Name: 真空の血のコレクション システムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: 学ぶ 真空採血システムを用いた非麻酔ラットの尾静脈からの反復採血法。初心者でも90%の成功率を達成し、血液汚染リスクを低減しながら十分な採血量を確保できる簡易技術です。

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すべてのプロシージャは、動物ケア委員会の華中大学の科学と技術 (武漢、中国) に同済医学大学評議会によって承認されました。原稿が到着に従って準備された (動物資源研究領域: In Vivo実験のレポート) のガイドライン6。
1. 畜産
<ol><li>Sprague-dawley (SD) ラットを使用 (n = 20、男性 10 例、8 週齢、261 に 291 g の重量を量ることを意味 = 272.85 ±9.07 g) 実験動物センターの華中科学技術大学から、ケアとの使用のためのガイドに従いラットを維持実験動物、米国国立衛生研究所 (NIH 文書 No.85-23, 1996 改訂) 刊</li>
	<li>ハウス食品や飲料水への無料アクセスと標準的な条件の下で。保つ木シェービング 530 cm2ケージでラットは寝具します。各ケージに 2 匹のラットを家します。部屋の環境 (マイクロ分離または換気ケージング) にすべてのケージを開けてください。</li>
	<li>実験的プロトコルに携わるスタッフは定期的にラットを扱うことを確認します。</li>
	<li>部屋の温度 21 ° C と 23 ° c. の間を維持します。通常塩の食事料金を与える (0.3 %nacl) 研究中。</li>
</ol>2. 採血手順
注: 真空の血のコレクション システム二重先の尖った針 [22 G (0.7 mm × 25 mm)] のプラスチック製のホルダーとゴム栓 (図 1) と真空管 (2 mL) のシリーズで構成されます。
<ol><li>プラスチック製の拘束ホルダーでラットを置き、目に見える汚れや糞便を除去する (20-30 ° C) ぬるま湯で尻尾を洗います。アシスタントは、拡張の位置に尻尾を保持している、70% エタノール、尾を拭き、オフに静脈にガーゼで拭き取ります。</li>
	<li>22 G 蝶針の先端を挿入位置外側尾静脈 (5 mm 程度) のいずれか (図 2) 約 20 ° の角度で尾の先端から約 2-3 cm。真空の血のコレクションの管 (図 3) に蝶針のゴムの端を挿入することによって真空のコレクションの管に血液を収集します。 注: 最大コレクション血液量は 1.2 mL7です。</li>
	<li>血のコレクションの後針を除去し、血液の流れを停止する 15 30 s のガーゼで穿刺部位を軽く押さえます。プラスチック製の拘束ホルダーからラットをリリースし、そのケージにラットを返します。</li>
	<li>血血しょうを収集するために抗凝固剤として EDTA を含むチューブを使用します。優しく血液抗凝固剤を混合し、氷の上、サンプルに縦置きに数回チューブを反転します。</li>
	<li>血漿または血清を分離する 10 分間 2,000 x g で冷却遠心分離機の血液サンプル コレクション チューブを遠心します。</li>
	<li>血漿/血清、赤と白の血液細胞層を邪魔しないように世話を抽出します。血清を収集するには、抗凝固剤なしのチューブを使用します。サンプルの両方のタイプは、すぐに使用または 1 年間-80 ° C で保存できます。 注: 成功した血のコレクションは、毎回 1.2 mL の血液を得ることとして定義されました。最大穿刺時間が設定された 3 つの試験に第 3 穿刺後総血液量は 1.2 mL より低いそれを定義した場合失敗した血のコレクションとして。サンプリング期間は、尾静脈穿刺から採血後蝶針の除去を開始します。</li>
	<li>
72 週間以内に 2 回血を収集します。
	<ol>
<li>テストし、この手法の有効性を確認この血液コレクション プロトコルを実行する前に 2 h の 2 つの医学生 (初心者) を訓練します。20 ラットを使用し、10 ラット 2 経験豊富な仲間 (実験群) と 2 の医学生 (初心者グループ) によって 10 のラットから採血します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 統計解析
<ol><li>平均値 ± 標準偏差としてデータを表現し、SPSS 統計 17 で分析します。Α 値 0.05 選ばれた、したがって p < 0.05 は、統計的に有意と考えられていた。</li>
</ol>

