Name: 生体内でひと脂肪由来間葉系幹細胞が脂溶性膜の蛍光色素をラット膝関節変形性関節症モデルでの追跡 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 31 s
Description: 学ぶラット膝関節変形性関節症モデルにおけるDiD蛍光標記を用いたヒト脂肪由来間葉系幹細胞の生体内追跡法。この手法は細胞の持続性と分布を評価し、再生医療研究に貢献します。

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現在の研究は、上海科学技術委員会の上海の自治体 (CN) 博士温王に主催の革新資金 (294300 1402 H) によって支えられました。彼の技術支援とこの原稿の科学的助言のため広東省周博士 (組織工学センターの中国国家) に感謝したいと思います。我々 も感謝したい氏 Huitang 夏 (上海第九人民病院) 動物の福祉に貢献しました。

動物を対象とする手順は動物の苦痛を最小限に抑える努力をローカル機関動物のケアと倫理委員会で承認されました。次のプロトコルは、機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) 上海 9 人によって承認された &#8217; プロトコルと上海交通大学医学部付属病院 s [2017] 番号 063。
 1 です Surgically-Induced ラット膝関節変形性関節症モデルの確立 <li>この手術、250 と 300 g. 間体重の使用 8-12 週齢雄 SD) ラットの</li> <ol>。
	<li>40 mg/kg チレタミンと 40 mg/kg 筋肉内注射を介してチレタミン動物を麻酔します</li>。
	<li>は、左側臥位で加熱ステージに動物を配置します。右膝を徹底的にかみそりで剃る。70% エタノールに続いて 10 %providone ヨード溶液による外科的領域を消毒、2 回以上繰り返すと後 10 %providone ヨード溶液でペイントし、非外科的手術パッド領域をカバーします</li>。
	<li>、Jointcapsules を公開する膝蓋腱に沿って横方向に 2 cm の切開を行う手術のメスを使用しています</li>。
	<li>は、内側側副靱帯のトランセクトを手術用メスを使用します。大腿骨に向かってメニスカスを反映します</li>。
	<li>軟骨が乾くを防ぐために操作中に関節軟骨の表面の滅菌の 0.9% 塩化ナトリウム溶液を滴下します</li>。
	<li>は、ピンセットで内側半月板をつかむし、メス ( 図 1 a) と脛骨の添付ファイルからの狭いポイントで半月板をカットします。避けるために軟骨を負傷します</li>。
	<li>4-0 吸収性縫合糸と関節包を閉じます</li>。
	<li>彼らは意識を取り戻すまで、手術のラットを監視します</li>。
	<li>感染や手術後の痛みを和らげるために筋肉内のルートを通じて 0.05 mg/kg ブプレノルフィン 20 mg/kg のゲンタマイシンを挿入します</li>。
	<li>温度制御動物施設発症コアに 3-8 週の 12 h 明暗サイクルの下でラットを維持します。動物が痛み症状が続く場合、ブプレノルフィン (0.05 mg/kg, i. m.) とゲンタマイシン (20 mg/kg, i. m.) に限定されないなどの鎮痛薬を受け取り続けます</li>。
</ol> 2。ラット コア モデルの組織評価 <ol><li>過剰な CO 2 吸入 (動物の無意識を作るに追加商工会議所の既存の空気に二酸化炭素を 1 分あたり試験室の容積の約 30% のフィル レートとラットを犠牲に2-3 分の最低維持 CO2 流れ呼吸後 1 分以内停止します。)手術後時点 (代表コア誘導 3 から 8 週間までの 8 週間で結果が表示されます) を示した</li> <li>メスと膝継手を切り肌と膝の関節の周りの筋肉を解剖</li>。
	<li>は、室温で 3 日間の 4% パラホルムアルデヒド (PFA) の膝継手を修正します。その後、4 ° C で約 4 週間 20% エチレンジアミン四酢酸 (EDTA) のサンプルをめし、EDTA を 3 日ごとに変更します 。
	注意: パラホルムアルデヒドは有毒である、手袋、眼鏡など適切な個人用保護具 (PPE) を着用します</li>。
	<li>は、自動ティッシュ プロセッサを使用してサンプルを脱水します。フラッシュ サイクルを次のように起動するメニューを設定: 70% のエタノールの 1 h。その後 80% エタノールと 95% のエタノール 1 h のそれぞれ;1 時間の 100% エタノールの 2 サイクルが続くその後、1 h の 2 倍のキシレンのたび、たび 58 ° C 1 時間で 3 回パラフィンします 。
	注意: キシレンは有毒である、ので、適切な PPE は、手袋、眼鏡などを着用します 。
	注: 必要に応じて、Coplin Jar の使用自動ティッシュ プロセッサとして同じセットアップと手動脱水します</li>。
