2017年8月8日
人口レベルの遺伝学や栄養物; に関連するシカの集団間の表現型の違い肥えた野生では困難であります。このプロトコルでは、栄養の変化が除去された制御研究の設計方法について説明します。男性オジロジカの表現型変異が遺伝学よりより栄養によって限られたがわかった。
この実験計画の全体的な目標は、年齢や栄養など、角や体の大きさにも影響を与える他の変数を制御することにより、集団レベルの遺伝学がオジロジカ、Odocoileus virginianus antler、および体の大きさを制限するかどうかを支援することです。この方法論は、野生生物種が生息域全体で形態学的に変異する真の原因を理解するのに非常に役立ちます。そして、これは重要なことです、なぜなら、形態学は亜種の歴史的指定の基礎であり、絶滅危惧種法がそれらの亜種の違いを成文化しているため、それらの違いは本当に意味があり、保存する必要がある遺伝的違いによるものなのか、それともそれらの亜種が発生する生息地に関連する栄養上の生息地の質の違いにすぎないのかを理解することが重要になります。
この技術の主な利点は、制御された環境で、動物が自然に育てられた環境の特定の特性に焦点を当てることができることであり、この場合、動物を自然の生息地から取り除き、栄養を制御して、栄養が形態学的な違いの原因であるかどうかを確認します。この手法は、資源が限られている州の資源機関が意味のある遺伝的変異を特定できるようになるため、絶滅危惧種法の実施を実際に改善することができます。今日、そのテクニックを実演するのはダン・モリーナです。
ここMSU鹿研究所の大学院生は、サイドフェンシングがペン間の視覚的および物理的な障壁として機能する日よけ布を持っていることを保証することから始めます。各ペンの一方の端に昇降式ボックスブラインドを取り付けて、データ収集中のダーティングイベントを容易にします。
2つのトラフスタイルのフィーダーを各ペンの別々の端に置いて、鹿間の食物の競争を減らします。最後に、鹿に高品質の食事を提供し、Lupitumを追加します。まず、ブラインドが位置するペンの端までダッシュする技術者を歩きます。
1人の技術者をブラインドにポストします。次に、技術者をブラインドに歩かせた個人に、ペンの反対側の端まで歩いて戻ってもらいます。眼球の反射をチェックして鹿の鎮静を確認した後、眼科用軟膏を目に塗ります。
そして、ストレスを軽減するために鹿を目指せます。鹿をミリタリースタイルの担架に積み込みます。次に、直腸体温計を使用して、回復後の体温を評価します。
動物の体温が摂氏37.7度未満の場合は、加熱された毛布で鹿を温めます。または、動物の体温が摂氏40度を超える場合は、氷嚢で鹿を冷やします。そして、それをユーティリティタスクビークルを介して所定のデータ収集エリアに輸送します。
輸送したら、デジタル吊り下げスケールで体重をキログラムの100分の1近くまで測定します。また、後足部の長さと全身の長さはミリメートル単位です。次に、適切な量の抗生物質イベルメクチン、保管用ワクチン、レプトスピラ症ワクチンを投与します。
次に、動物を鎮静させながら、角測定テープを使用して成体オスから3回の角測定を行います。枝角を取り外す前に、枝角の内側の広がり、基底周囲、およびメインビームの長さを測定します。次に、レシプロソーを使用して、バリの約3センチ上の角を取り除きます。
データが収集されたら、鹿を適切な囲いに入れます。そして、塩酸キシラジンの影響を逆転させるために、塩酸ヨヒンビン1キログラムあたり125ミリグラムまたは塩酸タイロシン1キログラムあたり4.0ミリグラムを投与します。最後に、鹿を監視して、鎮静剤から出て完全に警戒するまで、鹿が胸骨の位置に留まるようにします。
アントラーサンプルを取得した後、メインビームから突き出た個々のタインと追加の異常点をワイヤーを使用して測定します。タインがメインビームと交差する場所にワイヤーを巻き付け、そのポイントを基準としてマークします。次に、この基準点からタインの先端まで測定し、各タインについて繰り返します。
次に、G1 と G2 のタイン、G2 と G3 のタイン、G3 と G4 のタインが存在する場合は、その間の最小点を特定して、残りの円周の測定値を収集します。G4タインが存在しない場合は、メインビームの端にあるG3タインの中点間の距離を測定します。そして、中間点でH4円周を測定します。
最後に、科学的なデジタルスケールを使用して、枝角の重量を10分の1グラム単位で計量します。また、1年目の動物の場合、角が3センチメートル未満の最小の臨界角質量を設計します。この研究の結果は、栄養の改善が、各発生源地域の3.5歳のオスのオジロジカのすべての形態測定にプラスの効果をもたらしたことを示しました。
枝角の質量と角の大きさは、2世代にわたる栄養改善後も、3つの供給源地域間で変化しなかった。これは、枝角のサイズが集団レベルの遺伝学によって制限されないことを示唆しています。さらに、体重は初代から2代目にかけて大幅に増加しました。
これは、野生ではすべての個体群に栄養上の制限があることを示唆しています。しかし、第2世代の男性の間ではまだ地域差がありました。このテクニックを習得すると、動物1匹あたり約1時間しかかかりません。
しかし、サンプルサイズは非常に重要なので、できるだけ多くの動物を研究に参加させたいので、必要に応じてすべての動物を処理するために数日を費やすことになります。この手順を試みている間、鹿の囲いの中のすべてのものが成功するように設定されていることが非常に重要です。ブラインドは、フェンスから正しい距離に適切に配置する必要があります。
シューティングレーンは、邪魔になる枝がある場合はカットする必要があります。そして、あなたがコントロールできるすべてのものは、あなたが彼らを置いている特定のストレスの多い状況の下で動物がどのように振る舞うかということであるため、事前に制御する必要があります。この手順を使用して、実験の栄養成分を変更することもできます。
そして、タンパク質やエネルギーの摂取が、その遺伝的可能性と動物の形態学的発現をどのように変えるかを見てください。これと同じ方法論を他の研究者が使用して、動物に提供される治療の種類を変えたり、形態学的発達以外のものを調べたりすることができます。栄養摂取が生殖形質などの生活史形質や妊娠や授乳の需要からの回復にどのように影響するかを調べることができます。
このビデオを見た後、飼育施設内の動物の形態学的発達において遺伝学と栄養がどのように相互作用するかを確認するために、栄養と年齢を制御する方法についての良いアイデアを持っているはずです。野生動物を鎮静させるときはいつでも、たとえ飼育施設であっても動物に怪我をする可能性があるため、注意深く監視する必要があることを忘れないでください。
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本研究では、遺伝学および栄養学の役割に着目し、オジロジカの雄における表現型の変異に影響を与える要因を調査します。栄養面の違いを制御することで、野生動物の形態的特性を決定づける主要な要因を明らかにすることを目的としています。
表現型形質の遺伝的要因と環境的要因を分離して解析することは、トランスレーショナルリサーチにおけるターゲットの妥当性確認および予測の信頼性にとって極めて重要です。本プロトコルでは、形態学的結果に対する環境的および遺伝的寄与の制御された評価が可能となり、前臨床モデルにおけるメカニズムのデリスキングと堅牢な仮説検証を支援します。このようなアプローチは、生物学的変動が治療薬の開発やバイオマーカーの整合性を妨げる可能性がある場合のポートフォリオ決定に有用な情報を提供します。
本プロトコルは、初期段階の創薬研究と前臨床モデル開発のインターフェースに位置しており、下流のトランスレーショナルリサーチに向けた堅牢な仮説検証およびモデルの標準化を可能にします。