Confocal Imaging of Neuropeptide Y-pHluorin: A Technique to Visualize Insulin Granule Exocytosis in Intact Murine and Human Islets

Madina Makhmutova; Tao Liang; Herbert Gaisano; Alejandro Caicedo; Joana Alma&#231;a

doi:10.3791/56089

共焦点イメージングの神経ペプチド Y-pHluorin: そのままのマウスと人間のランゲルハンス島におけるイン...

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Confocal Imaging of Neuropeptide Y-pHluorin: A Technique to Visualize Insulin Granule Exocytosis in Intact Murine and Human Islets

共焦点イメージングの神経ペプチド Y-pHluorin: そのままのマウスと人間のランゲルハンス島におけるインスリン開口分泌の可視化技術

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09:41 min

September 13, 2017

DOI: 10.3791/56089-v

Madina Makhmutova¹, Tao Liang², Herbert Gaisano², Alejandro Caicedo¹, Joana Almaça¹

¹Department of Medicine,University of Miami, ²Department of Medicine,University of Toronto

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

PHluorin、pH に敏感な緑色蛍光タンパク質を用いたそのまま膵ランゲルハンス島のインスリン分泌の可視化のためのプロトコルについて述べる。膵島は、小胞貨物ニューロペプチド Y に結合された pHluorin をエンコードアデノウイルスに感染しています。これにより、共焦点顕微鏡によるインスリン顆粒の融合イベントを検出するため。

このアッセイの全体的な目標は、共焦点顕微鏡法により、無傷の膵島におけるインスリン顆粒エキソサイトーシスをリアルタイムで視覚化することです。この方法は、糖尿病分野の重要な質問に答えます。たとえば、インスリンエキソサイトーシスを調節するものは何ですか?

顆粒融合は、より優れた細胞の寿命において最も重要なイベントであるため、これは非常に重要です。この技術の主な利点は、無傷の島を使用できること、および本来の環境内の細胞内の融合イベントを確認できることです。私たちの研究室の博士課程の学生であるMadina Mahkmutovaがこの技術を実演します。

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