<ol><li>Brown, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+from+the+tail+of+a+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Blood collection from the tail of a rat.</a> Lab Anim (NY). 35 (8), 24-25 (2006).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+vessels+of+the+rat+tail%3A+a+histological+re-examination+with+respect+to+blood+vessel+puncture+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Blood vessels of the rat tail: a histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods.</a> Lab Anim. 37 (2), 121-125 (2003).</li>
<li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sampling+blood+from+the+lateral+tail+vein+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Sampling blood from the lateral tail vein of the rat.</a> J. Vis. Exp. (99), (2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WHO+Guidelines+on+Drawing+Blood%3A+Best+Practices+in+Phlebotomy+WHO+Guidelines+Approved+by+the+Guidelines+Review+Committee%22">WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee</a>. , (2010).</li>
<li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+ARRIVE-ing+at+a+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Anim. 44 (4), 377-378 (2010).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+device+for+collecting+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">A new device for collecting cord blood.</a> Obstet Gynecol. 86 (5), 850-852 (1995).</li>
<li>Reynolds, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+a+new+device+for+blood+sampling+in+cats+with+a+vacuum+tube+collection+system+-+plasma+biochemistry%2C+haematology+and+practical+usage+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Feline+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Comparison of a new device for blood sampling in cats with a vacuum tube collection system - plasma biochemistry, haematology and practical usage assessment.</a> J Feline Med Surg. 9 (5), 382-386 (2007).</li>
<li>Wiwanitkit, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+blood+specimens+from+plain+and+gel+vacuum+blood+collection+tubes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Assoc+Thai%22%5BJournal%5D)">Comparison of blood specimens from plain and gel vacuum blood collection tubes.</a> J Med Assoc Thai. 84 (5), 723-726 (2001).</li>
<li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Acad+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Acad Emerg Med. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li>
</ol>

著者がある何も開示するには

本報告では、ラットに学ぶ簡単血液収集方法について説明します。私たちの結果は、このメソッドが繰り返しラットから大量の血液を収集するために可能であります。また、短期的な学習曲線を持つこのメソッドを容易に習得できます。この手順は、非麻酔のラットにおいて実行することができます、だけ動物に最小限のストレスの原因します。
血液は、ラットのさまざまな場所から収集できます。尾静脈血サンプリング4の真向かいにあります。しかし、それは常にラットの薄いと低血流尾静脈から十分な血液量を得ることは容易。真空の血のコレクションのシステムは、日常臨床で患者から血液サンプルを収集するため通常用いられます。この真空の血のコレクション システムは長い時間8,9,10の患者および研究の動物の使用されています。このシステムは、シリコン コーティングされたインナー チューブ壁と蝶針、真空採血管で構成されます。真空負圧の原理に基づいていたでき、血液汚染と溶血11のチャンスを減らす効果もある血を収集、リスクなしの連続的に描画できます。カテーテル内の血液サンプルの体積は約 0.3 mL です。尾静脈から針を撤回した後真空による収集の真空管にカテーテルでブロックされて血液が流れます。このメソッドも小さい穿刺針の使用で 100 g 以下の重量を量るラットから採血のため可能です。
この血の収集方法には、いくつかの利点があります。この手順だけのラットに最小限の損傷の原因、血のコレクションには、麻酔薬を使用せず実行できる従って血液サンプルに及ぼすストレス応答と麻酔薬の影響を避けることができます。我々 の観察はラットはプロシージャの間にプラスチック製の拘束ホルダーで静かだったこれらの実験中に死亡がなかったことを示した。第二に、繰り返し採血ごとに 1 つまたは 2 日間は、様々 な研究目的のため適切なボリュームとは、血液の頻繁にサンプリングができます。最後に、このメソッドは、簡単に学ぶことは、簡単に習得された初心者によるショート (2 h) 学習期間の後と同様の成功率と本報告では実験と初心者のためのグループ間の穿刺時間によって示されるように。以前のレポートは、李らはラット4の外側尾静脈からの血液をサンプリングする同様の方法を示した。本手法は、李らによって報告されたより簡単4我々 は直接尾静脈とチューブのもう一方の端に穿刺針を挿入に直結真空管採血、余分な注射器の使用と血の手動の吸引との必要なしの ' ミルクing' 静脈血流を促進します。このクローズド システム採血血液汚染の可能性が減ります。プラスチック拘束ホルダーの使用はまたラットにストレスを軽減、尾の固定が容易になります。
次の 2 つの手順は、このメソッドの成功のアプリケーションのため重要です。1) 延長尾と尾輪の動きを避けるため2) ゆっくり静脈穿刺を避けるために、穿刺針を静脈において 20 ° の角度で静脈を穿刺します。
結論としては、ラットで採用された真空採血コレクション メソッドは、実行可能な安全で簡単に実践です。このメソッドは、非麻酔のラットから得られた十分な血液量と血の頻繁なサンプリングをできます。

