Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

Stelios Chatzimichail; Pashiini Supramaniam; Oscar Ces; Ali Salehi-Reyhani

doi:10.3791/56110

JoVE Journal
Cancer Research

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JoVE Journal Cancer Research

Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

アドレス指定可能な液滴マイクロアレイによる単一細胞におけるタンパク質をカウント

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12:25 min

July 6, 2018

DOI: 10.3791/56110-v

Stelios Chatzimichail*¹, Pashiini Supramaniam*¹, Oscar Ces¹, Ali Salehi-Reyhani¹

¹Institute of Chemical Biology, Department of Chemistry,Imperial College London

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

アドレス指定可能な液滴マイクロアレイ (Adm)、単一セルの絶対蛋白質量を決定できる液滴アレイ・ベースメソッドをご紹介します。ひと癌細胞における癌抑制タンパク質 p53 の発現の多様性を特徴付けるための Adm の機能を紹介します。

この実験の全体的な目標は、単一細胞の分解能で標的タンパク質の絶対コピー数を決定することです。シングルセル技術により、セントラルドグマに関連するタンパク質の挙動をより深く理解することができ、制御された遺伝子発現の正確な定量に役立ちます。シングルセルレベルでの作業は、従来の生化学的手法で発生する平均化によって失われる細胞集団の豊かな不均一性を捉えることができます。

一般に、この方法に不慣れな個人は、シングルセルアッセイの感度や各細胞内のタンパク質の量が限られているために苦労します。この方法のアイデアを最初に思いついたのは、ストリームのさらなる分析のために簡単にサンプリングできるシングルセルタンパク質アッセイを実行したいと考えたときでした。この手順は、テキストプロトコルで説明されているように、チップを作成し、抗体マイクロアレイを印刷することから始めます。

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