Name: 側方腹腔ドリルビット傷害を利用した羊の腰椎椎間板変性モデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: 学ぶ側方腹腔ドリルビット傷害法による羊の腰椎椎間板変性モデル作成法。安全で再現性のある手術アプローチにより、椎間板変性の病態生理と再生医療の可能性を研究するための有用なツールを提供します。

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クリス・デイリー博士は、リチャード・ジープソン研究奨学金の手術のための基金の受領者です。著者たちは、Anne Gibbon博士、ドン・ジャン医師、モナッシュ・アニマル・サービス（Monash Animal Services、Monash University）のスタッフに、動物の手術とケアの支援について感謝したいと考えています。

この原稿で詳述されているプロトコルは、Monash University Animal Ethicsの動物保護ガイドラインに従っています。このプロトコルに関する動物倫理の承認は、Monash University動物倫理によって認められています。倫理承認番号：MMCA / 2014/55 1.羊の準備注：2〜4歳のEwesを使用した。 <ol><li>麻酔前18時間の高速羊。操作19の前に6-12時間まで動物に水を供給する。 </li><li>手術室への移送を容易にするために、塩酸メデトミジン（0.015-0.020mg / kg）の静脈注射により動物を鎮静させる。 注：メデトミジン塩酸塩は、手術室への移送のために、他の動物との分離に伴う動物のストレスおよびかき混ぜを軽減するのに役立つ。 </li><li>手術室への到着時に麻酔を誘導するためにチオペンオン（10〜13mL / kg）を注入する。 </li><li>予防的イントラを管理する静脈内抗生物質（アモキシシリン1g IV）をチオペンタール注射直後に投与する。 </li><li>気管内チューブ20内径7.5〜9mmの挿管羊。 </li><li> 2L /分の流速で100％酸素中で吸入イソフルラン（2〜3％）を用いて麻酔を維持する。羊の耳にパルスオキシメータを取り付けます。 </li><li>羊のバイタルサイン（心拍数、呼吸数、酸素飽和度、パルスオキシメーター、観察）と意識レベルを密接に監視します。 注：自発的な咀嚼、活動的な逆流、および自発的な動きなどの軽い麻酔の指標は、麻酔のレベルの上昇を促すはずです。緊急の麻酔の軽減を示す赤旗の徴候には、呼吸障害および重度の徐脈が含まれる。目の回転は、羊19の麻酔深度の一貫した指標ではありません。 </li></ol>ディスクレベルと切開<ol><li> sを集める獣医クリッパー、20mLルアーロックシリンジ、21G IV針、＃4メスハンドル、＃22メスブレード、Gillies組織鉗子、メッツェンバム湾曲解剖はさみ、Deaverリトラクター、Hohmannリトラクターブレード、3.5mm Bradドリルビットストップ、ドリル、オートクレーブ可能な獣医ドリルバッグ、針ホルダー、2-0吸収性合成編組縫合糸、3-0吸収性合成編組縫合糸およびMayo縫合はさみを含む。 </li><li>操作スイートを準備します。 70％エタノールで手術台と計器スタンドを掃除してください。手術前にすべての手術器具をオートクレーブする。術前麻酔検査を行う。 </li><li>羊を右の横の位置で手術台の上に置きます。 </li><li>電子クリッパを使用して、下側肋骨によって上方に定義された領域を、腸骨によって下側に、対側腰部横断プロセスによって内側に、同側腰部横断プロセスに対して約10cm横に剃る。 </li><li>外科切開部位のランドマークのための腸骨稜、腰部横断プロセス（L1〜6）および肋骨 - 脊柱角を触診する。これらのランドマークを無菌ペンでマークしてください。 </li><li>クロルヘキシジンとアルコール性ヨウ素消毒洗浄液で消毒することにより、側方腹部を準備する。 </li><li> 手術中の標準的な手術無菌技術を観察する。手術チームは手術前にスクラブを行う。外科手術部位の上に滅菌有孔の四角いドレープを置き、オーバーヘッドテーブルに大きな滅菌四角いドレープを置きます。 <ol><li>操作の前に手術部位内で使用されるすべての項目を滅菌する。手術中の手術部位の無菌性を監視し、維持する。滅菌現場に導入されたすべての品目が滅菌され、滅菌された状態で移送されるようにする。 </li></ol></li><li>外科的処置中に視覚化を容易にするために、手術用ルーペの倍率およびヘッドライトを使用する。 </li><li>縦切開する＃4のメスに取り付けられた＃22のメスブレードを、椎骨間の関心対象レベルの上下に1cmから2cmの腰の横方向のプロセスと平行に使用する。 注：切開計画に関する詳細は、ディスカッションに記載されています。 </li><li>下にある皮下組織と腹部の筋肉組織の側面を分けるために、単極ジアテルミーを使います。関心のある椎間板の上下の腰部横断プロセスの先端に向けて解剖を指示する。 </li><li>胸腰部筋膜を横方向のプロセスへの取り付け時に縦に分割する。 </li><li>基礎となる四肢腰部 、腰筋、および横行神経血管束を視覚化し、保存する。 </li><li>ジアテルミーを使用して止血を維持する。 </li><li>露出した椎間diで腹膜の平面と後部腹壁の筋肉の間で指を掃引するscレベルを用いてデジタル鈍的切開を行う。 </li><li>椎間円板をさらに露出させるために、Deaverリトラクターを使用して四分円腰部および腰筋を後部後退させる。 </li><li>凹型椎体および凸状椎間板のための触角。 </li><li>リトラクタをディスクのすぐ上に置き、腰部血管が損傷しないように注意してください。 </li><li>ヘッドライト付きの手術用ルーペ倍率を使用して、下側の終板に対して約1cmの尾側に位置する腰部血管を特定する。 </li><li>術中X線を行い、椎間板のレベルを確認します。 21 注：ラジオグラフ設定：47kV; 4mAs 21 </li><li> 必要なディスクレベルに応じて、周囲の構造と添付ファイルを以下のように分離して椎間板を露出させます。 <ol><li>レベルL3 / 4以上では、筋肉のアタッチメントをディscを使用した。 </li><li>レベルL4 / 5以下の場合は、双極性のジアテルミーとはさみを使用して、厚い筋肉のアタッチメントをディスク上に鋭く分割します。 注：L6 / S1ディスクは、腸骨稜の閉塞のためにアクセスするのが難しい場合があります。側方アプローチを介してアクセスが達成できない場合、前方アプローチを利用することができる。 </li></ol></li></ol> 3.ドリルビットの傷害注：術前計画には、傷害/治療レベルおよびコントロールレベルの割り当てが含まれます。レベル配分に関するさらなる情報は、ディスカッションで見つけることができます。 <ol><li>椎間円板の左の側方および前方の四肢を観察することによって、ドリルビットの進入点を定義する。 注：エントリーポイントは、この左前側四分円（ディスクの前側および側端で定義される）の中間点に位置しています。ドリルビットは、この進入点に、目的の軌跡で挿入されます椎間板の中心に向けて、頭側から鉛直方向にわずかに向けられる。 </li><li> ブラッドポイントのドリルビットをパワードリルに合わせます。ドリルビットの直径が椎間板の高さよりわずかに小さいこと、 すなわち 60-70kgのヒツジの腰椎椎間板の場合〜3.5mmであることを確認する。 <ol><li>ドリルビットストップを適用して、腰椎の直径の約半分の保護されていないドリルビット長、 すなわち 60-70kgのヒツジの腰椎椎間板の〜12mmを提供する。 </li></ol></li><li>エントリーポイントにドリルビットを適用し、椎間板の中心にわずかに頭蓋骨のある軌跡で指示します。わずかな頭蓋の角度は、終板損傷のリスクを最小限にすることである。 </li><li>ドリルビットを1秒間低出力でドリルで椎間板にゆっくりと進めます。過度の抵抗に遭遇した場合、わずかな頭蓋または尾の様式で軌道を調整する 注：そのような過度の抵抗はエンドプレートとの接触を示している可能性があります。 </li></ol> 4.閉鎖<ol><li>止血が達成されたら、Ringersの溶液で傷口を洗浄します。 </li><li>外側の腹壁組織に2-0の吸収性合成編組縫合糸を使用し、皮膚に連続した3-0個の未染色吸収性合成編組皮下縫合糸を使用して、層状閉鎖を行うのが好ましい。 </li></ol> 5.術後管理<ol><li>術後鎮痛のために鼠径部にフェンタニル経皮パッチ（75μg/ h）を3日間置く。 </li><li>さらに、必要に応じて、静脈内投与のブプレノルフィン（0.005-0.01 mg / kg）を使用してください。 </li><li>吸入麻酔薬を止める。自発呼吸が起こったら、気管内チューブを外す。 </li><li>一定の観察の下で動物を保持ケージ内で回復させる。 注：動物は十分な注意を回復するまで無人で放置しないでください胸骨臥位を保持するためのusness。 </li><li>動物が完全に警戒し立ったら、食物と水を再導入する。完全に回復したら、動物を他の動物とペンを持っている手術施設に戻してください。 </li><li> 24時間綿密に監視し、1週間の観察を続ける。術後の痛みや苦痛の証拠を監視する。 注：術後経皮フェンタニルパッチを3日間適用すると、十分な鎮痛作用が得られるはずです。追加の鎮痛薬の要求は、動物のレビューを促すはずである。 </li><li>正常に羊を供給し、羊が制限なく通常の活動を行うことを許可する。跛行のような神経学的欠損の兆候がないか羊を観察する。 注記：ドリルビット損傷法による椎間板欠損は、椎間板の前外側面にあり、損傷深さはドリルビットストップによって中核に制限されます。神経要素は、椎間板の後方/後方側に位置するので、症候性髄核に続発する神経妥協のリスクは遠隔である。モデルのこの解剖学的特徴は、髄核ヘルニアの有無にかかわらず、椎間板変性を区別するための神経学的検査の使用を排除する。 </li><li>実験期間の終わりに安楽死と剖検を待つために、羊を大学の農場に戻してください。 </li></ol> 6.安楽死<ol><li>ドリルビット椎間板損傷後の適切な時間間隔でヒツジ安楽死を実施する。 </li><li>安楽死のために静脈内ペントバルビトンナトリウム（&gt; 100 mg / kg）を注入する。 </li></ol>