ラットから採血は、さまざまな実験的研究に必要です。ラットから採血の技術、心、レトロ軌道神経叢、頚静脈、伏在静脈、尻尾の血管、頚動脈、腹部大動脈と上大静脈の穿刺があります。麻酔1,2(大伏在静脈と尻尾の血管穿刺) を除くほとんどのテクニックが必要です。ラットの尾の静脈は定期的に採血、血管注射の穴を開けます。暖かい水でテールを治療後血管は拡張そして操作に適したラットが麻酔3時でさえ。
実験小動物2の血液サンプルを取得する新しい、改良された技術の開発、にもかかわらず常に小動物からサンプリングするときに十分な血液を得やすくないです。ラットの尾静脈血サンプリング4の真向かいにあります。ただし、尾静脈が薄く、従ってそれを穴をあけることは難しい、その低血流による十分な血液を得るため長い時間がかかるでしょう。採血吸引チューブ システムを介して、日常臨床で典型的な方法です。このクローズド システムにより採血の血への直接暴露のリスクを低減し、単一の穿刺5から複数のサンプルを容易にしました。本報告では、吸引チューブを用いた非麻酔下ラットにおける単純な尾静脈採血法について説明します。この方法は簡単にマスターし、大量のラットにおける繰り返し血液を取得する使用できます。

<table><tbody><tr><td>ダブルポイント針</td><td>上海康農医療機器有限公司、中国</td><td>22G&nbsp;</td><td>(0.7倍;25mm)</td></tr><tr><td>真空管</td><td>武漢Zhi Yuan、医療科学技術有限公司、中国</td><td>2 ml</td><td></td></tr><tr><td>ラット拘束ホルダー&nbsp;</td><td>Shanghai Kang Nong Medical Instrument Co., LTD, China</td><td>250g ラット ホーダー モデル</td><td></td></tr><tr><td>ラット</td><td></td><td></td>のための通常の塩食 ラットは、統計分析のための研究 SPSS ソフトウェア<td>を通じて通常の塩食 (0.3% NaCl) を受け取り</td></tr>ました <tr><td></td><td>SPSS Inc,&nbsp;シカゴ;アメリカ&nbsp;</td><td>バージョン17.0.&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

真空の血のコレクション システムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

血液は、サンプリング場所の数のラットから収集できます。例えば、尾静脈採血の真向かいにあります。ただし、尾静脈薄いは穿刺するは難しいことがあります。さらに、尾静脈低血流には、十分な血液を取得するサンプリング間隔の長い時間が必要です。本報告では、単純な血液サンプリング法、真空採血の収集方法、通常非麻酔のラットに使用ここで、患者から血液サンプルを取得するために使用について説明します。22 G 蝶針の先端が約 20 °、および血の角度で尻尾の先端から約 2-3 cm は va に蝶針のゴムの端を挿入して真空チューブで収集された外側尾静脈のいずれかに挿入されました。cuum 採血管。現在の実験では、実験群は 95% と 90% 初心者グループの成功率であったことを示します。成功率穿刺時間が 2 つのグループ間で類似し。サンプリング期間であった初心者グループと比較実験群で有意に短かった。結論としては、この真空採血方法非麻酔下ラットの尾静脈からの連続採血が可能かつ簡単に学ぶこと、他の信頼性の高い代替従来使用血液サンプリング技術となる可能性があります。ラット。

