で手術のベッドの上、参加者を配置します</li>。
	<li>ポビドン ヨードを使用して切開部を消毒します</li>。
	<li>ゆっくりと着実に 2% キシロカイン (ないアドレナリン) 10 mL を注入局所麻酔として使用する選択した領域に 18.</li>
	<li>切開部を除く参加者の体をカバーする領域上で滅菌手術フィールドを配置します</li>。
	<li>少なくとも 3-5 分は、その後、ピンセットのペアを持つ局所麻酔の領域に圧力を適用、彼の感じているその局所麻酔が達成されていることを確認する任意の痛み 19 参加者を求める</li>。
	<li>号 11 メスとメス ハンドルを付ける</li>。
	<li>へその右または長さ 2 〜 2.5 cm、左に 3-5 cm の切開を作成します</li>。
	<li>営業はさみストレート 15 cm のペアで皮下組織を削除します</li>。
	<li>脂肪組織を明らかにすると、一度はピンセットのペアと湾曲した 14 cm はさみのペアでそれをキャプチャします</li>。
	<li>カット約 1 g の脂肪組織を削除します</li>。
	<li>次の組織の除去、止血して切開に滅菌ガーゼを置きます</li>。
	<li>止血を確認すると、キャプチャ 14 cm 針で 4.0 の縫合と皮膚外科ピンセットのペアと皮下組織が表示されるまでします</li>。
	<li>皮膚や皮下に密接に並べながら皮下組織へ移動する、皮膚に縫合針を挿入します</li>。
	<li>縫合針、皮下組織、皮膚を外部から駆動するまでに連続ジグザグ法に従います。皮膚切開が閉じられるまで継続します</li>。
	<li>外部から縫合糸を結ぶ</li>。
	<li>生理食塩水で切開部をきれいにし、接着剤の滅菌ガーゼでカバーします</li>。
</ol> 4。組織の沈着 <ol><li>3枚に収集した脂肪組織を分ける: 150、350 ω、500 mg</li>。
	<li>マイクロ遠心チューブ用のサンプル組織の 150 および 350 mg の作品を配置します</li>。
	<li>-80 で冷凍庫の最終的な沈着まで-190 ° C で液体窒素で小型の容器にマイクロ遠心チューブを用ひたる 2 ° C 
	注: 事前に-190 で液体窒素中でマイクロ遠心チューブ用の浸漬中カップでの失敗を避けるためにマイクロ遠心チューブ用の小さな穴をパンクに滅菌針を使用 ° C</li>
	<li>500 mg のサンプル組織片を浸し-組織学的解析に使用する-10% ホルマリン 5 mL を含む管内 。
	注: は、手術中に出血した場合にのみモスキート鉗子を使用します。この場合において、結紮して止血が達成されるまでを閉じるモスキート鉗子で船をキャプチャします</li>。
</ol>

<ol><li>Bruening, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+review%3A+comparative+effectiveness+of+core-needle+and+open+surgical+biopsy+to+diagnose+breast+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Systematic review: comparative effectiveness of core-needle and open surgical biopsy to diagnose breast lesions.</a> Ann Intern Med. 152, 238-246 (2010).</li>
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<li>Attner, P., Hemlin, C., Soderman, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligasure+versus+diathermy+scissors+tonsillectomy%3A+A+controlled+randomized+study%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Ligasure versus diathermy scissors tonsillectomy: A controlled randomized study.</a> Acta Otolaryngol. 130, 1180-1184 (2010).</li>
<li>Ecker, T., Carvalho, A. L., Choe, J. H., Walosek, G., Preuss, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemostasis+in+thyroid+surgery%3A+harmonic+scalpel+versus+other+techniques--a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Hemostasis in thyroid surgery: harmonic scalpel versus other techniques--a meta-analysis.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 143, 17-25 (2010).</li>
<li>Campbell, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pilot+study+of+sampling+subcutaneous+adipose+tissue+to+examine+biomarkers+of+cancer+risk%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Prev+Res%22%5BJournal%5D)">A pilot study of sampling subcutaneous adipose tissue to examine biomarkers of cancer risk.</a> Cancer Prev Res. 2, 37-42 (2009).</li>
<li>Jamurtas, A. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+a+single+bout+of+exercise+on+resting+energy+expenditure+and+respiratory+exchange+ratio%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">The effects of a single bout of exercise on resting energy expenditure and respiratory exchange ratio.</a> Eur J Appl Physiol. 92, 393-398 (2004).</li>
<li>Adriaens, P. E. M., Schoffelen, F. M. P., Westerterp, K. R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12908903">Intra-individual variation of basal metabolic rate and the inﬂuence of daily habitual physical activity before testing.</a> Brit J Nutri. 90, 419-423 (2003).</li>
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<li>Jurevic, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+levels+of+2%25+lidocaine+with+1%3A100%2C000+epinephrine+with+young+children+undergoing+dental+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Prog%22%5BJournal%5D)">Plasma levels of 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine with young children undergoing dental procedures.</a> Anesth Prog. 45, 87-90 (1998).</li>
<li>Kale, S. S., Yende, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Aging+on+Inflammation+and+Hemostasis+through+the+Continuum+of+Critical+Illness%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Dis%22%5BJournal%5D)">Effects of Aging on Inflammation and Hemostasis through the Continuum of Critical Illness.</a> Aging Dis. 2, 501-511 (2011).</li>
</ol>