	<li>そのまま接合面の内側面を下に置くし、中央に埋め込まれた組織をパラフィン ブロックに埋め込む 。
	注: 必要に応じて、パラフィン ブロックにサンプルを手動で埋め込む鉗子を使用します</li>。
	<li>回転式ミクロトームで 2 連続切片で 30 μ m 間隔で 5 μ m 矢状セクション内側縁から関節をカットを開始します</li>。
	<li>は、スライド ガラス上のセクションをマウントし、キシレンでスライドを deparaffinize します。2 連続切片の間ヘマトキシリンと 1 つのスライドを染色 &#38; エオシン (H &#38; E) 染色: 0.1% 1%、15 分間ヘマトキシリン 10 s および 0.5% の酢酸水溶液 10 分エオシン。サフラニン O/高速の緑色の染色と他のスライドを染色: 0.1%、0.02% の 15 分間ヘマトキシリン 3 分、1% の高速グリーン酢酸溶液に 10 s および 3 分の 0.1% サフラニン O 
	注意: キシレンは有毒である、眼鏡、手袋などの適切な PPE を着用します</li>。
	<li>ラット 6 で変形性関節症の研究の社会インターナショナル (OARSI) 病理組織評価システムを使用して染色スライドをスコアします</li>。
</ol> 3。蛍光色素は、ヒト間葉系幹細胞をラベリング <ol><li>1 mM の濃度で 100% エタノールの細胞ラベリング ソリューションの準備をしました。光から保護して細胞ラベリング ソリューションと 6 ヶ月間常温保存します</li>。
	<li>成長ダルベッコの標準的な細胞培養プロシージャと haMSCs &#39; s 変更イーグル &#39; s 培 (DMEM) 1% ペニシリン、ストレプトマイシンと 10% 牛胎児血清 (FCS) 10 cm シャーレで</li>。
	<li>1 mM EDTA 合流前の約 80% 点と 2 mL 0.25% トリプシン haMSCs をデタッチします</li>。
	<li>培地 4 mL のトリプシンを中和し、室温で 3 分間 800 x g でセルをスピンします</li>。
	<li>5 mL 無血清培地の 1 x 10 6 セル/ml の密度でセルを中断します</li>。
	<li>50 を追加することによって、セルのラベル μ L は 5 mL 50 分の 37 ° C で培養の無血清細胞ラベリング ソリューション</li>
	<li>800 x g で 3 分間でラベル付きセルをスピン</li>
	<li>5 mL リン酸バッファー生理食塩水 (PBS) 3 分間 800 x g で 2 セルを洗浄して回以上</li>。
	<li>Cy5 のフィルター セットと蛍光顕微鏡を用いたラベル付きの haMSCs を確認してください</li>。
	<li>トリパン ブルー染色でセルをカウントし、2.5 倍の注射用 100 μ L の PBS で 10 の 6 の実行可能なセルを取得します</li>。
</ol> 4。生体内で蛍光イメージング トラック haMSCs <ol><li>(ステップ 1)、手術後 8 週間は 25 mg/kg チレタミンとチレタミン 25 mg/kg の筋肉内投与によりコア ラットを麻酔します</li>。
	<li>右膝を徹底的に関節部を公開するかみそりで剃る。70% エタノールで関節部を消毒します</li>。
	<li>2.5 x 10 26 G 注射針を使用して注入 6 標識三角形領域の中央に 100 μ L の PBS 中に浮遊細胞は内側膝蓋靭帯、内側の大腿骨顆と脛骨の内側顆 (によって形成されます。 図 1 b).</li>
	<li>イメージング ソフトウェアを開き、体内 の発光イメージング システムを初期化します</li>。
	<li>イメージング システムの中央ステージでの位置や部屋のドアを閉じる位置ラット臥</li>。
	<li>チェック、&#34; 蛍光 &#34; 640 の設定チェック ボックスと蛍光フィルターの選択励起、nm および 680 nm の発光 ( 図 2 a) ため</li>。
	D. 設定中 (8) にピクセルビニングに <li>選択フィールドのビュー 2 と露出に F/ストップの自動時間します。最適な維持します。全体の研究 ( 図 2 a) で同等の結果を取得する一貫性のある露出時間</li>。
	<li>はステージと麻酔からの回復のためのモニターから動物を削除します 。
	注: 加熱パッド上の場所の動物のタオル地の 2-3 層で覆われている</li>。
	<li>は、放射効率の蛍光 ( 図 2 b) 測定のための単位を選択します。利益 (率 ROI) 分析のための領域を選択し、それぞれのイメージ ( 図 2) から蛍光信号を定量化します</li>。
	<li>は 生体内 イメージング研究 haMSCs 縦保持関節の順に各ラットのための手順を繰り返します 。
	注: 動物のイメージングを提案 &#39; 蛍光信号を用いたイメージング システム注入後最初の週 2 日に一度と一度毎週まで信号が検出できません</li>。
</ol>

