Name: ヒト胎盤生理学の統合研究への4容器サンプリングアプローチインビボ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-02T12:30:00.000+00:00
Duration: 12 min 17 s
Description: 学ぶヒト胎盤生理学の統合的研究法。4容器サンプリングと超音波血流測定を組み合わせ、母体・胎児両側の血管から血液を採取し、栄養輸送や代謝をインビボで解析する技術です。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

まず、このプロジェクトに参加した母親に心から感謝します。次に、サンプリング手続き、麻酔科医、看護師麻酔科医、外科看護師を援助し、手助けしたすべての人員を認めます。このプロジェクトは、南・東ノルウェー地方保健局とオスロ大学女性健康局のノルウェー諮問部とオスロ大学病院が提供する地方財政からの資金提供なしでは可能ではなかった。

研究はオスロ大学病院のデータ保護関係者と南ノルウェー南部ノルウェーの医療健康研究倫理委員会によって承認されました。すべての参加者は、包括的な書面による同意書に署名した。 1.準備注：手順のタイムラインは図1に概説されています 。 <img alt="図1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55847/55847fig1.jpg" /> 図1 ： 4容器サンプリング手順に関わるタイミングと人員を説明するフローチャート。 1色は1人を表します。この方法の詳細な説明は、プロトコルに記載されている。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55847/55847fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を見るには、ここをクリックしてください。</a> <ol><li> スタッフ <ol><li&gt;超音波測定を行う高度に熟練した胎児医学専門医、手術を行う産科医2名、産科医の1人、検体を採取する2名の看護師、血液ガス分析を担当する1名の助手、他のサンプルは連続して収集の直後に収集されます。 注：より高度な胎盤組織の収集の場合、追加の人が必要です。 </li></ol></li><li> 装置 <ol><li>装置、氷冷1Mリン酸緩衝生理食塩水（PBS）50 mL、冷RNA安定化溶液25 mL、最適切削温度化合物（OCT）5 mLを5 mL準備する。 vacutainersとチューブにラベルを付けます。機器の仮一覧を参照してください。 </li></ol></li></ol> 2.母性<ol><li>母親の臨床的および非臨床的特徴を包括的に記録し、関連する質問と私を繰り返す配送時には、重量を含む服薬基準を満たしていなければなりません。帝王切開前の絶食期間、および手術中に発生する低血圧のエピソードを記録する。 注：グローバル妊娠コラボレーション（COLAB）の最近の刊行物に報告されている母親の臨床データセットの最小値を含めてください。また、この記事では、研究集団を選択する際にいくつかの非常に重要な側面を有しており、研究18を計画する際に対処する必要があります。 </li><li>民族性、年齢、体格指数（BMI）などの父性の特徴を記録することを検討する。 </li></ol> 3.超音波<ol><li>空腹状態の女性と一緒に、配達の日にドップラー超音波検査を行います。大動脈と大静脈の圧迫を避けるために、仰臥位の女性が胎児の静止期に検査を行い、関心領域に対してわずかに横方向に傾けた。の出力を監視するディスプレイ上の機械的および熱的指標による強度の変化。 </li><li> 臍静脈 <ol><li>臍の静脈を胎児の腹部の矢状または斜めの切開部で視覚化する。目に見える枝の前に、腹腔内臍静脈の直線部分の内部血管直径を測定する。定期的なBモードを使用し、直径測定のために垂直のインボネーション角度で血管を視覚化し、拍動性の直径変化の影響を最小限に抑えるために、後の測定のためにいくつかの最適なフレームを維持する。 <ol><li>測定を5〜10回繰り返す19 。 </li></ol></li><li>同じサイトで、ドップラー超音波を使用し、時間平均平均速度（TAMX）を測定するために、インボーション角ができるだけ小さい（常に&lt;30°）ようにプローブを調整します。 3〜5秒間の速度を得る（非脈動流）。 </li></ol></li><li> 子宮動脈 <ol><li>ドップラーを使う子宮動脈が内腸骨動脈から分岐した直後に、それが外腸骨動脈を横切る際に子宮動脈を視覚化するための超音波を提供する。この部位のプローブを調整して低インポーション角（常に&lt;30°）を得、TAMXを測定します。 3心拍の平均速度として速度を求める。 </li><li> TAMXが測定されるのと同じ部位で垂直角を得ることはまずないので、直径測定の部位に近い正しい角度を得るために遠位に血管を追跡する。カラードップラー超音波で評価したところで、この部位の前に目に見える血管が枝分かれする場合は、直径の測定値を除外する。 <ol><li>定期的なBモードを使用し、直径測定のために垂直のインボネーション角度で血管を視覚化し、拍動性の直径変化の影響を最小限に抑えるために、後の測定のためにいくつかの最適なフレームを維持する。 </li><li>測定を5〜10回繰り返す19 。 </li></ol></<html> &gt; </ol></li><li>胎盤の位置に注意してください。 </li></ol> 4. 4血管血液サンプリング注：手順のタイムラインは図1に概略が示されており、サンプルの概要は図2に示されています 。 <img alt="図2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55847/55847fig2.jpg" /> 図2 ： 胎盤脈管構造および採取部位の模式 図 。 4容器サンプリング法では、血液サンプルを子宮静脈、橈骨動脈（子宮動脈のプロキシとして）および臍動脈および静脈から採取する。子宮動脈および臍静脈の血流を超音波で測定する。胎盤由来の組織サンプルを収集する。イラスト：ØysteinH. Horgmo、オスロ大学。5847fig2large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt;この図の拡大版を見るには、ここをクリックしてください。 <ol><li> 安全手順 <ol><li>作業劇場のすべての要員に手袋、外科用スクラブスーツ、マスク、帽子を提供する。 </li><li>外科医、研究スタッフに手術用スクラブスーツ、マスク、帽子、ガウン、ダブルグローブを提供する。メガネはオプションです。 </li><li>血液サンプルを手袋で取り扱う人員を提供する。 </li><li>胎盤試料を手袋と外科用マスクで取り扱う人員を提供する。均質化のためには、フードを使用する必要があります。 </li></ol></li><li> オペレーションシアターでの準備 <ol><li>ブリーフィングを行い、手術の開始前にサンプリングを補助するすべての要員に装置を渡す。 </li><li>必要な末梢動脈および静脈アクセスを支援する麻酔科医および麻酔科看護婦に連絡し、サンプリング前に液体を静脈内に投与することはない。 </li><li>橈骨動脈を補助する人に、前腕静脈サンプルを補助する人に2本のシリンジ（20mLと10mLの1つ）と1つの血液ガスシリンジ（ヘパリンを含む）を注射針で3本注射する。 </li><li> 2つの滅菌シリンジ（20 mL）、5つの滅菌シリンジ（10 mL）、3つの「バタフライニードル」および2つの血液ガスシリンジを操作領域用に準備する。 </li></ol></li><li> 血管へのアクセス。 <ol><li>末梢静脈内（iv）アクセスを保証するために、帝王切開前の標準的な手順に従ってください。 注：このサイトからサンプルを抽出する方が簡単であるため、前胸静脈が好ましい。 </li><li>超音波または触診によって橈骨動脈を手首に局在させる。 0.5mLの皮下リドカイン鎮痛の後、橈骨動脈に動脈ラインを配置する。挿入が3回失敗した場合は、このサイトからのサンプリングを中止するか、女性が挿入中に痛みを経験する場合。 注：標準的な手順に従って帝王切開の手術を行います。サンプリング手順に必要な調整だけが下に示されています。 </li></ol></li><li> 母体の血液サンプル 注：子宮切開の前に、3つの母体血液検体（子宮静脈、橈骨動脈および前胸静脈）を同時に採取する。 <ol><li>子宮の静脈では、腹腔を開いた後、開創器を用いて腹壁を持ち上げ、子宮の主枝を子宮の前外側に露出させる。可能であれば、胎盤と同じ側の子宮静脈分枝から血液を採取するか、胎盤が子宮の正中線に位置する場合は最も顕著な静脈叢を使用する。 <ol><li>蝶静脈の血液ガスシリンジに約30度の角度でバタフライ針を挿入し、穏やかな吸引によって血液を採取しないでください溶血。バタフライ針の静脈の位置を注意深く確保しながら、充填した血液ガスシリンジを20mLシリンジと10mLシリンジで交互に交換します。 注：選択された子宮静脈の対側に立つとき、最適なアクセスが保証されます。 </li></ol></li><li>橈骨動脈については、動脈内ラインから吸引する。最初の5 mLを捨て、血液ガス分析のためにヘパリンシリンジで3 mLを吸引し、続いて2つのシリンジ（20 + 10 mL）で3 mLを吸引する。 </li><li>前胸静脈については、静脈内カテーテルから静かに吸引する。最初の5 mLを捨て、3つのシリンジ（10 mL）で30 mLを吸引する。 </li><li>腹部の閉鎖を開始する前に、子宮の静脈にある採取部位の最終検査を行います。 </li></ol></li><li> 胎児の血液サンプル <ol><li>子供が生まれたときは、直ちに臍帯を締めたり、胎盤を娩出することなく、臍帯動脈から血液を吸引する。ウィットスタート血液ガス分析のためのシリンジを使用し、可能であれば3つの10mLシリンジに従ってください。 </li><li>動脈検体が固定されたら、臍静脈からサンプリングする前に、コードをクランプして子供を助産師に渡す（血液ガスおよび20 + 10mLシリンジ）。 注：採取から数秒以内にすべての臍帯標本を採取し、自発的に分離しない限り、原位置で胎盤を採取する。 </li><li>レイトコードクランプに関するノルウェーの推奨事項に従ってください。悩んでいる子供の場合は、すぐにコードを締め付けて切断し、子供を助産師や新生児医に渡してください。 </li></ol></li><li> 血液サンプルの取り扱い <ol><li>残りの血液サンプルを調製しながら血液ガスシリンジを氷上に置き、5分以内に血液ガス分析装置で分析する。 </li><li>血液検体をすぐにバキュテイナーに移し、氷上に置く前にロッカーに1〜2分間置く。血清チューブを労働に委ねるアトリエベンチを30分間安定させる。 注：これは5つのサイトすべてからのサンプルが良質を保証するために同時に準備されなければならないので、余分な注意が必要な手順の重要なステップです。 </li><li>できるだけ早く、30分以内に6℃、2,500 xgで20分間、血漿サンプルを遠心分離する。 </li><li> 30分後、血清サンプルを室温で2,500 x gで10分間遠心分離する。 </li><li>上清を2mLの凍結チューブに慎重に分注し、血小板を含まない血漿を確保するためにペレットの上に0.5mLの上清を残す。 </li><li>試料を-80℃で保存する。 </li></ol></li></ol> 5.胎盤組織の収集<ol><li>できるだけ早く、胎盤を氷冷した解剖皿に置いた後、胎盤を平らにします。 最長径と直径を90度で撮影して測定します。 </li><li>胎盤を体重測定する。 </li><li>重量、2つの直径、任意のgロスの病理、臍帯血管の数および送達から胎盤を氷上に置いた時までの時間間隔であった。 注：臨床的に示された場合、胎盤を病理学的検査に送る。 </li><li>母体表面を上にして胎盤を置き、陽性病理の領域を避けて、胎盤の各象限にランダムに位置する4〜5個のサンプリング部位を同定する。ハサミを使って脱落膜を除去し、妊婦の表面から3〜5mmを切り取る。各サイトから1~2 cm 3の絨毛組織を採取する。 </li><li>収集した組織を50mLの冷1M PBSで穏やかに洗浄する。各採取場所から数ピースに分け、アリコート。 注：胎盤の大きさは、計画された分析に依存します。 </li><li> 0.1~0.5cm 3の組織サンプルのアリコートを5本のクライオチューブに加え、液体窒素で急速に凍らせる。 </li><li> 0.1〜0.2 cm 3の小片を25 mLのRNA安定化溶液でチューブに加えます。 4時にストア6; Cで24時間、RNA安定化溶液を捨て、それを交換する。フリーズ。 </li><li> OCT 0.5 mLを含む5本の凍結チューブに0.5 cm 3のピースを加え、OCTで上にして混合し、凍結させる。 </li><li>分析までサンプルを-80℃で保存する。 注：Burton et al。計画された分析に応じて、胎盤サンプリングの実用的な側面の優れた概要を提供する。 図20は、微絨毛および基底膜の単離のために残りの組織を調製し、そして真空吸引技術によって脱落膜組織を収集することを検討してください。 21、22 </li></ol> 6.新生児の特徴<ol><li> Apgarスコア（1,5,10分）、性別、体重、長さ、妊娠期間、新生児集中治療室への入院（滞在の長さと結果）などの新生児の特徴を記録する。 </li><li>新生児の体組成を人体測定、空気置換プレチスモグラフまたは二重X線吸光光度法を用いて測定した。 23、24 </li></ol> 7.計算<ol><li>動脈および子宮動脈において同様の血液組成を仮定し、子宮胎盤の動静脈濃度差を計算する。 子宮静脈内動静脈濃度差= C A - C V 臍静脈 - 動脈間濃度差= C v -C a ここで、Cは下付き文字：A、橈骨動脈; V、子宮静脈; v臍静脈およびa、臍動脈。 </li><li>容量血流量、mL /分（Q）を計算する： <img alt="式1" src="/files/ftp_upload/55847/55847eq1.jpg" /> Dは血管の直径（cm）であり、TAMXは時間平均最大速度であり、hは空間的血液速度プロファイルの係数である。臍静脈の係数として0.5を使用し、子宮動脈25、26 0.6。 </li><li>フィックの原理に従って、胎盤摂取量と放出量を計算する： 子宮内摂取 =（ C A - C V ）× Qm 胎児取り込み=（C のV - CのA） x Q f 下付き文字：m、母体およびf、胎児。 </li></ol>