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著者らは、開示すべき競合する金銭的利益がないと宣言している。

この最小侵襲性の側方アクセスアプローチは、このシリーズで観察された術後ヘルニア、腹部裂開または感染症がなく、有効かつ安全である。深さ止めを有するドリルビット椎間板損傷モデルの使用は、既知の寸法（ すなわち 、本研究では直径3.5mm×深さ12mmの損傷）の一貫した椎間板損傷を誘発する再現可能な方法を提供する。我々の経験では、この方法は、従来の卵形メス刃の腰椎椎間板切開モデル6,22（未発表データ）で観察されたものよりも重篤度の低い椎間板変性を生じる。これについては、今後の出版物で説明する。 最初の長手方向の皮膚切開（ステップ2.9）を行う際、切開の正確な長さと位置は、所望の椎間板レベルに基づいて変更されるべきである。より優れたディスクレベル（T12 / L1）は、切開部を肋骨冠部にまで延ばし、腸骨稜部に伸びる切開部は下部腰椎（L5 / L6まで）へのアクセスを可能にする。 10cmのカットは3〜4枚のディスクレベルへのアクセスを容易にしますが、シングルディスクへのアクセスには5cmの小さな切開が必要です。我々は、通常L2 / L3とL3 / 4の2つのレベルで怪我...

