Methods for Imaging Intracellular pH of the Follicle Stem Cell Lineage in Live <em>Drosophila</em> Ovarian Tissue

Sumitra Tatapudy; Marimar Benitez; Todd Nystul

doi:10.3791/56316

ライブショウジョウバエ卵巣組織の卵胞幹細胞系列のイメージング細胞内 pH の方法

JoVE Journal
Developmental Biology

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Methods for Imaging Intracellular pH of the Follicle Stem Cell Lineage in Live Drosophila Ovarian Tissue

ライブショウジョウバエ卵巣組織の卵胞幹細胞系列のイメージング細胞内 pH の方法

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08:05 min

September 26, 2017

DOI: 10.3791/56316-v

Sumitra Tatapudy¹, Marimar Benitez¹, Todd Nystul¹

¹Departments of Anatomy and OB/GYN-RS,University of California, San Francisco

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ライブショウジョウバエ卵巣組織の上皮幹細胞系列の細胞内 pH のイメージングのためのプロトコルを提供します。定量的蛍光イメージングを用いたバイオセンサー pH センサー、mCherry::pHluorin、イメージを表現する遺伝子組換えハエを生成し、標準曲線を生成 pH 値に変換する蛍光強度の方法について述べる。

この手順の全体的な目標は、生きた外植ショウジョウバエ卵巣組織内の卵胞細胞の細胞内pHを測定することです。この方法は、細胞内pHの変化が硫酸塩の決定にどのように寄与するかなど、幹細胞および発生生物学における重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、生体内の無傷組織内のpHを正確に定量

実験を開始するには、3Dプリントされた取り付けチャンバーの平らな面に真空グリースの薄いコーティングを塗布して、取り付けチャンバーを準備します。平らな面を22 x 40ミリメートルのカバースリップに置き、カバースリップを取り付けチャンバーに密封します。次に、500マイクロリットルの解剖緩衝液で雌の成虫ハエから卵巣を解剖します。

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