<ol><li>Jansson, T., Powell, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+placenta+in+fetal+programming%3A+underlying+mechanisms+and+potential+interventional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Sci+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Role of the placenta in fetal programming: underlying mechanisms and potential interventional approaches.</a> Clin Sci (Lond). 113 (1), 1-13 (2007).</li>
<li>Hanson, M. A., Gluckman, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+developmental+conditioning+of+later+health+and+disease%3A+physiology+or+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Early developmental conditioning of later health and disease: physiology or pathophysiology.</a> Physiol Rev. 94 (4), 1027-1076 (2014).</li>
<li>Guttmacher, A. E., Spong, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+placenta+project%3A+it%27s+time+for+real+time%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">The human placenta project: it's time for real time.</a> Am J Obstet Gynecol. 213, 4 Suppl 3-5 (2015).</li>
<li>Battaglia, F. C., Regnault, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Placental+transport+and+metabolism+of+amino+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Placental transport and metabolism of amino acids.</a> Placenta. 22 (2-3), 145-161 (2001).</li>
<li>Hay, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Placental-fetal+glucose+exchange+and+fetal+glucose+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Trans+Am+Clin+Climatol+Assoc%22%5BJournal%5D)">Placental-fetal glucose exchange and fetal glucose metabolism.</a> Trans Am Clin Climatol Assoc. 117, 321-339 (2006).</li>
<li>Woollett, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review%3A+Transport+of+maternal+cholesterol+to+the+fetal+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Review: Transport of maternal cholesterol to the fetal circulation.</a> Placenta. 32, Suppl 2 218-221 (2011).</li>
<li>Prenton, M. A., Young, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Umbilical+vein-artery+and+uterine+arterio-venous+plasma+amino+acid+differences+%28in+the+human+subject%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Obstet+Gynaecol+Br+Commonw%22%5BJournal%5D)">Umbilical vein-artery and uterine arterio-venous plasma amino acid differences (in the human subject).</a> J Obstet Gynaecol Br Commonw. 76 (5), 404-411 (1969).</li>
<li>Cetin, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+and+erythrocyte+amino+acids+in+mother+and+fetus%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Neonate%22%5BJournal%5D)">Plasma and erythrocyte amino acids in mother and fetus.</a> Biol Neonate. 60 (2), 83-91 (1991).</li>
<li>Filshie, G. M., Anstey, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+distribution+of+arachidonic+acid+in+plasma+and+tissues+of+patients+near+term+undergoing+elective+or+emergency+Caesarean+section%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Obstet+Gynaecol%22%5BJournal%5D)">The distribution of arachidonic acid in plasma and tissues of patients near term undergoing elective or emergency Caesarean section.</a> Br J Obstet Gynaecol. 85 (2), 119-123 (1978).</li>
<li>Haberey, P. P., Schaefer, A., Nisand, I., Dellenbach, P. The fate and importance of fetal lactate in the human placenta -a new hypothesis. J Perinat Med. 10 (2), 127-129 (1982).</li>
<li>Prendergast, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+production+by+the+human+placenta+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Glucose production by the human placenta in vivo.</a> Placenta. 20 (7), 591-598 (1999).</li>
<li>Metzger, B. E., Rodeck, C., Freinkel, N., Price, J., Young, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplacental+arteriovenous+gradients+for+glucose%2C+insulin%2C+glucagon+and+placental+lactogen+during+normoglycaemia+in+human+pregnancy+at+term%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Transplacental arteriovenous gradients for glucose, insulin, glucagon and placental lactogen during normoglycaemia in human pregnancy at term.</a> Placenta. 6 (4), 347-354 (1985).</li>
<li>Zamudio, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoglycemia+and+the+origin+of+hypoxia-induced+reduction+in+human+fetal+growth%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Hypoglycemia and the origin of hypoxia-induced reduction in human fetal growth.</a> PLoS One. 5 (1), 8551(2010).</li>
<li>Holme, A. M., Roland, M. C., Lorentzen, B., Michelsen, T. M., Henriksen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Placental+glucose+transfer%3A+a+human+in+vivo+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Placental glucose transfer: a human in vivo study.</a> PLoS One. 10 (2), 0117084(2015).</li>
<li>Holme, A. M., Roland, M. C., Henriksen, T., Michelsen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+uteroplacental+release+of+placental+growth+factor+and+soluble+Fms-like+tyrosine+kinase-1+in+normal+and+preeclamptic+pregnancies%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">In vivo uteroplacental release of placental growth factor and soluble Fms-like tyrosine kinase-1 in normal and preeclamptic pregnancies.</a> Am J Obstet Gynecol. 215 (6), 781-782 (2016).</li>
<li>Paasche Roland, M. C., Lorentzen, B., Godang, K., Henriksen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uteroplacental+arterio-venous+difference+in+soluble+VEGFR-1+%28sFlt-1%29%2C+but+not+in+soluble+endoglin+concentrations+in+preeclampsia%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Uteroplacental arterio-venous difference in soluble VEGFR-1 (sFlt-1), but not in soluble endoglin concentrations in preeclampsia.</a> Placenta. 33 (3), 224-226 (2012).</li>