サンプリング期間、体の質量、および 2 つのグループの採血量 血は、各グループで 2 週間以内に 2 回 10 ラット (男性 5) から採取しました。両方のグループの平均体重が似ていた (272.00 ±9.66 g と 273.70 ±8.87 g)。サンプリング時間は初心者グループと比較実験群で有意に短かった (3.28 ±0.83 分、p 対 2.77 ±0.53 分 < 0.05) (表 1)。
成功率し、2 つのグループの回の穿刺 成功率は 95% (19/20) 実験群と 90% (18/20) 初心者のためのグループ (p > 0.05)。穿刺時間は大幅に異なる 2 つのグループの間なかった (1.85 ± 0.75 分、p 対 1.50 ±0.61 分 > 0.05) (表 2)。この方法は簡単に学ぶこと、そしてトレーニング 2 時間後技術を習得できることが示唆されました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig1.jpg"> 図 1:2 mL 真空採血管 (左); 22 G 蝶針 (センター) プラスチック製の拘束ホルダー (右).<a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig2.jpg"> 図 2:位置に外側尾静脈 (5 mm 程度) に針の先端が挿入されたおおよそ 20 ° の角度で尾の先端から約 2-3 cm 。<a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig3.jpg"> 図 3:成功した穿刺します。<a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="5">実験群</td>
			<td></td>
			<td colspan="5">初心者のためのグループ</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>性別</td>
			<td>体重 (g)</td>
			<td>収集した血液量 (mL)</td>
			<td>サンプリング時間 (分)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>性別</td>
			<td>体重 (g)</td>
			<td>収集した血液量 (mL)</td>
			<td>サンプリング時間 (分)</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
			<td></td>
			<td>B1 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B1 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.3</td>
			<td></td>
			<td>B2 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.73</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.37</td>
			<td></td>
			<td>B2 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.47</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>267</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B3 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.52</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>267</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.88</td>
			<td></td>
			<td>B3 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.41</td>
			<td></td>
			<td>B4 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.32</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B4 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.62</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-1</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.61</td>
			<td></td>
			<td>B5 1</td>
			<td>男性</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.48</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B5 2</td>
			<td>男性</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.33</td>
			<td></td>
			<td>B6 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>274</td>
			<td>0.9</td>
			<td>4.87</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.03</td>
			<td></td>
			<td>B6 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>274</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.37</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.82</td>
			<td></td>
			<td>B7 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.93</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B7 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.82</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.93</td>
			<td></td>
			<td>B8-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.07</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.05</td>
			<td></td>
			<td>B8 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.67</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-1</td>
			<td>女性</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B9 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.38</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.17</td>
			<td></td>
			<td>B9-2</td>
			<td>女性</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.57</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.82</td>
			<td></td>
			<td>B10 1</td>
			<td>女性</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.25</td>
			<td></td>
			<td>B10 2</td>
			<td>女性</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.28</td>
		</tr>
<tr>
<td>平均</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2.77</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3.28</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">最初の血のコレクションの実験群ラットの en-1: シリアル番号。</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">2 回目の採血の実験群ラットの en-2: シリアル番号。</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">最初の血のコレクションの初心者グループのラットの Bn-1: シリアル番号。</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">2 回目の採血の初心者グループのラットの Bn-2: シリアル番号。</td>
		</tr>
</tbody></table>表 1: 血の結果は実験グループと初心者グループに収集されます。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>血のコレクションの時間</td>
			<td>平均穿刺回</td>
			<td>時間あける</td>
			<td>2 回を穿刺します。</td>
			<td>3 回を穿刺します。</td>
			<td>失敗しました</td>
			<td>成功率</td>
		</tr>
<tr>
<td>実験群</td>
			<td>20</td>
			<td>1.50 ±0.61</td>
			<td>11</td>
			<td>8</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>95%</td>
		</tr>
<tr>
<td>初心者のためのグループ</td>
			<td>20</td>
			<td>1.85 ± 0.75</td>
			<td>7</td>
			<td>9</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>90%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">1 つの時間穿刺: ラット最初の穿刺後の成功の血のコレクションの数</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">穿刺: 成功した血のコレクションに 2 番目の穿刺後ラットの数の 2 倍します。</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">3 回穿刺: ラット 3 穿刺後の成功の血のコレクションの数</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">失敗しました: ラットの数 3 穿刺後採血に失敗しました</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>表 2 穿刺時間と実験群・初心者グループの成功率の比較。

ここでは、吸引チューブを用いた非麻酔下ラットの単純な尾静脈採血法について述べる。このメソッドは、血液への直接暴露のリスクを低減し、簡単に単一の穿刺から複数のサンプルを取ってします。