腰痛は世界中の障害の主要原因です1 。腰椎椎間板変性に関連する椎間板形成性疼痛は、腰痛の重大な原因と考えられている2 。変性プロセスの理解を広げ、潜在的な治療法の研究のために、椎間板疾患の信頼できる動物モデルに対する需要が高まっている。 椎間板変性の数多くの動物モデルが存在する3 。変性椎間板疾患の研究に用いられる動物モデルは、マウス4から 、イヌ5 、ヒツジ6 、および非ヒト霊長類7などのより大きな哺乳動物までの大きさの範囲にある。椎間板変性を誘発するために使用される方法は、機械的（ 例えば、椎間板の圧迫<html> （ 例えば、化学的核分解5 ）、またはそれほど一般的ではない自発的変性（ 例えば 、砂ラット9 ）を含むが、これらに限定されない。 人間の椎間板変性の複雑さを考えると、完璧な動物モデルは存在しない。しかし、この状態を模倣するために適切な動物モデルを選択する際の重要な考慮事項が確認されている3 。このような考察には、脊索細胞（ヒト、羊、ヤギおよび軟骨異形成犬の成体核膿瘍には存在しないが、ほとんどの哺乳類には存在する可能性のある前駆細胞機能10を有する原始細胞）、ヒトおよび動物に対する椎間板および椎間板の類似性、臨床的状態と同等の生体力学的力、機械的および倫理的考察3 。 <html> jove_content &quot;&gt;ヒト以外の霊長類は、上記の基準の多くを満たしています。自然発生した椎間板変性症のBaboonとmacaqueモデルは、11,12,13に記載されています。どちらの種も、直立姿勢または半直立姿勢しかし、倫理的かつ実践的な考慮（ 例えば、費用、住宅、自発的変性の発症の遅延）は、多くの機関でその使用を制限している。 ヒツジ背骨は、ヒトの背骨10,14,15との細胞、生体力学的および解剖学的類似性を含む利点を有する、椎間板変性の確立されたモデルである。ヒツジの4倍の体格にもかかわらず、羊の腰椎椎間板はヒトの椎間板と同様のストレスを受けるs = &quot;xref&quot;&gt; 14。ヒツジモデルは、非ヒト霊長類モデルよりも、倫理的観点からより広く受け入れられている。変性プロセスを開始するための様々な方法が記載されており、その多くは椎間板への直接アクセスを必要とする。仙骨領域における脊髄の終結およびヒツジ腰椎における後縦靭帯の骨化のために、椎間板への後方アプローチは技術的に困難であり、ヒツジ16ではそれほど一般的ではない。羊の腰椎への伝統的な接近ルート、 すなわち 、前部または前外側アプローチを介して、大きな腹部の切開が必要であり、ヘルニアのリスクを伴い、内臓の内臓および神経血管構造に損傷を与える16 。従属腹部領域から離れた比較的小さい側方切開部の使用は、そのようなリスクを減少させる可能性がある17 。 私たちは羊毛を提示する最小侵襲性側方アプローチを介して実施されたドリルビット損傷を使用した変性腰椎椎間板疾患の1例を経験し、Zhang らの研究によって触発された。 18 。このプロトコールの目標は、容易に再現性があり、一貫した傷害を生じ、安全で耐容性が高い信頼性の高い腰椎椎間板損傷モデルを可能にすることである。このアプローチは、椎間板変性または再生療法の研究のための伝統的な外科的切除法（未発表データ）で観察されたものより軽度の腰椎椎間板変性を誘導しようとする研究者に適している。これらの知見は、今後の刊行物に記載される。