<li>Brar, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uteroplacental+unit+as+a+source+of+elevated+circulating+prorenin+levels+in+normal+pregnancy%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Uteroplacental unit as a source of elevated circulating prorenin levels in normal pregnancy.</a> Am J Obstet Gynecol. 155 (6), 1223-1226 (1986).</li>
<li>Myatt, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategy+for+standardization+of+preeclampsia+research+study+design%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Strategy for standardization of preeclampsia research study design.</a> Hypertension. 63 (6), 1293-1301 (2014).</li>
<li>Kiserud, T., Rasmussen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+repeat+measurements+affect+the+mean+diameter+of+the+umbilical+vein+and+the+ductus+venosus%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">How repeat measurements affect the mean diameter of the umbilical vein and the ductus venosus.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 11 (6), 419-425 (1998).</li>
<li>Burton, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+sample+collection+for+placental+research%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Optimising sample collection for placental research.</a> Placenta. 35 (1), 9-22 (2014).</li>
<li>Illsley, N. P., Wang, Z. Q., Gray, A., Sellers, M. C., Jacobs, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+preparation+of+paired%2C+syncytial%2C+microvillous+and+basal+membranes+from+human+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Simultaneous preparation of paired, syncytial, microvillous and basal membranes from human placenta.</a> Biochim Biophys Acta. 1029 (2), 218-226 (1990).</li>
<li>Staff, A. C., Ranheim, T., Khoury, J., Henriksen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+contents+of+phospholipids%2C+cholesterol%2C+and+lipid+peroxides+in+decidua+basalis+in+women+with+preeclampsia%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Increased contents of phospholipids, cholesterol, and lipid peroxides in decidua basalis in women with preeclampsia.</a> Am J Obstet Gynecol. 180 (3), Pt 1 587-592 (1999).</li>
<li>Catalano, P. M., Thomas, A. J., Avallone, D. A., Amini, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anthropometric+estimation+of+neonatal+body+composition%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Anthropometric estimation of neonatal body composition.</a> Am J Obstet Gynecol. 173 (4), 1176-1181 (1995).</li>
<li>Ellis, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body-composition+assessment+in+infancy%3A+air-displacement+plethysmography+compared+with+a+reference+4-compartment+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Body-composition assessment in infancy: air-displacement plethysmography compared with a reference 4-compartment model.</a> Am J Clin Nutr. 85 (1), 90-95 (2007).</li>
<li>Haugen, G., Kiserud, T., Godfrey, K., Crozier, S., Hanson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+and+umbilical+venous+blood+supply+to+the+liver+in+the+human+fetus+near+term%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Portal and umbilical venous blood supply to the liver in the human fetus near term.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 24 (6), 599-605 (2004).</li>
<li>Acharya, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+validation+of+uterine+artery+volume+blood+flow+measurement+by+Doppler+ultrasonography+in+pregnant+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Experimental validation of uterine artery volume blood flow measurement by Doppler ultrasonography in pregnant sheep.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 29 (4), 401-406 (2007).</li>
<li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamate-glutamine+cycle+and+exchange+in+the+placenta-fetus+unit+during+late+pregnancy%5BTitle%5D)+AND+%22Amino+Acids%22%5BJournal%5D)">Glutamate-glutamine cycle and exchange in the placenta-fetus unit during late pregnancy.</a> Amino Acids. 47 (1), 45-53 (2015).</li>
<li>Tuckey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progesterone+synthesis+by+the+human+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Progesterone synthesis by the human placenta.</a> Placenta. 26 (4), 273-281 (2005).</li>
<li>Simmons, M. A., Meschia, G., Makowski, E. L., Battaglia, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+metabolic+response+to+maternal+starvation%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Fetal metabolic response to maternal starvation.</a> Pediatr Res. 8 (10), 830-836 (1974).</li>
<li>Simmons, M. A., Jones, M. D., Battaglia, F. C., Meschia, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+effect+on+fetal+glucose+utilization%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Insulin effect on fetal glucose utilization.</a> Pediatr Res. 12 (2), 90-92 (1978).</li>
<li>Bujold, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+supporting+that+the+excess+of+the+sVEGFR-1+concentration+in+maternal+plasma+in+preeclampsia+has+a+uterine+origin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Matern+Fetal+Neonatal+Med%22%5BJournal%5D)">Evidence supporting that the excess of the sVEGFR-1 concentration in maternal plasma in preeclampsia has a uterine origin.</a> J Matern Fetal Neonatal Med. 18 (1), 9-16 (2005).</li>
<li>Jansson, T., Aye, I. L., Goberdhan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+emerging+role+of+mTORC1+signaling+in+placental+nutrient-sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">The emerging role of mTORC1 signaling in placental nutrient-sensing.</a> Placenta. 33, Suppl 2 23-29 (2012).</li>
<li>Cetin, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Placental+transport+of+amino+acids+in+normal+and+growth-restricted+pregnancies%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Obstet+Gynecol+Reprod+Biol%22%5BJournal%5D)">Placental transport of amino acids in normal and growth-restricted pregnancies.</a> Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 110, Suppl 1 50-54 (2003).</li>
</ol>