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</ol>

孟李明浩、温王が現在の従業員と細胞生物医学グループのストック オプションの保有者 (Nasdaq: CBMG)。他の著者は利益相反を宣言しません。

我々 はベンチから枕元にコアの再生幹細胞治療をもたらすことができる前に、安全基準と体内の幹細胞療法の研究は必要緊急です。ただし、疾患の病理組織学的環境は、永続性と移植 haMSCs10の体内で重要な役割を果たしています。最近、私たちのグループを示した haMSCs の関節内注入の永続化をもはや病理コア環境よりも通常の条件8下注射をしました。炎症と変性微小環境が修理の間葉系幹細胞を募集し、その後注入 haMSCs1、21の保持を支持、不可能です。さらに、haMSCs の安全性と有効性のプロファイルは、実験動物の KOA の進行の最適化は臨床試験をサポートするための貴重なデータを提供できるようにコアの重要度に関する携帯配信のタイミングに左右される可能性があります。目的に似た人間のコアの中等度の軽度、3 から 8 週間まで及ぶコアを開発 MM によるラットが許可されています。本研究では軟骨の形態学的変化は、比較的実現可能なモデルの有...

膝変形性関節症 (コア) は、関節軟骨の損失や世界の1のまわりの高齢者の主要な慢性疾患になった進歩的な炎症から生じる退行性疾患です。ただし、抗炎症薬、物理的なサプリメントや手術の手順を使用して現在の治療症状痛み2の一時的な救済を提供することがあります。
膝変形性関節症、軟骨の再生と免疫調節特性3、潜在的な多能性分化のための有望な再生治療薬となっているひと脂肪由来間葉系幹細胞 (haMSCs) 4。生体内でアクションのメカニズムを調査する薬理学的ルートと比べると、小さなコア動物モデルでライブの haMSCs を追跡する現在の理論的根拠と臨床応用の前に haMSC 療法の有効性を確立するために有益です。前臨床試験の内側半月 (MM) は、一貫性のある再現性5比較的実現可能なモデルを提供するラットでは, コアを誘導するために関節の機械的負荷を不安定化します。MM によるコアの発症は、膝前十字靭帯断裂単独あるいは部分内側半月6より前です。したがって、コアの病理学的微小環境と注入された haMSCs の長期的な相互作用は多くの場合8MM7,投与ラットにおける評価されます。
HaMSCs の薬効は広く報道されると、関連する知識をされているが (IA) の関節内注射による注入 haMSCs の生体内で持続性は乏しい9,10です。したがって、様々 な細胞ラベリング方法が開発されて、immunohistology11、ルシフェラーゼ12、緑の蛍光蛋白質13トランスフェクション、鉄酸化物の磁気共鳴画像 (MRI)14 のラベリングなど、および多数蛍光セル染料8,15,16。手間のかかる組織解析と比較して、生体内の非侵襲的イメージングはリアルタイム配信や蛍光信号10,17の付いた細胞の動態を検出する光学デバイスを採用しています。機能の生きているセルイメージ投射のため cytocompatible の蛍光標識、幹細胞移植18後細胞活動を明らかにする洗練された放射性無料トラッキング手法です。また、多色蛍光脂溶性色素は、アミノ反応親水性染料や蛍光蛋白質が改良されたセル透磁率および増強蛍光量子収量19を含む上の利点を所有しています。
こうして、ここで含まれるプロトコル利用赤い脂溶性 carbocyanines ラベルの付いたセルを励起するレーザーでした (DilC18(5))、遠赤色蛍光 Dil (dialkylcarbocyanines) アナログ20であります。赤いシフト励起と発光スペクトルされる干渉を回避したし、深い組織の生きている動物の8時間の長期間画像をことができます。この方法で追跡細胞の生体内での付いたでしたを理解し、現在の幹細胞再生治療の向上に不可欠な動物モデルでの haMSCs などの移植の幹細胞を監視するためです。