著者は、彼らは競合する金銭的な利益があることを宣言します。

本研究の目的は、健康な男性の非ジアテルミー法を用いた局所麻酔下で実行、腹部皮下脂肪の生検のための手術手技の標準化をだった。ジアテルミー、オペレーティング ルームで使用されます。ただし、可能性のある副作用 (すなわち、フラッシュ火災と環境毒性)9と10の治癒の遅れが発生します。ジアテルミーのこれらの不必要な効果は、営業職員と患者/参加者の健康上のリスクを生成できます。そのため、皮下脂肪組織生検手術非ジアテルミー法が保証されます。
過度の出血の参加者の 3 人に、手術後 2 日間を見ました。この 3 人は、切開部の痛みを報告しました。これらの症例を治療するために皮膚切開部は再開された、任意の余分な血が削除された、生理食塩水と上記で説明した同じ技術を使用して閉じた領域にむかいます。その後、合併症は報告されなかったし、それに続く日に認められた通常の治癒します。我々 の結果は、非ジアテルミー法後最小限の副作用を示されている: 115 事業 (2.61%) から出血過剰なポスト処理...

脂肪組織生検は、代謝と疾患に関するメカニズムの洞察力に富んだ概要を提供可能性があります分析、組織サンプルを提供しています。例えば、乳房癌腫瘍同定1、脂肪酸組成試験2、重要な代謝とホルモンの病気経路3の研究に使用されます。腹部の皮下脂肪組織生検を得るためには、研究者や医師は、手術または針ベースの手法を使用します。しかし、手術皮下脂肪の生検は、複雑な生物学的メカニズム[メッセンジャーのリボ核酸 (mRNA) 式など、組織学的解析等]のより包括的な概要を提供することが組織サンプルを提供できます4.彼らは健康な成人4で使用されている以前とベッドサイド5で安全に実行できます。
針による生検法は組織の整合性を破壊する強烈な脂肪吸引を必要とし、それは通常組織 (100-500 mg)6の少量を取得します。これら組織サンプルは、複雑な研究のために適切かもしれない。さらに、針ベースの手法と比較して、手術皮下脂肪の生検を提供できる (例えば、 B および T 細胞シグナリング); いくつかの炎症性指標のより完全な絵を描くことがあります組織サンプル細胞骨格の調節;携帯電話経路;脂質、炭水化物およびアミノ酸の代謝経路酸化的リン酸化経路4。また、針によるには組織4,報7,8 の線維化領域について少し情報を提供しながらの手術 1 つ4より血液細胞汚染のリスクが高いが含まれて.
通常、手術の脂肪組織生検には9過剰な出血を防ぐために血管を焼灼のジアテルミー治療が含まれます。ジアテルミーは、燃やすし、腫瘍や疣贅病9で感染している組織によって影響を受ける組織の破壊にも使用されます。この手法は、特に脳神経や目の手術9に該当します。
ジアテルミーの過度の使用は、壊死組織、感染の原因と治癒過程10を遅らせることの形成につながる可能性があります。確かに、次のジアテルミー9フラッシュ火災など皮膚病変組織の副作用を報告されています。さらに、参加者/患者と営業スタッフ9によって吸入されることがあります手術の環境放出のジアテルミー手術煙の毒性について懸念を提起されています。確かに、ジアテルミーの使用、喫煙 6 タバコ11によって生成された同じ手術室空気毒性を引き起こす可能性があり、少なくとも 20 分12 汚染することができます最新の手術室は通常、十分な換気システムを持っていますが、.しかし、扁桃手術患者、ジアテルミー法少ないが、有意ではない、術後の痛み13と古典的な結紮止血法より出血14は示します。全体的にみて、手術後の痛みの違い、かろうじて健常者に脂肪組織生検後の率の出血の証拠が存在します。証拠の欠如とジアテルミーの副作用を考えると、脂肪組織の生検のため非ジアテルミー法の標準化が必要です。したがって、本研究の目的は健康な男性で非ジアテルミー法を用いた局所麻酔下で腹部の皮下の脂肪組織生検のための手術手技の標準化をだった。さらに、我々 は組織コレクション mRNA の発現および蛋白質の集中を決定し、組織学的解析を実行するための手順を概説します。