<table><tbody><tr><td>メデトミジン塩酸塩(10 mL注射)</td><td>セラポン/ゾエティス</td><td>PFIDOM10</td><td>複数のサプライヤー:ゾエティス/イリウム</td></tr><tr><td>チオペントン</td><td>トロイ</td><td>トリオチオープントーン</td><td>複数のサプライヤー:ネオンラボラトリーズ、ヤグソンファーマシューティカル</td></tr>シュー<tr><td>ティカルズ イソフルラン(酸素中2〜3%)</td><td>バクスター</td><td>AHN3636</td><td>複数のサプライヤー:バクスター/VetOne</td></tr><tr><td>アモキシシリン非経口</td><td>グラクソ・スミスクライン</td><td>JO1CA04</td><td>複数のサプライヤー: グラクソ・スミスクライン/メルク</td></tr><tr><td>ブピバカイン (0.5% 注射 20 mL)</td><td>ファイザー</td><td>005BUP001</td><td>複数のサプライヤー: ファイザー/アストラゼネカ</td></tr><tr><td>PVD ヨウ素溶液</td><td>Jurox</td><td>61330</td><td>複数のサプライヤー: Jurox/Orion</td></tr><tr><td>クロルヘキシジン 5%w/v</td><td>Jurox</td><td>Chlorhex C 5L (SCRUB)</td><td>複数のサプライヤー: Jurox/ファイザー</td></tr><tr><td>経皮フェンタルパッチ(75 &mu;g/h)</td><td>ヤンセン・シラグ</td><td>S8-Dur7.5</td><td>複数のサプライヤー:サンド・</td></tr><tr><td>ブプレノルフィン iv</td><td>ジュロックス</td><td>504410</td><td>複数のサプライヤー:LGM Pharma</td></tr><tr><td>アチパメゾール (アンチセダン 0.06 mg/kg - 0.08 mg/kg)</td><td>ゾエティス</td><td>PFIANT10</td><td>複数のサプライヤー:イリウム</td></tr><tr><td>・オスター ゴールデン A5 2スピード・クリッパー</td><td>オスター</td><td>078005-140-003</td><td>オスター</td></tr><tr><td>20 mL ルアーロック・シリンジ</td><td>テルモ</td><td>6SS+20L</td><td>複数のサプライヤー: Medshop Australia/Terumo</td></tr><tr><td>21 G IV 針</td><td>Terumo</td><td>SG3-1225</td><td>複数のサプライヤー: Medshop Australia/Terumo</td></tr><tr><td>#4 メス ハンドル</td><td>Austvet</td><td>AD010/04</td><td>複数のサプライヤー: Austvet/SurgicalInstruments</td></tr><tr><td>#22 scalpel baldes</td><td>Austvet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gillies tissue forceps</td><td>Austvet</td><td>AB430/15</td><td>複数のサプライヤー:Austvet/SurgicalInstruments</td></tr><tr><td>Metzenbaum湾曲解剖はさみ</td><td>Austvet</td><td>AC101/14</td><td>複数のサプライヤー:Austvet/SurgicalInstruments</td></tr><tr><td>Deaver retractor</td><td>Surgical Instruments</td><td>23.75.03</td><td>複数のサプライヤー:Surgical Instrument/Austvet</td></tr><tr><td>Hohmann retractor</td><td>Austvet</td><td>KA173/35</td><td>複数のサプライヤー:Austvet/SurgicalInstruments</td></tr><tr><td>メイヨー縫合はさみ</td><td>Austvet</td><td>AC911/14</td><td>複数のサプライヤー:Austvet / SurgicalInstruments</td></tr><tr><td>ニードルホルダー14 cm&nbsp;</td><td>EliteMedical</td><td>18-1030</td><td>複数のサプライヤー: EliteMedical/Austvet</td></tr><tr><td>CMT 3.5 mm ブラッドポイントドリル</td><td>Carbatec</td><td>516-035-51</td><td>複数のサプライヤー: Southeast Tool / Carbatec</td></tr><tr><td>ドリルビットストップ 4 mm</td><td>ドリル倉庫</td><td>20121600</td><td>複数のサプライヤー: Amazon</td></tr><tr><td>Bosch 10.8 V コードレスアングルドリル</td><td>Get Tools Direct</td><td>GWB10.8V-LIBB</td><td>複数のサプライヤー:Bunnings/Get Toolsダイレクト</td></tr><tr><td>オートクレーブ動物用ドリルバッグ</td><td>AustVet</td><td>DRA043-AV</td><td>AustVet</td></tr><tr><td>2-0 吸収性合成編組縫合糸</td><td>Ethicon</td><td>VCP335H</td><td>Ethicon</td></tr><tr><td>3-0 吸収性合成編組縫合糸</td><td>Ethicon</td><td>VCP232H</td><td>Ethicon</td></tr><tr><td>Siemens 3 Tesla Skyra Widebore MRI</td><td>Siemens</td><td>N/A</td><td>Siemens</td></tr><tr><td>9.4 Tesla Agilent (Varian) MRI</td><td>Agilent Technologies</td><td>N/A</td><td>Agilent Technologies</td></tr><tr><td>Atomscope HF 200 A Radiogaph</td><td>Radlink</td><td>330003A</td><td>複数のサプライヤー: Radlink/DLC オーストラリア</td></tr><tr><td>獣医用パルスオキシマイター</td><td>DLC&nbsp;</td><td>192500A</td><td>複数のサプライヤー:DLC Australi Pty Ltd / AustVet</td></tr></tbody></table>