<table><tbody><tr><td>Matrx VMR動物麻酔システム</td><td>Midmark</td><td>VIP3000</td><td></td></tr><tr><td>4-0縫合</td>糸上海<td>Jinhuan</td><td>KC439</td><td></td></tr>か<tr><td>みそり</td><td>Pritech</td><td>LD-9987</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicin</td><td>浙江Jindakang動物衛生製品有限公司</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>0.9% 塩化ナトリウム溶液</td><td>湖南ケルン製薬株式会社</td><td></td><td></td>H43020455</tr><tr><td>ペニシリン</td><td>上海康府化学製薬有限公司</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>ブプレノルフィン</td><td>天津製薬研究所 Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>16005</td><td>PBS EDTAで最終濃度10%まで希釈</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E9884</td> PBS 0.1%ヘマトキシリン溶液<td>で最終濃度20%まで希釈</td></tr><tr><td>s</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MHS16</td><td></td></tr><tr><td>0.5% Eosin Y 溶液、アルコール</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT110116</td><td></td></tr><tr><td>Safranin O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8884</td><td></td></tr><tr><td>Fast Green</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F7258</td><td></td></tr><tr><td>Shandon Excelsior ESTM Tissue Processor</td><td>Thermo Fisher</td><td>A78400006</td><td></td></tr><tr><td>Shandon Histocentre&trade; 3 組織埋め込みCenter</td><td>Thermo Fisher</td><td>B64100010</td><td></td></tr><tr><td>全自動回転式ミクロトーム</td><td>Leica</td><td>RM2255</td><td></td></tr><tr><td>DiD</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td>V-22887</td><td></td></tr><tr><td>D-MEM High Glucose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D5648</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>GIBCO, Life Technologies</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>0.25% Trypsin-EDTA</td><td>Invitrogen</td><td>25200-114</td><td></td></tr><tr><td>10 cm ペトリ皿</td><td>コーニング</td><td>V118877</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機</td><td>ベックマン</td><td>オプティマ MAX-TL</td><td></td></tr><tr><td>蛍光顕微鏡</td><td>オリンパス</td><td>BX53</td><td></td></tr><tr><td>0.4% トリパン ブルー溶液</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>93595</td><td></td></tr><tr><td>Titetamme</td><td>Virbac (Zoletil 50)</td><td>1000000188</td><td></td></tr><tr><td>ゾラゼパム</td><td>Virbac(Zoletil 50)</td><td>1000000188</td><td></td></tr><tr><td>使い捨て無菌低血清注射器 26G</td><td>上海三沢医療工業</td><td>なし</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum In Vivo イメージングシステム</td><td>PerkinElmer</td><td>124262</td><td></td></tr><tr><td>Living Imaging 4.0ソフトウェア</td><td>PerkinElmer</td><td>なし</td><td></td></tr></tbody></table>

生体内でひと脂肪由来間葉系幹細胞が脂溶性膜の蛍光色素をラット膝関節変形性関節症モデルでの追跡

In Vivo Tracking of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells in a Rat Knee Osteoarthritis Model with Fluorescent Lipophilic Membrane Dye