<table><tbody><tr><td>&nbsp;消毒された手術野&nbsp;</td><td>Hartmann</td><td>23516-00</td><td></td></tr><tr><td>ステンレス製インスツルメントスタンド(外科用メイヨー)</td><td>Medical Device Depot Inc.</td><td>32000</td><td></td></tr><tr><td>操作はさみストレート15cm</td><td>カールストルツ</td><td>791903</td><td></td></tr><tr><td>メスNo11&nbsp;</td><td>スワン・モートン</td><td>203</td><td>バイポーラ、カタログ番号 429011</td></tr><tr><td>スカーペル ハンドル No 3</td><td>カール ストルツ</td><td>488090</td><td></td></tr><tr><td>はさみ 湾曲 14 cm</td><td>カール ストルツ</td><td>511514、752918</td><td></td></tr><tr><td>蚊の鉗子</td><td>カール ストルツ</td><td>535012</td><td></td></tr><tr><td>ピンセット コッヘル&nbsp;</td><td>カールストルツ</td><td>530416</td><td>バイポーラ、カタログ番号830316</td></tr><tr><td>外科用ピンセット</td>カール<td>ストルツ</td><td>793216</td><td>バイポーラ、カタログ番号831016</td></tr><tr><td>ポビドンヨード&nbsp;</td><td>さまざまな</td><td>適用されない</td><td></td></tr><tr><td>縫合糸4.0 Vicryl</td><td>Johnsons</td><td>V4970H&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>はさみストレート 11 cm</td><td>カールストルツ</td><td>512511 DS</td><td></td></tr><tr><td>ニードルホルダー 15 cm</td><td>カールストルツ</td><td>515515</td><td>バイポーラ、カタログ番号 213015</td></tr><tr><td>&nbsp;滅菌ガーゼ</td><td>Hartmann</td><td>3021</td><td></td></tr><tr><td>&Alpha;粘着性滅菌ガーゼ&nbsp;</td><td>Digas医療機器</td><td>2889</td><td></td></tr><tr><td>10 mLシリンジ消毒針付き</td>アルファ<td>医療溶液</td><td>10310-55-0010</td><td></td></tr><tr><td>2%-キシロカイン(アドレナリンなし)</td><td>さまざまな</td><td>適用</td><td></td>されない</tr><tr><td>滅菌手術用手袋&nbsp;</td><td>Sempermed</td><td>10001</td><td></td></tr>エ<tr><td>ッペンドルフチューブKartell</td><td></td><td>16283</td><td></td></tr><tr><td>10%ホルマリン&nbsp;</td><td>アルファ医療ソリューション</td><td>11016-30-2909</td><td></td></tr><tr><td>チューブ 120 mL</td><td>ジガス医療機器</td><td>9025</td><td></td></tr><tr><td>-190&deg;C</td><td>リバイバル</td><td>該当なし</td><td></td></tr></tbody></table>

非ジアテルミー法による腹部皮下脂肪の生検のためのテクニック

A Technique for Subcutaneous Abdominal Adipose Tissue Biopsy via a Non-diathermy Method

