2017年9月15日
持続的注意、または断続的な予測不可能なイベントの状況を継続的に監視は、認知の重要な側面です。ここでタッチ スクリーン オペラント チャンバーを用いたラットでの持続的な関心をテストする方法を詳しく説明します。我々 は男女ともに注意を調べる場合に役立ちますこのタスクを作る雄および雌ラットに匹敵する性能を発揮します。
タッチスクリーンオペラントチャンバーを使用したこの行動課題の全体的な目標は、ラットの持続的な注意能力を測定することです。この方法は、断続的で予測不可能な事象の経時的なモニタリングである、適切な持続的な注意に重要な神経生物学的メカニズムを明らかにするのに役立ちます。この手法の主な利点は、十分に検証されたげっ歯類の持続的な注意タスクをタッチスクリーンオペラントチャンバーに適合させたことです。
多くの認知タスクにプログラム可能な人気が高まっている装置。この手法の応用は、注意力の乱れを特徴とする神経精神障害および神経変性疾患の研究にまで及びます。その治療法は、ここで紹介する方法を使用してテストできます。
一般に、この方法に不慣れな個人は、ラットが正確に追跡され、データが適切に記録されていることを確認するためのシステムを設定するのに苦労します。この実験では、タッチスクリーンチャンバーを音響減衰キュービクル内に準備する必要があります。チャンバーにハウスライト、トーンジェネレーター、上に配置されたカメラ、タッチスクリーン、フィーダー報酬エリアを備えたペレットディスペンサーを装備します。
フィーダー報酬エリアを照らすことができます。45ミリグラムの報酬ペレットを装填する前に、小麦粉ふるいを使用してほこりを振り落とします。このほこりはフィーダーを詰まらせる可能性があります。
ラットに頭部インプラントが装着されている場合は、大きな開口部のフィーダーを使用してください。各チャンバーに黒いアクリルマスクを送り、タッチスクリーン上の応答領域を制限します。光刺激のための中央の円形の穴と、中央に配置された中央の穴の下に2つの正方形の応答穴を残します。
使用中は、防音キュービクルでチャンバーを操作してください。これでチャンバーの準備は完了です。テキスト プロトコルでは、実験の境界を設定する方法について説明します。
この実験では、ラットを個々に、またはグループで飼育することができます。研究を開始する前に、ラットを毎日5分間、5日間連続で扱います。常に個人用保護具を着用してください。
行動形成を開始する3日前に食物制限を開始します。初日には、各ラットの自由摂食体重を記録し、自由摂食体重の85%である目標体重を計算します。成形する前に、ラットを自宅のケージ内の15個の食物報酬ペレットに事前にさらします。
最初の食事制限の後、目標体重を維持するために食物摂取量を調整し、時間の経過とともにわずかな体重増加を可能にします。新しいスケジュールを開始する前に、食べ物はラットを通常よりも少し制限して、モチベーションを高めます。ラットがタスクを実行しない日には、ペレット報酬を受け取らなかったことを補うために、餌を少なくとも1グラム増やします。
各セッションの後、食事を提供する前に少なくとも30分待ってから、テストの連続と彼らの給餌時間とを関連付けないようにします。ラットがグループハウスされている場合は、再グループ化する前に1時間別々に餌を与えます。準備として、機器の電源を入れます。
ペレットディスペンサーにペレットが充填されていることを確認し、マスクがタッチスクリーンの前の所定の位置にあることを確認します。次に、各ボックスの機能を確認します。ペレットディスペンサー、スクリーン、ライト、トーンジェネレーターをテストします。
一日の初めにチャンバーの機能をテストすることは、小さな誤動作が動物を混乱させ、動物がタスクを学習したり、通常のレベルで実行したりするのを妨げる可能性があるため、非常に重要です。次に、ボックスのロードスケジュールを確認します。テストグループに細心の注意を払い、動物ID、性別、実験条件、ユーザーのイニシャル、その他の注意事項に関する関連情報を入力してください。
すべての準備が整ったら、被験者を回収します。一般的に、ラットの暗期サイクルの少なくとも30分後にテストします。暗闇でネズミと一緒に作業するには、ヘッドマウントされた赤いライトを使用します。
暗いサイクル中にネズミを輸送するときは、ケージを黒いタオルで覆ってください。ビヘイビアルームに入ったら、ラットを適切なボックスにロードし、持続的な注意タスクのセッションを開始します。持続的注意課題では、ラットはシグナル試行と非シグナル試行を区別するように訓練されます。
信号の試行には、可変時間ライトの点滅とそれに続く可聴音、および 4 秒間の応答ウィンドウが含まれます。4秒間の間に、ラットが画面上の正しい領域をポーズした場合。この場合、それは正しい応答領域であり、ラットには食物ペレットが与えられ、これはヒットと呼ばれます。