膝変形性関節症 (コア)、ひと脂肪由来間葉系幹細胞 (haMSC) 療法の臨床応用を支援するため、セルの永続性の有効性と動物モデルにおける haMSCs の体内を調べた。脂溶性色素と haMSCs の細胞膜にラベルを付ける方法を示しました。その後、心術のコアを持つラットの標識細胞の関節内注入は、生体内イメージング システム動的に監視されました。我々 は、親油性を採用 carbocyanines でした (DilC18 (5))、周囲の組織から自然の緑色蛍光の励起を避けるために赤色レーザーを活用した遠赤色蛍光 Dil (dialkylcarbocyanines) アナログ。またの赤いシフトの発光スペクトルは、生きている動物の深い組織イメージングとラベリングのプロシージャは細胞毒性または haMSCs に機能障害生じなかった許可でした。このアプローチは、KOA ラットモデルにおける haMSCs の効率的な追跡方法であると示されています。最適な投与経路と前臨床試験で他のソースからの MSCs の投与量を決定するこのメソッドのアプリケーションが使えます。

コア モデルを誘導するために MM は SD ラット (図 3) の右ひざ関節で行われました。手術後 8 週間ラットを犠牲に、膝継手の連続切片を両方 H で行った &#38; E、サフラニン O/高速グリーン染色 (図 4)。H の &#38; E 染色、関節軟骨の表面の展示手術膝手術をせず通常の関節よりも粗いボーダー。サフラニン-O/高速緑染色 (赤染色) 減少のプロテオグリカンを観測し、共同手術表現型コア変性の進行を示されている通常のものと比較して繊維コラーゲン (緑染色) を増加手術によって誘導されます。人間のコアの進行に似せて、3 週間、6 週間、病態を評価し、治療の時間を決定する MM 後 8 週間でラットが犠牲になった。
ラベルは haMSCs は光で生体内イメージング システム コア ラットモデルにおけ...

このプロトコルでは、効率的に遠赤色蛍光 (IA) の関節内注入によるラット膝変形性関節症 (KOA) モデルで、セルの永続性とひと脂肪由来間葉系幹細胞 (haMSCs) の体内を監視する方法について説明します。

In order to support the clinical application of human adipose-derived mesenchymal stem cell (haMSC) therapy for knee osteoarthritis (KOA), we examined the ...

本手順の全体的な目的は、生体内蛍光イメージングを用いて、ラット膝骨関節炎（KOAモデル）におけるヒト脂肪由来間葉系幹細胞の細胞生存性と体内分布の有効性を評価することです。生体内での幹細胞トラッキングは、KOA動物モデルにおけるヒト脂肪由来間葉系幹細胞の定着と分布に関する、再生医療分野における重要な疑問への回答に役立ちます。DiDを使用する主な利点は、その放出スペクトルがラットに適しているため、細胞毒性や色素標識細胞への機能的損傷を与えることなく、生きた動物の深部組織イメージングが可能であることです。まず、麻酔をかけた体重250〜300g、週齢8〜12週の雄性Sprague Dawleyラットを、加温パッドの上に左側臥位で配置します。カミソリを使用して右膝を完全に剃毛し、手術部位を10%ポビドンヨード溶液と70%エタノールで消毒します。非手術領域をサージカルパッドで覆います。次に、メスを用いて膝蓋腱に沿って外側に2cmの切開を加え、関節包を露出させます。続いて、外科用メスで内側側副靭帯を切断し、半月板を大腿骨方向へ反転させ、内側半月板をピンセットで把持します。メスを使用して、脛骨付着部から半月板の最も狭い部分を切断します。信頼性と再現性のあるKOA発症を導くため、各実験動物において半月板の大腿骨側を完全に切断します。その後、4-0の可視縫合糸で関節包を閉鎖し、ラットが完全に回復するまで観察します。手術の8週間後、80%コンフルエントに達したヒト脂肪由来間葉系細胞の培養液に、2 mLのtrypsin plus EDTAを加え、37 °Cで3分間処理して細胞を剥離させます。数分後、4 mLの完全培地でトリプシンを中和し、遠心分離により細胞を回収します。ペレットを5 mLの無血清培地で、1×10⁶ cells/mLの濃度になるように再懸濁します。その後、50 µLのDiD細胞標識溶液を用いて、37 °Cで50分間細胞を標識します。インキュベーション終了後、遠心分離によって細胞を回収し、1回あたり5 mLのPBSで2回洗浄します。最後の遠心分離後、細胞をPBSで100 µLあたり2.5 × 10⁶ viable cellsの濃度に希釈し、26G針を装着した1 mLシリンジに細胞を充填します。次に、1匹目の実験動物の関節炎を起こした膝を再度除毛して関節部位を露出させ、露出した皮膚を70%エタノールで消毒します。ラベル化した細胞を、膝蓋靭帯の内側、大腿骨内側顆、および脛骨内側顆によって形成される三角形の中心に注入し、イメージングソフトウェアを開きます。in vivo生物発光イメージングシステムを起動し、動物をイメージングシステムのセントラルステージ上に仰臥位で配置します。チャンバーのドアを閉めた状態で蛍光ボックスを確認し、適切な励起および蛍光放出フィルターセットを選択しま