著者は何も開示することはない。

<html>胎盤4血管サンプリング法は、主に3つの目的に関連する。第1に、特定の物質がどのように母体側の胎盤によって取り込まれ、臍帯血および胎児に移されたかを研究するために使用することができます。第2に、この方法は、プロゲステロンの結果によって示されるように、胎盤によって産生され、母体または胎児の循環系に放出される物質の研究に非常に関連している。第3に、急速な成長および組織リモデリングの間にインビボで胎児がどのように老廃物を排除するかを研究することは有用であり得る。 4容器法の重要なステップと物流上の問題 胎盤4-血管サンプリングは、以前に、正常な生理学的妊娠8、10 インビボにおける主要栄養素の胎盤移動を決定するために使用されていますss = &quot;xref&quot;&gt; 12であるが、被験者数は限られている。 4容器サンプリング...

健康、米国の国立研究所によると、胎盤は、人体1、2、3で最もよく理解器官です。進行中の妊娠に非倫理的リスクを課すことなく、インビボでヒト胎盤にアクセスして研究することは困難である。したがって、ヒトにおける胎盤機能の研究は、主に、インビトロおよびエクスビボモデルに基づく。胎盤輸送および代謝のインビボ研究において以前の大部分は、6匹の動物が 4、5で行われています。しかし、胎盤の構造や機能は種間でかなり異なるため、動物からヒトへの結果の外挿は慎重に行わなければなりません。ほんの少しのヒトのインビボ研究で、正常な生理学的条件下での胎盤および胎児の摂取および輸送を調べたら条件、及びどれがいくつかの化合物7、8、9、10、11、12、13の統合された転送を探求してきました。これらの基礎研究は、ヒト胎盤のin vivo研究が実現可能であり、それらがいくつかの目的に役立つことを示している。第1に、主にインビトロ 、 エクスビボおよび動物研究から得られる現在の胎盤機能の概念をヒトの環境で試験し、ヒトの胎盤に対する新規かつより特異的な洞察を提供することができる。第2に、異常な胎児の成長、子癇前症、母体糖尿病、メタボリックシンドロームおよび他の母体の代謝障害に関連する機能不全の胎盤の特性をよりよく特徴付けることができる。第三に、ヒトのインビボ研究は、診断を開発する機会を提供するチック、および胎盤機能の予測ツールである。 この背景で我々は、in vivoでのヒト胎盤機能を調査するための生理学的データの包括的なコレクションを確立することを目指した。計画された帝王切開期間中に、我々は子宮静脈への腹腔内アクセスを利用して、胎盤の母体および胎児側の入来および出血血管から血液サンプルを収集する（4血管サンプリング法）。これらの試料は、栄養素および他の物質の対の動静脈濃度差を計算するために使用される14 。さらに、我々は、超音波によって胎盤の両側のボリューム血流量を測定する。その結果、任意の化合物の胎盤および胎児への取り込みを定量化することができる。また、母体と胎児の循環15、16、17に胎盤によって放出される物質を決定することが可能です。結合するとき胎盤および他の関連組織の分析から、この方法は、同じ母親と胎児の対においてインビボでの胎盤機能の多くの局面を統合する潜在的可能性を有する。

