Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA <em>In Situ</em> Hybridization

Xiao Xu; Yinwei You; Long Zhang

doi:10.3791/55924

Locust AntennaeにおけるRNAによる嗅覚受容体遺伝子の局在現場でハイブリダイゼーション

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Neuroscience

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Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

Locust AntennaeにおけるRNAによる嗅覚受容体遺伝子の局在現場でハイブリダイゼーション

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July 13, 2017

DOI: 10.3791/55924-v

Xiao Xu¹, Yinwei You^1,2, Long Zhang¹

¹Department of Entomology,China Agricultural University, ²Bio-tech Research Center,Shandong Academy of Agricultural Sciences

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

この論文では、ジゴキシゲニン（DIG）標識またはビオチン標識プローブを用いた昆虫アンテナにおいて、特に低レベル発現匂い受容体（OR）遺伝子ならびに他の遺伝子の詳細かつ非常に有効なRNA in situハイブリダイゼーションプロトコルについて記載している。

この手順の全体的な目標は、ジゴキシゲニン標識プローブまたはビオチン標識プローブを使用して、昆虫のアンテナ内の低レベルで発現する匂い受容体遺伝子およびその他の遺伝子を局在化することです。この手順を開始するには、活動的で触角が無傷の新しい脱皮成虫バッタを選択し、滅菌カミソリを使用して触角を2〜3ミリメートルの断片に切断します。次に、OCT化合物を凍結ミクロトームホルダーに塗布し、サンプルを化合物に水平に置きます。

ホルダーをマイナス24°Cの凍結ミクロトームに移し、化合物が凍結するまで平衡化します。その後、ホルダーを取り出し、サンプルを少量の化合物で覆います。ホルダーをマイナス24°Cの凍結ミクロトームに再度10分間少なくとも10分間移し、凍結したサンプルを12マイクロメートルの厚さのスライスに切片化します。

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