2017年9月27日
新生児カプサイシン処置ラットとアトピー性皮膚炎に対するホルムアルデヒド吸入の影響を調査するため気化したホルムアルデヒドの露出でアトピー性皮膚炎を誘発する方法をご紹介します。
この手順の全体的な目標は、新生児カプサイシン治療によってアトピー性皮膚炎様症状を誘発することです。また、ホルムアルデヒドがアトピー性皮膚様症状に及ぼす影響を測定すること。この方法は、皮膚科学分野におけるアトピー性皮膚炎の病態生理学的に関連する重要な質問に答えるのに役立ちます。
この技術の主な利点は、アトピー性皮膚炎様症状の誘発と、増分による重要な曝露システムの確立です。1ミリリットルあたり5ミリグラムのカプサイシン溶液を調製するには、1ミリリットルのTween 80、1ミリリットルの100%エタノール、および50ミリグラムのカプサイシンを15ミリリットルの円錐管に加えます。次に、8ミリリットルの生理食塩水を円錐形のチューブに加えます。
キャップをして、分離した層が見えなくなるまでチューブを激しく振ってください。カプサイシンは、生後12時間から48時間の間に送達することが重要です。新生児Sprague Dawley Ratの首の正中線と背面の皮下組織にカプサイシン溶液を注入します。.
カプサイシン注射による呼吸停止を防ぐために、呼吸が正常になるまで新生児を酸素チャンバーに入れます。.必要に応じて、新生児の胸を押して呼吸を促します。まず、鏡が十分に見えるように鏡が装備されたプラスチックチャンバーと、ネズミが呼吸できるようにする穴を準備することから始めます。
ラットをプラスチックチャンバーに入れ、チャンバーの天井を重いもので覆って蓋が開かないようにします。次に、デジタルビデオカメラをセットアップして、ネズミの鏡像と正面図の両方を同時に記録します。次に、ラットの自発的な行動を1時間記録します。
ビデオクリップを再生し、右側のネズミが示したような引っ掻く行動の数を数えます。そして、中央にネズミ。病変を採点するには、麻酔をかけたラットの耳や他の部分の皮膚炎の程度と重症度を特定します。
皮膚病変の範囲の単位サイズを 0.25 センチメートル四方として定義します。そして、この表を使用した皮膚病変の重症度。反対側に2つのコネクタがあるアクリルガラスボックスを準備します。
ホルムアルデヒドガスを循環させるには、ガス吸気出口よりも高く配置する必要があります。チューブを両方のコネクタに接続します。ガスを放出するために、通気出口チューブを循環フードまたは建物の外に通します。
そして、もう一方のインレットチューブを医療用酸素レギュレーターに接続します。アクリルガラスの箱の中に従来のラットケージを置きます。生後1週間のネズミをケージに入れ、アクリルガラスの箱をできるだけしっかりと密封して、ガス漏れを防ぎます。
ラップフィルムを貼ってチャンバーを包み、ゴム引きの蓋でチャンバーを閉じてしっかりと密閉します。医療用酸素レギュレーターに接続された加湿器ボトルに0.5%ホルムアルデヒド溶液を追加します。ホルムアルデヒドでの作業は非常に危険であることを忘れないでください。
また、この手順を実行して、マスクや手袋などの予防策を常に講じる必要があります。次にレギュレーターをオンにし、流量を毎分5リットルに設定します。ラットをホルムアルデヒドガスに2時間さらします。
ここに示されているのは、カプサイシンを治療したラットの皮膚炎症の代表的な写真です。カプサイシンで治療したラットの皮膚炎の経年的な進行をここに示します。この画像は、カプサイシン処理ラットにおける引っ掻く行動の時系列的な発達を示しています。
これは、16週齢のカプサイシン治療ラットの再発性皮膚病変の代表的な画像です。血清IgEレベルは、カプサイシンで治療された動物で有意に上昇します。IL-4 mRNA発現の有意な上昇は、カプサイシン処理動物でも観察されます。
ここでは、カプサイシン処理動物におけるIL-13 mRNA発現の有意な上昇が示されています。これらの代表的な写真は、1.2ppmによる治療5週目以降のアトピー性皮膚炎を示しています。また、ホルムアルデヒドは、空気による制御処理と比較して0.8ppmです。
1.2ppmのホルムアルデヒドへの曝露は、0.8ppmのホルムアルデヒドへの曝露ではなく、カプサイシンで治療されたアトピー性皮膚炎モデルで掻痒症を有意に悪化させました。皮膚炎を測定した場合も同様の結果が観察されました。1.2ppmのホルムアルデヒド曝露で処理したカプサイシン処理ADラットモデルでは、血清IgEレベルの上昇が観察されました。
この手順に続いて、ギルコール溶液のような他の材料を使用して、アトピー性皮膚炎に対する特定の物質の影響に関連する追加の質問に答えることができます。これらの開発の後、この技術は、皮膚科学の分野の研究者がアトピー性皮膚炎の病因における環境要因の役割を探求する道を開きました。
完全なトランスクリプトを表示し、数千本の科学動画にアクセス
本記事では、新生児期へのカプサイシン投与によりラットにアトピー性皮膚炎様症状を誘導し、ホルムアルデヒド吸入の影響を調査する方法について解説します。本研究は、アトピー性皮膚炎の病態生理に関する理解を深めることを目的としています。
アトピー性皮膚炎における環境誘因は、トランスレーショナル皮膚科学において依然として重要な未知の領域であり、治療法開発における予測の確信度に影響を及ぼしています。このラットモデルを用いることで、ホルムアルデヒドなどの環境曝露が疾患の進行およびバイオマーカーの反応に与える影響を系統的に評価することが可能になります。本アプローチは、メカニズム的なリスク低減を支援し、皮膚科領域のパイプラインにおける初期段階のポートフォリオ決定に有用な情報を提供します。
このモデルは、アトピー性皮膚炎の進行における環境因子の制御された仮説検証を可能にすることで、初期の発見から前臨床検証への橋渡しをします。