側方腹腔ドリルビット傷害を利用した羊の腰椎椎間板変性モデル

Ovine Lumbar Intervertebral Disc Degeneration Model Utilizing a Lateral Retroperitoneal Drill Bit Injury

椎間板の変性は、背痛の発症および世界的な障害の主要原因に大きく寄与する。椎間板変性の数多くの動物モデルが開発されている。理想的な動物モデルは、形態、生体力学的性質、および脊索細胞の欠如に関して、ヒト椎間板を酷似して模倣すべきである。ヒツジ腰椎椎間板モデルは、これらの基準を満たす。本発明者らは、横方向の後腹膜アプローチによるドリルビット損傷を利用した椎間板変性のヒツジモデルを提示する。側方アプローチは、ヒツジ背骨への伝統的な前方アプローチに伴う切開および潜在的な罹患率を有意に減少させる。ドリルビットの損傷方法を利用することにより、一定の程度の椎間板変性を開始する、正確で寸法の一貫した再現性のある損傷を生成する能力が得られる。環状の焦点の性質核脊髄欠損は、焦点椎間板ヘルニアの臨床状態をより密接に模倣する。羊はこの手順に従って急速に回復し、通常は移動して1時間以内に食べています。椎間板変性が起こり、羊は8週間の期間で検死およびその後の分析を受ける。我々は、椎間板変性のドリルビット損傷モデルが、従来の環状損傷モデルよりも利点があると考えている。

術前に、ヒツジは根底にある椎間板の形態および変性の評価のためのベースライン3T磁気共鳴画像法（MRI）を受けた。羊は、椎間板レベルの確認および椎間板高さ指数の計算のために、追加の術中側方X線撮影を受けた。 図1に 、3T MRIの術前矢状面スライスと術中X線写真を示します。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/55753/55753fig1.jpg" /> 図1：術前3T MRI（ A ）および術中側方X線写真（ B ）。 （ A ）腰椎1/2（L1 / 2）から腰仙（L6 / S1）椎間板への3T MRI（3T T2強調スピンエコーシーケンス）からの矢状スライス。椎間板は均一な高次の外観を有する重大な...

椎間円板の変性は、背痛および世界的な障害の主要な原因に大きく寄与する。椎間板変性の多くの動物モデルが存在する。一貫した椎間板損傷および再現性のある椎間板変性を達成するドリルビットを利用して、椎間板変性のヒツジモデルを実証する。

Intervertebral disc degeneration is a significant contributor to the development of back pain and the leading cause of disability worldwide. Numerous ...