<table><tbody><tr><td><強い>母体の体組成</強い></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>インピーダンススケール</td><td>タニタ</td><td></td><td>または同様の</td></tr><tr><td><強い>超音波測定&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sequoia 512超音波装置</td><td>Acuson</td><td></td>は<td>、カラーとパルス波ドップラー(周波数帯域幅2-6 MHz)</td></tr><tr><td>血液サンプル</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Arerialカニューレ</td><td>BDメディカル</td><td>682245</td><td>または同様の</td></tr><tr><td>20cc偏心ルアーチップシリンジニードルテル</td><td>モ</td>なし<td>SS-20ES</td><td>または同等品 3台必要。</td></tr><tr><td>10 cc エキセントリック ルアーチップシリンジ ニードルテル</td><td>モ</td><td>SS-10ES</td><td>または同等品なし 9 個必要です。</td></tr><tr><td>5 cc 6% ルアーシリンジ ニードルテル</td><td>モ</td><td>SS-05S1</td><td>または同等品</td>なし 2 本必要です。</tr><tr><td>動脈血ガス注射器&nbsp;</td><td>ラジオメーター メディカル</td><td></td><td>または同等品 4 個必要。</td></tr><tr><td>フレキシブルチューブに接続された滅菌翼付き針、21ゲージ</td><td>のGreiner Bio-One</td><td>450081</td><td>(単回使用用).3が必要です。</td></tr><tr><td>バキュテナーチューブ 6 mL EDTA&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>456043</td><td>または類似のもの。サンプルサイトのラベル。10が必要です。</td></tr><tr><td>Vacutainerチューブ5mLLHリチウムヘパリンセパ</td><td>レーターGreiner Bio-One</td><td>456305</td><td>または同様のもの。サンプルサイトのラベル。5が必要です。</td></tr><tr><td>バキュテナーチューブ 6 mL 血清凝固アクチベーター&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>456089</td><td>または類似のもの。サンプルサイトのラベル。5が必要です。</td></tr><tr><td>Vacutainerチューブ3mL&nbsp; 9NC凝固クエン酸ナトリウム3.2%</td><td>Greiner Bio-One</td><td>454334</td><td>または類似のもの。サンプルサイトのラベル。5が必要です。</td></tr><tr><td>極低温バイアル、2.0 mL</td><td>コーニング</td><td>430488</td><td>または類似のもの。サンプル部位、血清/血漿の種類、ID.90が必要なラベル。</td></tr><tr><td>手術室で血液サンプルを輸送するための</td>シリンジ<td></td><td></td>を<td>輸送するためのマーク付きトレイ</td></tr><tr><td>サンプルの穏やかな混合のための</td><td>ロッカー</td><td></td><td></td></tr><tr><td>発泡スチロールボックスの</td><td>氷</td><td></td><td></td></tr> 適切な容器<tr><td>Placentaサンプル</td><td></td><td></td><td></td></tr>Metalの<tr><td>液体窒素</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>トレイ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>発泡スチロールの箱に入った</td><td>氷</td><td></td><td></td></tr><tr><td>目盛り付きスケール</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>金属定規</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1M リン酸緩衝生理食塩水</td><td>シグマ</td><td>D1408</td><td>または類似品。10 Mを希釈して&nbsp;使用1M前</td></tr><tr><td>RNA安定化液</td><td>Sigma</td><td>R0901-500ML&nbsp;</td><td>または類似のもの</td></tr><tr><td>最適な切断温度(OCT)化合物</td><td>vwr</td><td>361603E</td><td>または同様の</td></tr><tr><td>極低温バイアル、2.0mL</td>コー<td>ニング</td><td>430488</td><td>または同様のもの。サンプルサイトのラベル。コンテンツとIDが必要です。</td></tr><tr><td>遠心分離管、円錐形底部50mL</td><td>Greiner Bio-One</td><td>227,285</td><td>または類似品。「RNA later」の標識、サンプル部位、ID.2が必要です。</td></tr><tr><td>適切な容器に入った</td><td>液体窒素</td><td></td><td></td></tr><tr><td><ストロング>胎児の体組成</ストロング></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>キャリブレーションスケール</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>測定テープ</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ヒト胎盤生理学の統合研究への4容器サンプリングアプローチ<em&gt;インビボ</em

The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

人間の胎盤はまだ子宮内にある間、研究のために非常にアクセスすることができません。従って、インビボでのヒト胎盤生理学の現在の理解は、胎盤の解剖学的構造、血行力学および妊娠期間における種間の多様性にもかかわらず、主に動物研究に基づいている。ヒト胎盤研究の大部分は、 ex vivo灌流研究またはin vitro栄養膜研究である。 インビトロ研究および動物モデルは必須であるが、in vivoでのヒト胎盤へのそのような研究からの結果の外挿は不確実である。我々は、期間中にヒト胎盤生理学をインビボで研究し、その方法の詳細なプロトコールを提示することを目指した。計画された帝王切開期間中に子宮切開の直前に子宮静脈への腹腔内アクセスを利用して、我々は胎盤の母体および胎児側の入来および出血血管から血液サンプルを収集する。コンを組み合わせるとき血漿中の血中濃度を測定することにより、胎盤および胎児への取り込みおよび放出を定量化することができる。さらに、同じ母親 - 胎児対からの胎盤組織試料は、トランスポーター密度および活性ならびに胎盤機能の他の局面のインビボでの測定を提供することができる。この4容器サンプリング法のこの統合的な使用により、正常妊娠および病理学的妊娠の両方において、インビボでの胎盤栄養素移動および代謝の現在の概念のいくつかを試験することができる。さらに、この方法は、胎盤機能不全のバイオマーカーの探索に重要な貢献であり得る、胎盤によって分泌される物質の母体循環への同定を可能にする。

4血管サンプリング法は、臨床診療において適用可能であり、我々は209母/幼児対からの血液サンプルを首尾よく得た。これらのうち128件では、体血流量を測定することもできました。 70匹の母親と胎児のペアで、完全な4脈管サンプリングと母体と胎児の両方の血管の良好な流量測定が得られた（ 図3 ）。さらに、私たちは今までに30人の子癇前症患者から血液および胎盤サンプルを収集しました。我々は以前の方法14、15、16の2つのアプリケーションを実証し、栄養素のヒト胎盤転送だけでなく、血管作動性要因の胎盤リリースに関する記事を公開しています。 4容器法を用いて胎盤移植を研究する方法の例...

我々は、期間中にインビボでヒト胎盤生理学を研究するための詳細な方法を提示する。本方法は、胎盤の母体側および胎児側の入ってくる血管および出る血管から採取した血液採取と、体積血流および胎盤組織サンプリングの超音波測定とを組み合わせる。

The human placenta is highly inaccessible for research while still in utero. The current understanding of human placental physiology in vivo is therefore ...