ネズミが他の応答領域を突いた場合、これはミスと見なされ、ネズミは報酬を受けません。非信号試行にはライトは含まれず、ラットは報酬を得るために信号が検出されなかったことを示すために画面の別の部分を突く必要があります。シグナルのない試行に対する正しい応答は、正しい拒否と呼ばれます。
ラットが非信号試行で他の応答領域を突いた場合、これは誤警報と見なされ、報われません。シグナル試行と非シグナル試行の正しい応答領域は、被験者間でカウンターバランスする必要があります。シグナルトライアルとノンシグナルトライアルでは、レスポンスウィンドウ中にレスポンスを行わなかった場合は、ミッションなしとしてカウントされ、報酬は得られません。
また、持続的な注意タスクの気晴らしバージョンもあり、3つの試行ブロックのうちの2番目のブロックで家のライトが点滅します。セッションを開始した後、最初の数分間はラットを監視し、すべてが正常に機能していることを確認します。次に、断続的にパフォーマンスを確認します。
セッションが完了したら、概要データと問題点をノートブックに記録します。試験の合間に、各チャンバーを10%エタノールで拭き取り、寝具を交換します。その日のすべての試験を実行した後、10%エタノールでチャンバーを徹底的に洗浄し、フロアグリッドができるだけきれいであることを確認します。
その後、寝具を交換します。セッションのたびに、スプレッドシートを完全に更新し、別のサーバーにバックアップすることをお勧めします。SATの基準に達するまでの日数の中央値は、雄ラットで54.5日、雌ラットで62日であり、有意差はありませんでした。
SATタスクのパフォーマンス測定では、ヒットと正しい拒否の割合に基づいて、シグナル試行と非シグナル試行で男性と女性が同様に正確であることが示されました。意図的なパフォーマンスの全体的な尺度であるビジランス指数(VI)も、男女間で同様の尺度を示しました。また、記録された脱落の割合が低いことにも性差はありませんでした。
タスク中、視覚信号は500ミリ秒、50ミリ秒、25ミリ秒の間で変化し、信号が短いほどパフォーマンスが低下しました。性別に基づく主な効果はありませんでした。注意力を高めるために、ネズミの1つのサブセットで、3つの試行ブロックの2番目で、家のライトが気を散らすものとして点滅しました。
予想通り、トライアルブロックには主効果がありました。ブロック2でパフォーマンスが低下し、ブロック3で回復します。意外なことに、女性は男性よりも大幅に成績が悪かった。
このビデオを見た後、タッチスクリーンオペラントチャンバーを使用してラットの持続的な注意をテストする方法をよく理解しているはずです。この手順を試みる際には、個々の動物のパフォーマンスを追跡し、必要に応じて給餌を調整して、できるだけ早くタスクを獲得したことを確認することを忘れないでください。げっ歯類を扱うときは、まずIACUCによってプロトコルが承認され、個人用保護具を常に着用する必要があることを忘れないでください。
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この研究は、タッチスクリーン操作チャンバーを使用してラットの持続注意をテストする方法を概説しています。このアプローチにより、性別間で比較可能な性能評価が可能となり、性別間の注意メカニズムの研究に不可欠です。
Touchscreen-based sustained attention tasks in rats provide a translationally relevant platform for interrogating cognitive mechanisms underlying attention deficits seen in neuropsychiatric and neurodegenerative disorders. This method enables robust, quantitative assessment of attentional performance across sexes, supporting early-stage target validation and mechanistic de-risking in CNS drug discovery. Its adaptability and standardization facilitate integration into enterprise-scale preclinical pipelines for cognitive therapeutics.
This touchscreen SAT method positions within the discovery-to-preclinical continuum, bridging hypothesis-driven target validation and quantitative behavioral screening for CNS drug candidates.