この側方後腹膜アプローチによるドリルビット椎間盤損傷法の全体的な目的は、安全で一貫性があり、再現可能な羊の椎間盤変性モデルを作成することです。この羊腰椎椎間盤変性モデルは、椎間盤変性の病理や生理学を調査するための新たな手法を提供し、再生療法の潜在的な検討を可能にすることで、トランスレーショナル脊椎研究分野における重要な疑問への回答に寄与します。本アプローチの主な利点は、適切な動物モデルにおいて、安全な外科的アプローチを通じて一貫した外科的損傷を与えられることです。テキストのプロトコルに従って羊を麻酔・挿管し、手術室の準備を整えた後、動物を右側臥位で手術台に配置します。電気バリカンを使用し、上方を下位肋骨、下方を腸骨、内側を対側の腰椎横突起、外側を同側の腰椎横突起から約10 centimetersの外側として定義された領域を剃毛します。この外科的切開部位の指標として、腸骨稜、腰椎横突起、および椎角を触診します。次に、滅菌ペンを使用してこれらの指標をマークします。続いて、クロルヘキシジンおよびアルコールヨード消毒液を用いて、側腹部を消毒します。その後、手術部位に滅菌された開窓付き正方形ドレープを、オーバーヘッドテーブルに大きな滅菌正方形ドレープを順に配置し、その上に滅菌器具を並べます。手術用ルーペによる拡大視とヘッドライトの下で、局所麻酔薬を注入する。その後、4番メスハンドルに取り付けた22番メスを用いて、目的の椎間盤レベルの上下1〜2個の腰椎横突起に対し、それらに平行で1cm前方に縦切開を加える。単極電極による電気凝固を用いて、皮下組織および腹壁筋の外側を剥離する。剥離は、目的の椎間盤の上下にある腰椎横突起の先端に向かって行う。次に、横突起への付着部で胸腰筋膜を縦方向に切開します。その下にある腰方形筋、ヒラメ筋、および通過する神経血管束を確認し、損傷しないように保護します。電気焼灼器を用いて、処置を通じて止血を維持します。露出した椎間板レベルにおいて、腹膜面と後腹壁筋の間に指を滑り込ませ、デジタル鈍的剥離を行います。次に、ディーバレトラクターを用いて、腰方筋と大腿二頭筋を後外側に牽引し、椎間板をさらに露出させます。その後、凹面の椎体と凸面の椎間板を触診します。リトラクターを椎間板の直上に配置し、腰血管を損傷しないよう注意します。次に、手術用ルーペとヘッドライトを用いて、下端板から尾側へ約1cmの位置にある腰血管を特定します。術中側方X線撮影で椎間板レベルを確認した後、目的の椎間板レベルに応じて、周囲の構造物を剥離して椎間板を露出させます。L3、L4、およびそれ以上のレベルでは、デジタル鈍的剥離を用いて、椎間板上の筋肉付着部を掃去します。L4、L5、およびそれ以下のレベルでは、バイポーラ電気凝固剪刀を用いて、椎間板上のより厚い腱性筋肉付着部を鋭的に切離します。椎間板における左外側および内側端を確認し、ドリルの穿刺点を決定します。ドリルビットで穿刺する前に、側面のX線写真で椎間板レベルを確認します。電動ドリルにブラッドポイントドリルビットを取り付けます。ドリルビットの直径が椎間板の高さよりもわずかに小さいことを確認してください。例えば、体重60〜70 kgの羊の腰椎椎間板では3.5 mmとします。ドリルビットストッパーを装着し、露出するドリルビットの長さが腰椎椎間板の直径の約半分になるように調整します。例えば、体重60〜70 kgの羊の腰椎椎間板では12 mmとなります。次に、ドリルビットを進入点に当て、椎間板の中心からわずかに頭側に向けた軌道で進めます。これにより、終板損傷のリスクを最小限に抑えることができます。ドリルの出力を低く設定し、ドリルビットを椎間板内へ1秒間ゆっくりと進めます。過剰な抵抗がある場合は、軌道をわずかに頭側または尾側へ調整してください。止血が完了したら、リンガー液を用いて創傷部を洗浄します。次に、層状閉鎖を行います。側腹壁組織には2-0吸収性合成編み糸を、皮膚には3-0無染色の吸収性合成皮下縫合糸を用いて連続縫合することが推奨されます。ここに示しているのは、羊の第1腰椎から腰仙椎間円盤までの3T MRIによる術前正中断面像であり、術前に有意な椎間円盤変性の所見は認められません。この術中側方放射線写真により、椎間板のレベルが確認され、椎間板高指数の算出が可能になります。ここに示されている肉眼的な形態学的外観では、ドリルビットによる損傷路が線維輪を貫通し、髄核まで達していることが分かります。この損傷は、こちらの9.4T MRIでも確認できます。この手法を試みる際は、終板への損傷リスクを最小限に抑えるため、ドリルビットを頭側に向かい、ゆっくりと進めることが重要です。このビデオを視聴することで、側方後腹膜アプローチを用いて羊モデルにドリルビットによる損傷を再現する方法を十分に理解できたはずです。メスや電気焼灼器の使用には危険が伴うことに留意してください。常に個人用保護具を着用し、適切な安全上の注意事項に従ってください。外科的な無菌状態を維持することが重要です。