この手順の全体的な目的は、いくつかの手法を用いてヒト胎盤の機能をin vivoで研究することであり、これによりヒト胎児胎盤生理学に関する包括的かつ統合的なデータの収集を確実にすることです。本手法は、母体と胎児の相互作用における胎盤の役割など、ヒト胎盤生理学に関する重要な疑問への回答に役立ちます。この技術の主な利点は、ヒトにおける胎盤輸送、取り込み、および分泌に関する現在の概念をin vivoで検証することが可能になる点にあります。実験的研究をヒトに外挿することは、胎盤の解剖学的構造、妊娠期間、および妊娠合併症における動物とヒトの大きな相違により困難です。本手法は、胎盤の代謝や栄養素の輸送に関する知見を提供できるだけでなく、正常な妊娠および、子癇前症などの合併症を伴う妊娠における化合物の胎盤からの放出の研究にも適用可能です。本手法の実施には、複数の専門医、看護師、および研究者による高度に調整された連携が必要です。成功の鍵は、常に母親と赤ちゃんの状態に注意を払いながら、厳格な計画を立てることにあります。このチャートは、サンプルの採取に必要なタイムラインと人員を示しています。サンプリングを補助する各担当者は、それぞれ異なる色で表示されています。本プロトコルは、ヒト胎盤の生理学的機能を研究するための3つの手法を組み合わせて使用します。まず、超音波を用いて子宮動脈および臍帯静脈の血流量を測定します。次に、帝王切開時に、ヒト胎盤の母体側および胎児側の流入および流出血管から血液サンプルを採取します。分析のために3つ目の胎盤組織サンプルを採取します。まず、大動脈および大静脈の圧迫を避けるため、女性を半仰臥位にし、関心領域と反対側にわずかに側方に傾けてください。胎児が静止している間に、胎児腹部の正中または斜切断面で臍静脈を可視化し、腹腔内臍静脈の分枝が見られる前の直線部分で、血管の内径を測定します。通常のBモードを用い、血管を垂直な超音波照射角度で視覚化して直径を測定し、拍動による直径変化の影響を最小限にするため、後の測定に使用する最適なフレームを数枚保存します。この測定を5回から10回繰り返します。同じ部位でプローブを調整し、ドップラー超音波を用いて、時間平均最大血流速度（TAMX）を測定するために、超音波照射角度をできるだけ小さく設定します。3〜5秒間の速度を取得します。次に、ドップラー超音波を用いて、子宮動脈が内腸骨動脈から分枝した直後に外腸骨動脈と交差する部位を可視化します。この部位でプローブを調整して低入射角とし、TAMXを測定します。3回の心周期の平均速度を速度として取得します。血管を遠位に向かって追跡し、TAMX測定部位にできるだけ近い位置で、直径測定に適した角度を確保します。子宮動脈において血流容量を測定することは困難です。なぜなら、TAMXを測定しているのと同じ部位で垂直な角度を得ることは難しいためです。2つの測定部位の間で分岐している血管がある場合、直径の測定値から除外される可能性があります。手術開始前に4本の血管から採血を行うため、溶液、チューブ、および器材を準備してください。その後、採血を補助するすべてのスタッフにブリーフィングを行い、器材を渡してください。標準的な末梢静脈路に加え、橈骨動脈に動脈ラインを留置します。サンプルの採取が容易であるため、前肘静脈が好ましいです。次に、腹腔を開いた後、リトラクターを用いて腹壁を挙上し、子宮の前外側に位置する子宮静脈の主枝を露出させます。可能な限り胎盤と同じ側にある子宮静脈の分枝を特定するか、胎盤の最も顕著な静脈叢が子宮正中にある場合に特定します。適切な子宮静脈が特定されたら、介助者に橈骨動脈および肘正中皮静脈から採血するように指示します。同時に、30度の角度で血液ガス分析用シリンジに取り付けたバタフライ針を子宮静脈に挿入し、緩やかな吸引により血液を採取します。バタフライ針の静脈内留置部位を慎重に固定しながら、助手に依頼して、血液ガス採取済みのシリンジを20 mLシリンジに交換させます。直後に10 mLシリンジに交換します。橈動脈または肘正中静脈から、最初の5 mLを廃棄し、その後、血液ガス分析用にヘパリン処理済みシリンジで3 mLを吸引します。その後、各部位から30 millilitersを吸引します。児が誕生した際、まず血液ガス分析用のシリンジを用い、臍帯をクランプせず、また胎盤を娩出させない状態で、直ちに臍動脈から血液を吸引します。可能であれば、その後、10 milliliterのシリンジで3回吸引してください。動脈検体が確保されたら、臍帯静脈からサンプリングを行う前に臍帯をクランプして切断し、胎盤を元の位置に保持した状態で全ての臍帯検体を採取します。4血管法では、5つの異なる部位から同時に検体を迅速に扱うとともに、調整された血液サンプリングが必要です。特に臍帯動脈は、収縮、溶血、および凝固が起こりやすいため注意してください。腹部の閉鎖を開始する前に、子宮静脈のサンプリング部位の最終確認を行います。すべての血液ガス用シリンジを氷上に置き、血液ガス分析装置を用いて5分以内にサンプルを分析してください。血液サンプルを直ちにバキュテイナーに転送し、プラズマチューブを1〜2分間揺らした後、氷上に置きます。血漿サンプルは、可能な限り速やかに、30分以内に2,500 ×g、6 °Cで20分間遠心分離します。その後、上清を2 mLクライオチューブに注意深く分注します。血液サンプル中の目的物質を分析し、テキストプロトコルに従って胎盤移行率の計算を行います。胎盤が娩出された後、速やかに氷で冷やした解剖トレイの上に平らに置いてください。組織の重量、最大径、および最大径から90度方向の径を記録します。その後、肉眼的な病変の有無と臍帯内の血管数を記録します。胎盤の母体面を上に向け、胎盤の各象限にランダムに4〜5箇所のサンプリング部位を特定します。ハサミを使用して脱落膜を取り除き、母体面から3〜5 mmを切り出します。次に、各部位から1〜2 cm³の絨毛組織を採取します。冷やした1 M PBSを50 mL使用して、回収した組織を穏やかに洗浄します。次に、各サンプリング部位から組織を数個の断片に分け、分注します。0.1〜0.5 cm³の組織サンプルを5本のクライオチューブに分注し、液体窒素で急速凍結させます。0.1〜0.2 cm³ サイズの小片を、あらかじめ用意した 25 mL の RNA 安定化溶液入りのチューブに加えます。組織学的研究の場合は、0.5 cm³ の小片を 0.5 mL の OCT が入った 5 本のクライオチューブに加え、OCT を満たしてからチューブの内容物を混合します。サンプルを -80 °C で凍結し、解析まで保存します。4血管サンプリング法を用いて、209組の母子ペアから血液サンプルを正常に採取しました。そのうち128例で血流体積を測定しました。母体および胎児の両方の血管において、完全な4血管サンプリングおよび良好な品質の血流測定が得られたのは70組の母子ペアでした。ここで示されているグルコースを例として、胎盤輸送の研究に4血管法が用いられました。胎盤の両側で有意な動静脈グルコース差が認められ、in vivoでの子宮胎盤取り込みが0.29 millimoles per liter、胎児取り込みが0.54 millimoles per literであることが実証されました。臍帯静脈血流の中央値は196.2 milliliters per minuteと測定されました。フィックの原理（Fick's Principle）を用いて算出した結果、臍帯循環からの胎児グルコース取り込み量の中央値は 0.10 millimoles per minute でした。また、4血管法を用いて、代謝経路の燃料として、および胎児・胎盤間でのアミノ酸相互変換において重要であるグルタミン酸の胎盤取り込みについて検討しました。その結果、臍帯循環と母体循環の両方からグルタミン酸の胎盤取り込みが観察されました。正期産時の胎盤によるプロゲステロンのin vivo放出量も測定し、母体血流への有意なプロゲステロン放出が認められました。これにより、胎盤四血管サンプリング法が胎盤から放出される物質の検出に利用できることが実証されました。本手順を行う際は、正確な測定値を得るために、この種の超音波検査に精通した胎児医学の専門家が血流体積測定を行うことが重要であるという点を強調しておきます。本手順の後、採取した血液サンプルを分析することで、栄養素、代謝物、シグナル分子、エクソソーム、廃棄化合物、薬剤、または毒素など、目的物質の胎盤通過、取り込み、または放出について研究することが可能です。さらに、胎盤サンプルの解析により、輸送調節や胎盤代謝に関する追加の疑問に答えることができます。総合的に、本プロトコルは、血流量測定、血液および組織サンプルの体系的な採取をどのように行えば、ヒト胎盤生理学を研究するための完全なin vivoモデルを得られるかを示しています。このビデオを視聴することで、産婦人科医は、帝王切開時にヒト胎盤の両側から動静脈血サンプルを安全に採取する方法を十分に理解できるはずです。