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

本報告では、真空採血管システムを用いた非麻酔ラットにおける単回尾静脈採血法について述べる。まず、ラットを拘束し、尾部を洗浄して70% ethanolで拭き取る。次に、拡張した外側尾静脈のいずれかにバタフライ針の先端を挿入し、バタフライ針のゴム端にある真空採血管に血液を採取する。最後に針を抜き、穿刺部位の止血を行います。このサンプリング手法の特筆すべき点は、真空採血管システムを使用することです。これにより、血液への直接的な曝露リスクを軽減し、一度の静脈穿刺で複数のサンプルを容易に採取することが可能になります。本手順は、当研究室のメンバーであるYanyang ChengとZhong Pengの2名によって実演します。まず、プラスチックホルダー、ゴム栓付き真空チューブ、およびダブルポイントニードルを準備します。これらの器具を滅菌済みの表面に配置してください。次に、ラットをプラスチック製の拘束ホルダーに入れ、前肢と後肢が快適な位置にあり、呼吸が妨げられていないことを確認します。その後、ホルダーを安定した作業台の上に置きます。尾はカウンターの端から外に伸ばして垂らしておきます。血液サンプルを採取するために、尾を20～30°Cの温水で洗い、目に見える汚れを取り除きます。70% ethanolで拭き、尾の血管を拡張させます。その後、採血のために、動脈の外側にある左右どちらかの尾静脈を確認します。尾の末端に近い部分の静脈から採取します。サンプリング中に尾をまっすぐに保つため、尾の先端付近を優しく、かつしっかりと掴みます。次に、22gのバタフライ針の先端を、尾の先端から約2～3 cm離れた位置にある側尾静脈のいずれかに、約20度の角度で約5 mm挿入します。静脈に穿刺されると、血液が針の中に流れ込みます。そこで、すぐにバタフライ針のゴム端を真空採血管に挿入します。血液が真空採血管へとゆっくりと流れ込みます。計画される採血量は、1回あたり1.2 mLです。十分なサンプル量が採取されたら、静脈から針を抜き、出血を止めるために穿刺部位を短時間圧迫してください。血漿を採取する場合は、抗凝固剤としてEDTAを含むチューブを使用してください。チューブを数回静かに転倒混和し、血液を混合および脱凝固させます。その後、サンプルを氷上に垂直に保持します。全血サンプル採取チューブを冷蔵遠心機で10分間遠心分離し、血漿と血清を分離します。赤血球および白血球の層を乱さないように注意しながら、血漿を溶出させます。血清を採取する場合は、抗凝固剤を含まないチューブを使用してください。どちらの試料も、すぐに使用するか、-80 degrees Celsius 以下で最長1年間保存することが可能です。本手法の実現可能性を試験および検証するため、2名の医学生に2時間のトレーニングを行い、初心者グループとしてこの採血プロトコルを実施させた。また、経験豊富なフェロー2名を実験グループとした。その結果、成功率は実験グループで95%、初心者グループで90%であった。成功率および穿刺時間は、2つのグループ間で同様でした。サンプリング時間は、初心者グループと比較して実験グループで有意に短縮されました。このサンプリング手法は、ラットからの反復的な採血において簡便かつ効率的であり、毎回十分な血液量を採取することが可能です。さらに、この手法は習得が容易であり、非麻酔ラットで実施可能であるため、動物へのストレスを最小限に抑えることができます。真空採血法を採用することで、真空と圧力によって血液に接触するリスクなく連続的な採血が可能となり、汚染や溶血の可能性も低減されます。

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脳波記録中のラットの側尾静脈からの脳脊髄液および血液のサンプリング

ここでは、麻酔なしでラットの迅速、安全、反復採血を可能にする効果的なラット制限法と鎖骨下静脈穿刺法の組み合わせを紹介します。...

意識のあるラットにおける鎖骨下静脈採血

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ヒト膵臓の収集プロトコル

バイオマーカーは、病気や健康の直接測定された生体指標である。人口や社会科学では、バイオマーカーは、交通機関を得ることが容易であり、分析する必要があります。乾燥した血液スポット（DBS）コレクションは、この必要性を満たし、高い応答率を持つフィールドで収集し、バイオマーカーの様々な分析することができる。...

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人間頸管サンプルの採取、単離、およびフローサイトメトリー分析

学ぶ 真空採血システムを用いた非麻酔ラットの尾静脈からの反復採血法。初心者でも90%の成功率を達成し、血液汚染リスクを低減しながら十分な採血量を確保できる簡易技術です。

真空の血のコレクションシステムと非麻酔下ラットの尾静脈からの採血を繰り返す

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