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Research

JoVE Journal

Medicine

医学

椎間板（IVD）の全体の器官培養は、天然の細胞外マトリックス、細胞表現型、および細胞 - マトリックス相互作用を保存します。ここでは、マウスの腰椎とその機能脊髄単位で尾したIVDと、このシステムを利用する複数のアプリケーションを使用してIVD培養系を説明します。...

アン<em&gt;インビトロ</emマウス椎間板の&gt;器官培養モデル

L3-L5棘間プロセスの切除、上頭およびスピン間靭帯、麻痺性筋肉の剥離による腰椎間椎間板変性マウスモデルを開発しました。...

腰椎不安定性のマウスモデル

このプロトコルは、初期段階の椎間板変性をシミュレートする炎症誘発性、変性ウシ器官培養の新しい実験モデルを提示する。...

初期段階の椎間板疾患をシミュレートする炎症性の退行性臓器培養モデル。

光断面化法を用いて椎間板のアヌル線維化における空間的軟骨細胞組織を調べる方法を提示する。...

胚発生から変性までの椎間板の光学断面化と可視化

指触覚測定システムは、高感度の電気外科用圧力センサーを使用して指の触覚圧力を定量化し、ソフトウェアが圧力データとビデオをリアルタイムで表示および正確に記録します。2つの分析モジュールにより、Tuina中の親指のトラッキングとコンディショニングのデータ処理が統合されます。...

腰椎椎間板変性症モデルウサギにおける標的Tuinaの運用および介入効果

このプロトコルは、マルチレベル斜め腰椎椎体間固定術 (OLIF) の手術技術を段階的に提示し、最適な結果を達成するための重要なステップについて詳しく説明します。...

不安定性を伴う変性腰椎椎間板疾患におけるマルチレベル斜め腰椎椎体間固定術

ここで説明されている腎虚血再灌流障害のマウスモデルは、制御組織を提供する右腎摘出術と、急性腎障害をもたらす虚血を誘発するための左腎椎弓根のクランプで構成されています。このモデルは、正中線開腹術アプローチを使用しており、すべてのステップが 1...

腎臓虚血再灌流障害：障害のマウスモデルおよび再生

テロメアとテロメラーゼは、老化と腫瘍形成において重要な役割を果たします。このプロトコルの目標は、2つのマウス誘導性テロメラーゼノックイン対立遺伝子を生成する方法と、それらを組織の変性/再生および癌の研究にどのように利用するかを示すことです。...

組織の変性/再生と癌の研究におけるマウス誘導テロメラーゼ対立遺伝子を利用

このプロトコルは、固定アームのトロカール誘導挿入の有無にかかわらず、単一の膣切開技術を使用して、ヒツジの直腸膣中隔のメッシュ移植を記述する。...

ヒツジモデルにおける経膣メッシュの挿入

アスリートは毎年数百の軽度の外傷性脳傷害（mTBI）/脳震盪を吸収する。しかし、これらの脳への帰結はあまり理解されていません。したがって、臨床的に関連する症状を一貫して複製する単一および反復mTBIの動物モデルは、mTBIおよび脳震盪の研究を進める手段を提供する。...

片性および反復性軽度外傷性脳損傷のマウスモデル

学ぶ側方腹腔ドリルビット傷害法による羊の腰椎椎間板変性モデル作成法。安全で再現性のある手術アプローチにより、椎間板変性の病態生理と再生医療の可能性を研究するための有用なツールを提供します。

側方腹腔ドリルビット傷害を利用した羊の腰椎椎間板変性モデル

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