in-vivo-tracking-human-adipose-derived-mesenchymal-stem-cells-rat

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

発生生物学

このビデオでは、蛍光色素を持つヒト胚性幹細胞と間葉系幹細胞のラベリングのテクニックを示しています。この手法は、生体内で光学イメージングを、蛍光顕微鏡による病理組織学的相関の移植された幹細胞の追跡に使用することができます。...

光イメージングによる非侵襲的検出のための蛍光色素で標識幹細胞

で小動物の筋肉の生着のダイナミクスの追跡インビボでの蛍光イメージング

私たちは、サポシンC（SAPC） -ジオレオイルホスファチジルセリン（DOPS）ナノベシクルで配信蛍光マーカーのin vivo定量のためのマルチアングル回転光学イメージング（MAROI）システムについて説明します。癌および関節炎のマウスモデルを用いて、我々はMAROI信号曲線分析が正確なマッピングおよび疾患過程の生物学的特徴付けのために使用することができる方法を実証する。...

蛍光SAPC-DOPSナノベシクルを用いて脳腫瘍、関節炎のin vivo光イメージング中

単球は自然免疫の主要な調節因子であり、末梢の単核食作用系の更新や炎症の場合に重要な役割を果たします。この原稿では、単球の動員メカニズムを研究するためのマウスのカルバリア骨髄のリアルタイムイメージングの手順について説明します。...

マウス骨髄単球の追跡<em&gt;インビボ</em

このプロトコルは、ガンマシンチグラフィーを使用して細胞の生存と組織分布を決定するために、馬の間葉系幹細胞の放射性標識と馬の腱損傷への移植を説明しています。...

馬腱でテクネチウム-99m標識骨髄間葉系幹細胞のin vivoイメージングと追跡中

このプロトコルは、生体内で大腿骨骨髄内の細胞の動きを追跡するために使用できる新しいマウス大腿骨窓室モデルについて説明しています。生体内多光子蛍光顕微鏡は、大腿骨骨髄の3つの成分(血管系、コラーゲンマトリックス、好中球)を経時的にイメージングするために使用されます。...

以下のための大腿骨のウィンドウチャンバーモデル<em&gt;インビボ</emマウス骨髄内&gt;細胞トラッキング

間葉系幹細胞 (MSC) の小さい割合 (1-5%) が静脈注射または腹腔内炎症コロン1,2ホーム大腸炎症モデルにおけるマウスの調査は示した。本研究は、MSCs...

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脂肪細胞分化を評価する従来の方法では遺伝子発現の変化に固有ではありませんが、安くて使いやすい。間葉系細胞の分化成熟脂肪細胞の血統の特定のマーカーを使用して定量化するアッセイを開発しました。このアッセイでは、基礎医学と臨床医学の間で多様なアプリケーションがあります。...

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ここでは、ヒト皮下脂肪組織(hSATMVEC)から微小血管内皮細胞を単離、培養、および表現型決定するためのプロトコールについて説明します。さらに、hSATMVEC-脂肪細胞クロストークの実験モデルについても説明します。...

ヒト皮下脂肪組織における脂肪内皮細胞/脂肪細胞クロストークの研究

生体外移植モデルを用いて、赤身マウスの内臓白色脂肪組織の前縁部の小片を7〜10日間培養し、高脂肪食摂食中の脂肪組織炎症の誘導と研究を可能にします。...

高脂肪食様脂肪組織炎症の 体外 マウスモデル

学ぶラット膝関節変形性関節症モデルにおけるDiD蛍光標記を用いたヒト脂肪由来間葉系幹細胞の生体内追跡法。この手法は細胞の持続性と分布を評価し、再生医療研究に貢献します。

生体内でひと脂肪由来間葉系幹細胞が脂溶性膜の蛍光色素をラット膝関節変形性関節症モデルでの追跡

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