脂肪組織生検は、代謝と疾患に関するメカニズムの洞察力の概要を提供することが分析、組織サンプルを提供しています。腹部の皮下脂肪組織生検を得るためには、研究者や医師は、手術または針ベースの手法を使用します。しかし、手術皮下脂肪の生検は白色脂肪組織の生物学的指標の複雑さのより包括的な概観を提供することが組織サンプルを提供できます。通常、手術の脂肪組織生検には、過度の出血を防ぐために血管を焼灼ジアテルミー治療が含まれています。それにもかかわらず、ジアテルミー後フラッシュ火災、体内、皮膚病変などの副作用が報告されています。したがって、非ジアテルミー法を用いた局所麻酔下で腹部の脂肪組織を外科的生検の標準化を目的とします。非ジアテルミー腹部外科的生検法による健康な男性で 115 の皮下脂肪の生検を行った.我々 の結果は、115 事業 (2.61%) から出血過剰なポスト処理の 3 つのケースを示した。結論としては、最小限の副作用で、ベッドサイドでの健康的な男性に非ジアテルミー メソッドを使用して、標準化された腹部皮下脂肪外科的生検を安全に適用できます。

参加者の特性は、表 1に提供されます。切開部の縫合は、8-12 日以内から落ちた。我々 は健常成人男性で非ジアテルミー腹部外科的生検法 115 の皮下脂肪組織生検の合計を完了した (年齢: 35.2 ± 6.9 年; ボディマス指数: 27.3 ± 4.4; および体脂肪率: 27.0 ± 9.0%)。3 つのケースで観察された後生検出血 (有病率: 2.61%)、手術後 2 日間。過度の出血を経験した 3 人は副作用を経験してない人より古かった [t(113)=-2.115, p = 0.037]、(すなわち、身体質量指数と体脂肪率) の他の違いは認められなかった (p と&#62; 0.05) 2 つのグループの間。最後に、各操作の後の 3 か月の参加者のいずれもは (皮の傷を含む) 任意の副作用を報告しませんでした。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55...

我々 は局所麻酔下で非ジアテルミー法を用いた腹部脂肪組織生検を標準化しました。115 事業 (2.61%) から出血過剰な術後の症例が発生しました。健康な男性に非ジアテルミー法を用いた腹部脂肪組織の外科的生検を安全に適用できることが分かった.

Adipose tissue biopsies offer tissue samples that, upon analysis, may provide insightful overviews of mechanisms relating to metabolism and disease. To ...