the-4-vessel-sampling-approach-to-integrative-studies-human-placental

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

我々は、開発中の主要な造血器官として胎盤を同定した。我々はその造血幹細胞（HSC）が生成され、ユニークな微環境のニッチの胎盤で展開されている両方とも発見。ここで、我々はマウス胎盤における造血幹細胞の分離と可視化に必要な実験手法を説明します。...

プラセンタから造血幹細胞の単離と解析

使用プラ​​センタアクロス異物およびナノ材料の輸送速度の決定<em&gt; ex vivoで</em&gt;ヒト胎盤灌流モデル

初代ヒト胎盤（絨毛）及び脱落膜の器官培養を確立するための簡単​​な方法が記載されています。絨毛および脱落膜器官培養は、人間の母体胎児の界面での病因を研究するための貴重なツールです。通性細胞内細菌リステリア菌による感染が実証されています。...

母体・胎児のインターフェイスでの感染症を研究するためにヒト胎盤および脱落膜器官培養

本研究は、リバーシブルの組織免疫染色、3 D レンダリングやひと胎盤絨毛サンプル 1-2...

三次元レンダリングとカルビンディン抗体、解析人間の胎盤絨毛血管のネットワークを明らかにしました。

安全性と胎盤をターゲットとした薬剤投与の有効性を評価する 3...

3 つの補完的な手法を使用して胎盤をターゲットとした薬剤投与の安全性の総合評価

げっ歯類胎盤の Ex 生体灌流

これは、一定のフロー条件下で胎盤外植片を培養するためのプロトコルです。このアプローチは、動的な生理学的環境の複製を可能にすることで、従来の静的な絨毛培養システムを強化します。...

Ex Vivo(エクス・ビボ)胎盤外植体フロー培養 - 子宮内の動的条件の模倣

このプロトコルは、ウイルス感染の研究のために空気-液体界面で培養したヒト胎盤組織エクスプラントの調製について説明しています。...

エクスビブ 母体と胎児の界面を通じたウイルス伝播の研究のためのヒト胎盤外植培養

胃バイパスラットモデルを用いて多数の研究が最近ルー-en-Y法胃バイパス操作の基礎となる生理学的メカニズムを明らかにするために行われている。この記事では、この実験的なツールの利点と限界を理解することが私たちの公開胃バイパスラットモデルの技術的および実験の詳細を示し、議論することを目指しています。...

ラットにおけるルー-en-Y法胃バイパス手術

ヒト腫瘍異種移植片は、血管新生およびインビボでの増殖期の間に、マウス起源の細胞によって浸潤されています。下流の分析の間に、これらの混入細胞によって引き起こされるバイアスを回避するために、我々は、磁気細胞選別により、すべてのマウス細胞の包括的枯渇を可能にする方法を開発しました。...

ヒト腫瘍異種移植片からマウス細胞の枯渇は大幅に標的細胞の下流分析を向上させます

学ぶヒト胎盤生理学の統合的研究法。4容器サンプリングと超音波血流測定を組み合わせ、母体・胎児両側の血管から血液を採取し、栄養輸送や代謝をインビボで解析する技術です。

ヒト胎盤生理学の統合研究への4容器サンプリングアプローチ

さらに動画を探す