皮下脂肪組織の生検は、疾患に関連する脂肪組織のメカニズムを明らかにできるため、研究および健康管理において非常に重要です。本論文では、腹部から皮下脂肪組織の生検サンプルを採取する手法について説明します。このようなサンプルの採取には、研究者や医師によって、針を用いた手法または外科的な手法のいずれかが用いられます。ただし、針を用いた手法では誤診を招く可能性があるのに対し、外科的手法では白色脂肪組織における生物学的指標をより包括的に把握できる点に注意することが重要である。これは、例えば、研究および医療の両面で不可欠な組織学的解析において顕著である。総じて、外科的手法は男女双方で実施されており、ベッドサイドで安全に施行可能であることに留意されたい。外科的脂肪生検を受ける参加者は、8時間の絶食を行い、生検処置前の72時間は、運動、過度なストレス、アルコール、および能動的・受動的喫煙を控えてください。これらの予防措置は、白色脂肪組織サンプルの分析時に、誤解を招く結果が出るリスクを最小限に抑えることを目的としています。まず、脂肪組織生検処置に必要な材料を準備します。キャスター付きのメイヨースタンドに滅菌済みのサージカルシートを敷きます。メイヨースタンドに配置する材料は以下の通りです。直剪刀（ストレートタイプ）15 cmを1本。11番メス刃1本。メスハンドル1本。曲剪 14cm 1本。モスキート鉗子1本。コッハー鉗子1本。外科用ピンセット1本。滅菌ガーゼに浸したポビドンヨード。縫合糸 4.0を1本。直線剪刀 11 cmを1本。持針器 15 cmを1本。滅菌ガーゼを5枚。滅菌粘着ガーゼを1枚。消毒済みの針を装着した10 mLシリンジ1本。アドレナリンを含まない2% Xylocaine 10 mL。および消毒済みの手術用手袋1双。別のベンチで、組織採取に必要な以下の資材を準備します。エッペンドルフチューブを2本用意します。滅菌針を使用して、各エッペンドルフチューブのキャップに小さな穴を開けます。これは、マイナス190 °Cの液体窒素にエッペンドルフチューブを浸漬させた際のキャップの破損を避けるためです。10%ホルマリンを5 mL入れたチューブを1本用意します。マイナス190 °Cの液体窒素を入れた小型容器を用意します。これは、組織の完全性を最終的な固定まで確保するために、組織の入ったエッペンドルフチューブを直ちに浸漬させるために必要です。すべての材料と消耗品の準備が整った後、患者を手術台の上に仰臥位で配置します。外科医は手術台の側面に位置します。まず、外科医はポビドンヨードを用いて、切開部位の周囲15センチメートルの腹部領域を消毒します。次に、局所麻酔のため、アドレナリンを含まない2%キシロカイン10 mLを切開部位に注入します。その後、その領域に滅菌済みの手術用ドレープを配置します。これが完了したら、局所麻酔が適切に行われたことを確認します。これには約3〜5分かかります。その後、外科医は11番メスをメスハンドルに装着し、下層の脂肪組織が露出するまで皮膚および皮下組織を切開します。切開幅は約2〜2.5 cmで、臍から3〜5 cm離れた位置で行います。その後、15 cmの直線手術用鋏を用いて、外科医は皮下組織を除去します。脂肪組織が露出したら、ピンセットと14 cmの曲手術用鋏で把持します。その後、脂肪組織を整え、切除します。採取する脂肪組織の総量は、実施する解析内容によって異なります。当研究室の経験に基づくと、ほとんどの組織学的解析および遺伝子発現解析においては、約1 gの脂肪組織があれば十分です。脂肪組織の採取後、外科医は切開部位に滅菌ガーゼを約30秒間あて、止血を確認します。止血が確認されたら、外科医は14 cmの針が付いた4-0縫合糸を準備し、外科用ピンセットで皮下組織が見えるまで皮膚を固定します。縫合針を皮膚から皮下組織に向かって刺入し、皮膚と皮下組織を寄せ合わせます。その後、縫合針を皮下組織内でジグザグ法で進め、最終的に皮膚の外側へ導き出します。これを皮膚切開部位が閉鎖されるまで繰り返します。最後に、外部で結節縫合を行います。通常、縫合糸は8〜12日以内に脱落し、この手法全体によって術後の皮膚への瘢痕形成の可能性を低減させることができます。その後、外傷部位を生理食塩水で洗浄し、滅菌粘着ガーゼで覆います。ここではモスキート鉗子を使用しなかったことに気づかれたかもしれません。この器具は、血管から出血がある場合に使用します。その場合、蚊用ピンセット（Mosquito tweezers）で血管を捕捉して結紮し、止血するまで閉鎖します。なお、本目的において、採取したサンプルの重量は約1 gであったことに留意してください。採取した組織は3つの断片に切り分け、それぞれ350 mg、150 mg、および500 mgに計量します。350 mgのサンプルをエッペンドルフチューブに入れ、タンパク質レベルの解析に使用します。150 mgのサンプルを別のエッペンドルフチューブに入れ、mRNA発現解析に使用します。これらの2本のエッペンドルフチューブを、-80°Cのフリーザーに最終保管するまでサンプルの完全性を維持するため、-190°Cの液体窒素を入れた小型容器に直ちに浸します。最後に、500 milligramのサンプルを10% formalin 5 mLを含むチューブに浸し、組織学的解析に使用します。本手法は非電気凝固法に基づいています。術後の瘢痕などの皮膚病変のリスクを排除するため、滅菌ガーゼを用いて止血を行います。全体として、我々の非電気凝固法による副作用は軽微です。実際、本研究では計115件の生検を実施しましたが、過剰出血が発生したのはわずか3例でした。これらの出血は、生検処置後の2日目に発生しました。これらの個体に対し、外傷部位を再切開して排膿し、止血処置を行った後、外科用ステープラーで閉鎖する治療を施しました。その後、さらなる合併症は認められず、数日で正常に治癒しました。最後に、すべての被験者において、各生検処置から3か月後に皮膚の瘢痕を含む副作用が認められなかったことを記しておきます。我々の非電気手術生検法は副作用が最小限であることが示されており、白色脂肪組織の生物学的指標の完全な概観が必要な場合にの使用が提案されています。

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